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人参不定根规模化生产工艺研究与内生真菌代谢人参皂苷研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第15-27页
    1.1 引言第15页
    1.2 人参资源现状第15-17页
        1.2.1 人参生产现状第15-16页
        1.2.2 人参市场现状第16-17页
    1.3 生物反应器生产药用植物研究进展第17-19页
        1.3.1 药用植物生物反应器第17-18页
        1.3.2 生物反应器在人参上的应用第18-19页
    1.4 诱导子对植物代谢的影响第19-20页
        1.4.1 诱导子在植物代谢中的作用第19-20页
        1.4.2 MeJA作为诱导子的应用第20页
    1.5 三萜皂苷生物合成与调控第20-23页
        1.5.1 三萜皂苷合成途径第20-23页
        1.5.2 三萜皂苷合成调控研究第23页
    1.6 实时荧光定量FQ-PCR第23-24页
    1.7 人参内生菌的研究进展第24-25页
        1.7.1 内生菌概述第24-25页
        1.7.2 人参内生菌第25页
    1.8 本研究的目的和意义第25-27页
2 人参不定根的生物反应器培养第27-40页
    2.1 引言第27页
    2.2 材料与仪器第27-28页
        2.2.1 实验材料第27-28页
        2.2.2 主要实验试剂第28页
        2.2.3 主要实验设备第28页
    2.3 试验方法第28-32页
        2.3.1 培养条件优化第28-29页
        2.3.2 茉莉酸甲酯(MeJA)诱导第29页
        2.3.3 人参皂苷测定第29-30页
        2.3.4 人参不定根中试生产第30-32页
    2.4 结果与分析第32-36页
        2.4.1 培养条件第32-34页
        2.4.2 中试生产第34-36页
    2.5 讨论第36-39页
        2.5.1 基础培养基第36页
        2.5.2 IBA浓度第36-37页
        2.5.3 蔗糖浓度第37页
        2.5.4 接种量第37页
        2.5.5 通气量第37-38页
        2.5.6 MeJA诱导浓度第38页
        2.5.7 种子苗对培养的影响第38-39页
        2.5.8 生物反应器中试放大第39页
    2.6 小结第39-40页
3 MeJA诱导人参皂苷生物合成相关基因表达分析第40-52页
    3.1 引言第40页
    3.2 材料与仪器第40-41页
        3.2.1 实验材料第40页
        3.2.2 主要实验试剂第40页
        3.2.3 主要实验设备第40-41页
    3.3 试验方法第41-45页
        3.3.1 人参皂苷测定第41页
        3.3.2 总RNA的提取第41-42页
        3.3.3 引物合成第42-43页
        3.3.4 FQ-PCR第43-45页
    3.4 结果与分析第45-48页
        3.4.1 三萜皂苷测量结果第45-46页
        3.4.2 总RNA提取结果第46页
        3.4.3 MeJA诱导下三萜合成途径主要基因差异实时定量PCR结果第46-48页
    3.5 讨论第48-50页
        3.5.1 MeJA诱导下皂苷积累量变化与定量PCR目的基因选择第48页
        3.5.2 MeJA诱导下人参三萜皂苷合成相关基因表达量变化第48-50页
        3.5.3 人参皂苷合成与相关基因表达间关系第50页
    3.6 小结第50-52页
        3.6.1 MeJA诱导下三萜皂苷合成相关基因表达量变化第50-51页
        3.6.2 MeJA诱导三萜合成提高主效因子第51-52页
4 产三萜皂苷内生真菌的分离与抗菌特性研究第52-70页
    4.1 引言第52页
    4.2 材料与仪器第52-53页
        4.2.1 实验材料第52页
        4.2.2 主要实验试剂第52页
        4.2.3 主要实验设备第52-53页
    4.3 试验方法第53-56页
        4.3.1 样品表面消毒第53页
        4.3.2 内生真菌分离纯化与液体培养第53页
        4.3.3 DNA提取第53-54页
        4.3.4 26S rDNA的PCR扩增第54页
        4.3.5 PCR产物检测分析第54-55页
        4.3.6 皂苷含量测定第55页
        4.3.7 体外抗菌能力研究第55-56页
    4.4 结果与分析第56-68页
        4.4.1 内生真菌多样性第56-63页
        4.4.2 内生菌三萜皂苷代谢第63-67页
        4.4.3 内生真菌体外抗菌能力第67-68页
    4.5 讨论第68-69页
        4.5.1 人参与龙牙楤木中分离得到的内生真菌第68-69页
        4.5.2 人参与龙牙楤木内生真菌皂苷三萜代谢能力与抗菌能力第69页
    4.6 本章小结第69-70页
        4.6.1 人参与龙牙楤木内生菌分类第69页
        4.6.2 人参与龙牙楤木内生菌皂苷代谢与抗菌能力第69-70页
结论第70-72页
参考文献第72-85页
附录第85-91页
攻读学位期间发表的学术论文第91-92页
致谢第92-93页

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