摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1.1 植物非生物胁迫 | 第9页 |
1.2 植物响应冷胁迫 | 第9-14页 |
1.2.1 低温对植物的影响 | 第9-11页 |
1.2.2 植物抗寒的基础 | 第11页 |
1.2.3 植物感受低温信号 | 第11-12页 |
1.2.4 低温信号转导途径 | 第12-14页 |
1.3 冷响应基因简介 | 第14-17页 |
1.3.1 ICE1基因 | 第14-15页 |
1.3.2 MYB转录因子 | 第15-16页 |
1.3.3 COR基因 | 第16-17页 |
1.4 植物激素与低温的关系 | 第17-19页 |
1.5 JA与非生物逆境关系 | 第19-21页 |
1.5.1 JA的合成及调控 | 第19-20页 |
1.5.2 茉莉素信号通路 | 第20-21页 |
1.5.3 JA与低温胁迫的关系 | 第21页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 实验材料和方法 | 第22-38页 |
2.1 实验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 菌株 | 第22页 |
2.1.3 质粒和载体 | 第22页 |
2.1.4 分子生物学试剂 | 第22页 |
2.1.5 其它试剂、药品 | 第22页 |
2.1.6 常用培养基的配制 | 第22-23页 |
2.1.7 常用抗生素的配制 | 第23-24页 |
2.1.8 常用溶液的配制 | 第24-25页 |
2.2 实验仪器 | 第25页 |
2.3 实验方法 | 第25-38页 |
2.3.1 植物培养方法 | 第25-26页 |
2.3.2 水稻RNA的提取 | 第26页 |
2.3.3 反转录PCR | 第26-27页 |
2.3.4 PCR扩增 | 第27-28页 |
2.3.5 PCR产物和酶切产物回收 | 第28页 |
2.3.6 质粒DNA小量提取 | 第28-29页 |
2.3.7 双酶切反应 | 第29页 |
2.3.8 目的片段与载体连接反应 | 第29-30页 |
2.3.9 大肠杆菌DH5a感受态制备 | 第30页 |
2.3.10 热激法转化大肠杆菌DH5a感受态 | 第30页 |
2.3.11 农杆菌GV3101感受态制备 | 第30-31页 |
2.3.12 农杆菌感受态电击转化 | 第31页 |
2.3.13 拟南芥转化构建超表达植株 | 第31-32页 |
2.3.14 半定量PCR检测超表达材料 | 第32-33页 |
2.3.15 酵母双杂交 | 第33-34页 |
2.3.16 蛋白的原核表达与纯化 | 第34-35页 |
2.3.17 Pull-down实验 | 第35页 |
2.3.18 蛋白电泳及免疫印记(Western blot) | 第35-36页 |
2.3.19 拟南芥超表达材料冷冻处理及存活率统计 | 第36页 |
2.3.20 实时定量PCR | 第36-38页 |
第三章 实验结果与分析 | 第38-62页 |
3.1 ICE基因家族分析 | 第38-42页 |
3.1.1 ICE基因分析 | 第38页 |
3.1.2 ICE蛋白序列特异性分析 | 第38-42页 |
3.1.3 ICE1系统进化分析 | 第42页 |
3.2 拟南芥AtCOI1与水稻OsCOI1a、OsCOI1b、OsCOI1c分析 | 第42-46页 |
3.2.1 AtCOI1与OsCOI1a、OsCOI1b、OsCOI1c的氨基酸序列比对分析 | 第42-44页 |
3.2.2 AtCOI1与OsCOI1a、OsCOI1b、OsCOI1c的系统进化树分析 | 第44页 |
3.2.3 AtCOI1与OsCOI1a、OsCOI1b、OsCOI1c的氨基酸相似性分析 | 第44-46页 |
3.3 水稻OsJAZs和拟南芥JAZs同源性分析 | 第46-48页 |
3.3.1 水稻OsJAZs和拟南芥JAZs氨基酸序列比对 | 第46-48页 |
3.3.2 水稻OsJAZs和拟南芥JAZs序列进化树分析 | 第48页 |
3.4 水稻JA信号通路OsJAZ与OsCOI1互作 | 第48-52页 |
3.4.1 OsJAZ1与OsCOI1a、OsCOI1b、OsCOI1c互作 | 第48-49页 |
3.4.2 OsJAZ10与OsCOI1b、OsCOI1c互作 | 第49-52页 |
3.5 水稻OsJAZ与OsICE1关系 | 第52-53页 |
3.5.1 OsJAZ1、OsJAZ3与OsICE1、Os ICE2的酵母双杂交 | 第52-53页 |
3.5.2 OsJAZ10及其截短与Os ICE1、Os ICE2的Y2H | 第53页 |
3.6 OsICE1、OsICE2与MYB家族OsMYBS3互作 | 第53-55页 |
3.7 OsICE1、OsICE2的功能保守研究 | 第55-60页 |
3.7.1 Os ICE1、OsICE2超表达材料构建及鉴定 | 第55-56页 |
3.7.2 Os ICE1、OsICE2超表达材料响应冷胁迫分析 | 第56-58页 |
3.7.3 Os ICE1、OsICE2超表达材料在冷胁迫下冷调控基因的表达 | 第58-60页 |
3.8 OsJAZ10和AtMAPK2、AtMAPK14互作 | 第60-62页 |
3.8.1 OsJAZ10和AtMAPK2、AtMAPK14酵母双杂交 | 第60页 |
3.8.2 OsJAZ10和AtMAPK2、AtMAPK14的pull-down实验 | 第60-62页 |
第四章 总结与展望 | 第62-66页 |
4.1 论文总结 | 第62-64页 |
4.2 讨论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
在学期间的研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |