| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 本文所用英文缩写单词 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 荧光原位杂交技术概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 荧光原位杂交技术的原理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 荧光原位杂交技术的发展 | 第13-16页 |
| 1.2 基于信号放大的荧光原位杂交 | 第16-21页 |
| 1.2.1 原位PCR-荧光原位杂交(In Situ PCR-FISH) | 第17-18页 |
| 1.2.2 滚环放大-荧光原位杂交(RCA-FISH) | 第18-19页 |
| 1.2.3 杂交链式反应-荧光原位杂交(HCR-FISH) | 第19-21页 |
| 1.3 本文拟开展的研究工作 | 第21-23页 |
| 第2章 基于超级三明治的荧光原位杂交技术用于mRNA检测 | 第23-44页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 实验部分 | 第24-30页 |
| 2.2.1 仪器与试剂 | 第24-26页 |
| 2.2.2 溶液的配置 | 第26页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.2.4 细胞的固定 | 第27页 |
| 2.2.5 SFISH和FISH的过程 | 第27-28页 |
| 2.2.6 抑制和药物处理TK1 mRNA | 第28页 |
| 2.2.7 原位双色检测TK1和Survivin mRNA | 第28页 |
| 2.2.8 ND6突变mRNA的荧光成像 | 第28-29页 |
| 2.2.9 组织切片中TK1 mRNA的检测 | 第29页 |
| 2.2.10 激光共聚焦成像 | 第29页 |
| 2.2.11 实时荧光定量PCR与流式细胞术分析 | 第29-30页 |
| 2.2.12 电泳分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第30-42页 |
| 2.3.1 实验原理 | 第30-31页 |
| 2.3.2 实验原理的验证 | 第31-32页 |
| 2.3.3 时间的优化 | 第32-33页 |
| 2.3.4 mRNA表达水平的考察 | 第33-34页 |
| 2.3.5 特异性与选择性的考察 | 第34-35页 |
| 2.3.6 灵敏度的考察 | 第35-37页 |
| 2.3.7 对mRNA表达水平变化的检测 | 第37-39页 |
| 2.3.8 对两种mRNA的双色原位检测 | 第39-40页 |
| 2.3.9 线粒体突变mRNA的检测 | 第40-42页 |
| 2.3.10 组织切片中TK1 mRNA的检测 | 第42页 |
| 2.4 小结 | 第42-44页 |
| 第3章 基于荧光共振能量转移的杂交链式反应用于mRNA的原位检测 | 第44-62页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 实验部分 | 第44-51页 |
| 3.2.1 主要仪器和试剂 | 第44-47页 |
| 3.2.2 溶液的配置 | 第47页 |
| 3.2.3 细胞培养 | 第47-48页 |
| 3.2.4 荧光实验 | 第48页 |
| 3.2.5 细胞固定 | 第48-49页 |
| 3.2.6 原位免洗脱检测 | 第49页 |
| 3.2.7 抑制实验和药物实验 | 第49页 |
| 3.2.8 其他细胞和组织切片的应用 | 第49-50页 |
| 3.2.9 激光共聚焦成像 | 第50页 |
| 3.2.10 实时荧光定量PCR分析 | 第50页 |
| 3.2.11 电泳分析 | 第50-51页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第51-61页 |
| 3.3.1 实验原理及探针设计 | 第51-52页 |
| 3.3.2 实验原理的验证 | 第52-53页 |
| 3.3.3 时间与浓度的考察 | 第53-54页 |
| 3.3.4 细胞内的可行性验证 | 第54-56页 |
| 3.3.5 对照实验 | 第56-57页 |
| 3.3.6 信号放大效果的验证 | 第57-59页 |
| 3.3.7 对TK1 mRNA表达水平变化的考察 | 第59-60页 |
| 3.3.8 组织切片中TK1 mRNA的检测 | 第60-61页 |
| 3.4 小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-76页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
