中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第9-11页 |
第一节:肠道病毒71型上海流行株的分离与鉴定 | 第11-19页 |
前言 | 第11页 |
1.1 实验材料 | 第11-12页 |
1.2 实验方法 | 第12-17页 |
1.3 实验结果 | 第17-18页 |
1.3.1 病毒的分离与鉴定 | 第17-18页 |
1.4 讨论 | 第18-19页 |
第二节:肠道病毒71型上海流行株全基因组测序及分析 | 第19-39页 |
前言 | 第19页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-24页 |
2.3 实验结果 | 第24-37页 |
2.3.1 全基因组测序 | 第24-26页 |
2.3.2 测序结果分析 | 第26-28页 |
2.3.3 构建EV71系统发生树 | 第28-35页 |
2.3.4 肠道病毒重组分析 | 第35-37页 |
2.4 讨论 | 第37-39页 |
第三节:肠道病毒71型上海流行株的复制能力分析 | 第39-48页 |
前言 | 第39页 |
3.1 实验材料 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-41页 |
3.3 实验结果 | 第41-47页 |
3.3.1 Real Time PCR定量EV71病毒RNA | 第41-43页 |
3.3.2 MTT法检测病毒TCID_(50) | 第43-44页 |
3.3.3 EV71感染RD细胞致病性分析 | 第44-47页 |
3.4 讨论 | 第47-48页 |
第四节:肠道病毒71型上海高复制株感染性克隆的构建 | 第48-64页 |
前言 | 第48页 |
4.1 实验材料 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-55页 |
4.3 实验结果 | 第55-62页 |
4.3.1 EV71感染性克隆构建策略 | 第55-60页 |
4.3.1.1 构建重组质粒pcDNA3.1-EV71-Poly(A55) | 第55-57页 |
4.3.1.2 构建重组质粒pcDNA3.1-T7-GG-EV71-Poly(A55) | 第57-60页 |
4.3.1.3 体外转录与转染RD细胞 | 第60页 |
4.3.2 拯救病毒活性的检测 | 第60-62页 |
4.3.2.1 细胞病变观察 | 第60-61页 |
4.3.2.2 RT-PCR检测 | 第61页 |
4.3.2.3 间接免疫荧光检测 | 第61-62页 |
4.4 讨论 | 第62-63页 |
4.5 小结 | 第63-64页 |
论文总结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
综述 | 第68-81页 |
参考文献 | 第77-81页 |
主要研究成果 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |