| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-32页 |
| 1 哺乳动物卵母细胞体外成熟的研究进展 | 第15-25页 |
| 1.1 前言 | 第15页 |
| 1.2 卵子的发生的过程 | 第15-18页 |
| 1.2.1 卵原细胞的形成和增殖 | 第15-16页 |
| 1.2.2 卵母细胞的形成和生长 | 第16页 |
| 1.2.3 卵母细胞的成熟 | 第16-17页 |
| 1.2.4 卵母细胞的成熟调控 | 第17-18页 |
| 1.3 卵母细胞的体外成熟 | 第18-22页 |
| 1.3.1 卵母细胞的采集方法 | 第19-20页 |
| 1.3.2 卵母细胞的体外成熟质量的评定 | 第20页 |
| 1.3.3 卵母细胞体外成熟的方法 | 第20-22页 |
| 1.4 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第22-25页 |
| 1.4.1 动物的种类 | 第22页 |
| 1.4.2 动物的年龄 | 第22页 |
| 1.4.3 动物的生产性能 | 第22页 |
| 1.4.4 卵母细胞的形态和类型 | 第22-23页 |
| 1.4.5 卵泡的大小和形态 | 第23页 |
| 1.4.6 卵丘细胞 | 第23页 |
| 1.4.7 颗粒细胞 | 第23-24页 |
| 1.4.8 卵巢贮存温度和时间 | 第24页 |
| 1.4.9 激素 | 第24-25页 |
| 2 褪黑素的研究进展 | 第25-31页 |
| 2.1 褪黑素简介 | 第25-26页 |
| 2.2 褪黑素的合成 | 第26页 |
| 2.3 褪黑素的功能简介 | 第26-28页 |
| 2.4 褪黑素对颗粒细胞的影响 | 第28页 |
| 2.5 褪黑素对卵母细胞体外培养的影响 | 第28-29页 |
| 2.6 褪黑素对胚胎体外培养的影响 | 第29页 |
| 2.7 褪黑素对线粒体的影响 | 第29-30页 |
| 2.8 褪黑素的作用机制和受体的信号通路 | 第30-31页 |
| 3 目的与意义 | 第31-32页 |
| 第二部分 试验研究 | 第32-62页 |
| 第一章 褪黑素对水牛卵母细胞体外成熟和胚胎体外发育的影响 | 第33-43页 |
| 1 材料与方法 | 第34-38页 |
| 1.1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 组织材料 | 第34页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第34页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第34页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第34-35页 |
| 1.2 试验方法 | 第35-37页 |
| 1.2.1 水牛卵母细胞的收集及体外成熟培养 | 第35-36页 |
| 1.2.2 水牛卵母细胞的体外受精(IVF) | 第36页 |
| 1.2.3 水牛早期胚胎体外培养(IVC) | 第36-37页 |
| 1.2.4 水牛COCs和水牛卵母细胞免疫荧光染色 | 第37页 |
| 1.3 试验设计 | 第37页 |
| 1.4 数据处理分析 | 第37-38页 |
| 2 结果 | 第38-40页 |
| 2.1 褪黑素受体在卵丘细胞和卵母细胞上的表达分析 | 第38-39页 |
| 2.2 成熟液中添加不同浓度褪黑素对水牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第39-40页 |
| 2.3 成熟液中添加不同浓度褪黑素对水牛卵母细胞后续胚胎发育能力的影响 | 第40页 |
| 3 分析与讨论 | 第40-42页 |
| 4 小结 | 第42-43页 |
| 第二章 褪黑素对水牛卵母细胞体外成熟作用机制的探究 | 第43-62页 |
| 1 材料与方法 | 第44-50页 |
| 1.1 材料 | 第44-46页 |
| 1.1.1 组织材料 | 第44页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第44页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第44页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第44-46页 |
| 1.1.5 引物合成 | 第46页 |
| 1.2 试验方法 | 第46-49页 |
| 1.2.1 水牛COCs的收集与体外成熟培养 | 第46页 |
| 1.2.2 水牛卵母细胞的体外受精(IVF) | 第46页 |
| 1.2.3 水牛早期胚胎体外培养(IVC) | 第46-47页 |
| 1.2.4 水牛卵母细胞成熟前后活性氧的检测 | 第47页 |
| 1.2.5 水牛卵母细胞成熟前后线粒体膜电位和线粒体分布检测 | 第47页 |
| 1.2.6 水牛卵母细胞成熟前后cAMP、cGMP和抗氧化物酶的检测 | 第47-48页 |
| 1.2.7 水牛颗粒细胞的收集及基因组的提取和反转录 | 第48页 |
| 1.2.8 水牛卵母细胞的微量反转 | 第48-49页 |
| 1.2.9 实时荧光定量PCR | 第49页 |
| 1.3 试验设计 | 第49-50页 |
| 1.4 统计分析 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-58页 |
| 2.1 褪黑素受体拮抗剂、褪黑素受体激动剂和褪黑素对水牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第50-51页 |
| 2.2 褪黑素受体拮抗剂、褪黑素受体激动剂和褪黑素对水牛卵母细胞体外成熟受精后胚胎发育能力的影响 | 第51-52页 |
| 2.3 褪黑素对水牛卵母细胞成熟后活性氧含量的影响 | 第52-53页 |
| 2.4 褪黑素对水牛卵母细胞成熟后线粒体分布和线粒体膜电位的影响 | 第53-55页 |
| 2.4.1 褪黑素对水牛卵母细胞成熟后线粒体分布的影响 | 第53-54页 |
| 2.4.2 褪黑素对水牛卵母细胞成熟后线粒体膜电位的影响 | 第54-55页 |
| 2.5 褪黑素对水牛卵母细胞成熟后cAMP和cGMP含量的影响 | 第55-56页 |
| 2.6 褪黑素对水牛卵母细胞成熟后过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶含量的影响 | 第56页 |
| 2.7 褪黑素对水牛卵母细胞成熟后相关基因MRNA表达量的影响 | 第56-58页 |
| 3 分析与讨论 | 第58-61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 英文缩略词 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
