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拟南芥CURT1蛋白在类囊体基粒形成及光合作用中的功能研究

摘要第7-9页
Summary第9-11页
符号说明第12-16页
1. 前言第16-31页
    1.1. 光合作用第16页
    1.2. 光合蛋白复合体第16-18页
    1.3. 线性电子传递(LEF)和环式电子传递(CEF)第18-20页
    1.4. 光合作用的调控:短期反应第20-22页
    1.5. 光合作用的调控:长期反应第22-23页
    1.6. 横向异质性的结构优势第23-24页
    1.7. 影响膜折叠的因素第24-29页
        1.7.1. 类囊体膜蛋白的磷酸化状态第24-27页
        1.7.2. 膜内脂类分子的成分第27页
        1.7.3. 膜折叠促进蛋白第27-29页
    1.8. CURT1 (Curvature Thylakoid1)蛋白家族第29-31页
2. 材料方法第31-45页
    2.1. 植物及生长条件第31页
    2.2. 基因型分析第31-32页
    2.3. RNA提取及cDNA合成第32-33页
    2.4. 农杆菌穿梭质粒的构建及突变株curt1a,curt1b和curt1abc的回补第33-34页
        2.4.1. 回补curt1a突变株的质粒构建第33-34页
        2.4.2. 回补curt1b突变株的质粒构建第34页
        2.4.3. 回补curt1abc突变株的质粒构建第34页
    2.5. 农杆菌介导转化植物第34-35页
    2.6. 光合参数测量第35页
    2.7. 光抑制研究(D1修复速率分析)第35-36页
    2.8. 叶绿体和类囊体的提取第36页
    2.9. SDS电泳和Western blot第36-45页
        2.10. 蓝色活性电泳(Blue-Native)和第二向电泳(2-D PAGE)第37-38页
        2.11. 蛋白定量第38页
        2.12. 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP)第38页
        2.13. 免疫胶体金标记(Immunogold labeling)第38-39页
        2.14. 扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)分析第39-45页
3. 结果第45-71页
    3.1. 过表达植株oeCURT1A和四突变植株curt1abcd的性质研究第45-55页
        3.1.1. CURT1A蛋白在过表达植株oeCURT1A中主要分布于基粒边缘第45-46页
        3.1.2. 过表达植株oeCURT1A和四突变植株curt1abcd在不同光照条件下生长迟缓第46-48页
        3.1.3. CURT1A的表达水平对光合作用有多效性影响第48-50页
        3.1.4. CURT1A蛋白过表达未影响类囊体主要蛋白复合体的组装第50-52页
        3.1.5. 生长光照条件下过表达植株oeCURT1A表现出更显著的状态2第52页
        3.1.6. CURT1蛋白水平在黑暗,生长光照和高光照条件下保持稳定第52-53页
        3.1.7. 高光照条件下D1修复过程在过表达植株oeCURT1A中正常,在四突变植株curt1abcd有轻微影响第53-55页
    3.2. 基粒结构受(Ⅰ) CURT1蛋白的剂量和(Ⅱ)类囊体蛋白的磷酸化两个因素控制第55-59页
        3.2.1. stn7和stn7 8突变植株中的CURT1A蛋白水平降低第55-57页
        3.2.2. 过表达植株oeCURT1A中的类囊体蛋白磷酸化比例没有明显变化第57-58页
        3.2.3. 四突变植株curt1abc tap38的基粒结构与三突变植株curt1abc相似第58-59页
    3.3. CURT1剂量调控基粒结构机制中CURT1A起主要作用第59-64页
        3.3.1. 过表达植株oeCURT1A中仅CURT1A蛋白的表达量提高第59-60页
        3.3.2. 三突变植株curt1abc中人工表达CURT1A可以重新形成基粒第60-62页
        3.3.3. 含有CURT1A的蛋白复合体在高光条件下解聚第62-64页
    3.4. CURT1蛋白磷酸化的影响:构建CURT1磷酸化位点缺失(phospho-siteexchange,PSE)回补植株第64-66页
    3.5. CURT1互作蛋白的研究第66-69页
        3.5.1. 不同光照条件下CURT1的多聚化不受STN8调控第66-68页
        3.5.2. 类囊体硫氰酸酶类似蛋白(Thylakoid Rhodanese-Like protein,TROL)不是CURT1复合体的稳定互作蛋白第68-69页
    3.6. CURT1蛋白的进化分析:集胞藻CURT1类似物(synCURT1)回补三突变植株curt1abc后未形成基粒第69-71页
4. 讨论第71-82页
    4.1. 基粒是否是光合作用的必需结构?第71-75页
    4.2. CURT1蛋白如何引起基粒形成?第75-78页
    4.3. 基粒动态变化是如何实现的?第78-82页
5. 附录第82-85页
6. 创新点总结第85-87页
7. 参考文献第87-99页
致谢第99-101页
在读期间发表及待发表文章第101-102页
附件第102-115页
学位论文评阅及答辩情况表第115页

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