中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 引言 | 第9-31页 |
1.1 人巨细胞病毒 | 第9-16页 |
1.1.1 人巨细胞病毒简介 | 第9-10页 |
1.1.2 人巨细胞病毒基因组结构与基因的表达 | 第10-12页 |
1.1.3 人巨细胞病毒基因组的复制 | 第12-16页 |
1.2 乙型肝炎病毒 | 第16-21页 |
1.2.1 乙型肝炎病毒简介 | 第16-19页 |
1.2.2 乙型肝炎病毒感染相关疾病 | 第19-21页 |
1.2.3 抗乙型肝炎病毒药物 | 第21页 |
1.3 小RNA分子 | 第21-26页 |
1.3.1 microRNA的简介 | 第22-25页 |
1.3.2 miRNA的应用 | 第25-26页 |
1.4 肠炎沙门氏菌 | 第26-31页 |
1.4.1 沙门氏菌简介 | 第26-28页 |
1.4.2 沙门氏菌作为基因递送载体的应用 | 第28-31页 |
第二章 基础实验材料与方法 | 第31-49页 |
2.1 实验仪器与设备 | 第31-32页 |
2.2 实验材料与试剂 | 第32页 |
2.3 基础分子克隆相关实验技术方法 | 第32-35页 |
2.3.1 大肠杆菌化转感受态的制备和使用 | 第32-33页 |
2.3.2 大肠杆菌电转感受态的制备和使用 | 第33-34页 |
2.3.3 大肠杆菌质粒DNA的提取(SDS裂解法) | 第34-35页 |
2.3.4 普通PCR反应和限制性酶切 | 第35页 |
2.4 酵母转化相关实验方法 | 第35-37页 |
2.4.1 酵母培养基的配制 | 第35-36页 |
2.4.2 酵母转化 | 第36-37页 |
2.4.3 X-gal显色实验 | 第37页 |
2.5 沙门氏菌转化培养相关实验方法 | 第37-39页 |
2.5.1 沙门氏菌电转感受态细胞的制备和使用 | 第37-38页 |
2.5.2 沙门氏菌质粒的提取 | 第38-39页 |
2.6 细胞生物学相关实验方法 | 第39-42页 |
2.6.1 细胞培养基及实验相关试剂 | 第39页 |
2.6.2 细胞的培养(以293T细胞为例) | 第39-40页 |
2.6.3 细胞的转染(磷酸钙转染法) | 第40-41页 |
2.6.4 细胞的转染(脂质体转染法) | 第41-42页 |
2.7 蛋白质学相关实验方法 | 第42-45页 |
2.7.1 细胞蛋白样品的制备 | 第42页 |
2.7.2 SDS-PAGE凝胶电泳和Western Blot检测 | 第42-44页 |
2.7.3 免疫共沉淀(Co-IP) | 第44-45页 |
2.8 病毒学相关实验方法 | 第45-46页 |
2.8.1 HCMV病毒的感染与扩增 | 第45页 |
2.8.2 HCMV病毒滴度的测定 | 第45-46页 |
2.9 小鼠实验相关方法 | 第46-49页 |
2.9.1 小鼠的高压尾静脉注射 | 第46-47页 |
2.9.2 小鼠的灌胃 | 第47页 |
2.9.3 小鼠的采血 | 第47-48页 |
2.9.4 小鼠的肝脏采摘 | 第48-49页 |
第三章 人巨细胞病毒复制相关蛋白UL70与宿主因子DNAJB6间相互作用关系的研究 | 第49-65页 |
3.1 研究背景 | 第49-51页 |
3.2 研究方法与结果 | 第51-62页 |
3.2.1 酵母双杂交实验验证pUL70与DNAJB6间的相互作用 | 第51-52页 |
3.2.2 免疫共沉淀实验验证pUL70与DNAJB6间的相互作用 | 第52-55页 |
3.2.3 pUL70与DNAJB6的相互作用区域的鉴定 | 第55-58页 |
3.2.4 pUL70与DNAJB6间相互作用生物学功能上的研究 | 第58-62页 |
3.3 总结与讨论 | 第62-65页 |
第四章 microRNA-122为基础的抗乙型肝炎病毒的相关研究 | 第65-88页 |
4.1 研究背景 | 第65-66页 |
4.2 沙门氏菌介导传递miR-122真核表达载体抑制小鼠体内的HBV感染 | 第66-82页 |
4.2.1 miR-122真核表达载体的构建 | 第66-68页 |
4.2.2 miR-122表达载体在培养细胞HepG2和HepG2.2.15中表达水平的检测 | 第68-72页 |
4.2.3 减毒的沙门氏菌介导传递的miR-122表达载体在培养细胞中的表达水平的检测 | 第72-75页 |
4.2.4 沙门氏菌减毒株介导传递的miR-122表达载体在培养细胞内对HBV基因表达和DNA复制的抑制作用 | 第75-79页 |
4.2.5 沙门氏菌减毒株介导传递的miR-122表达载体在小鼠体内对HBV基因表达和DNA复制的抑制作用 | 第79-82页 |
4.3 总结与讨论 | 第82-88页 |
参考文献 | 第88-99页 |
攻博期间已发表和正在撰写的科研成果 | 第99-100页 |
致谢 | 第100页 |