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扬子鳄Kiss1/kiss1R基因和大脑垂体卵巢轴相关基因的克隆及其在生殖周期不同阶段的表达研究

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第一章 文献综述第13-35页
    1 Kiss/Kisspeptin受体系统与大脑垂体性腺轴第13-31页
        1.1 kiss/kisspepin受体系统简述第13页
        1.2 kiss1/kiss1R系统研究进展第13-31页
            1.2.1 Kisspeptin及其的受体的发现第13-15页
            1.2.2 Kisspeptin及其受体的结构第15-18页
            1.2.3 Kiss/Kisspeptin受体系统在脊椎动物大脑垂体性腺轴中分布与功能第18-28页
            1.2.4 Kiss/kisspeptin受体系统与大脑垂体性腺轴相关激素第28-31页
    2 鳄目(crocodylia)动物的大脑垂体性腺轴相关激素的研究进展第31-33页
    3 扬子鳄生殖调控机理研究的意义第33-35页
第二章 扬子鳄kiss1/kiss1R基因和GnRH1基因的 克隆及其序列分析第35-59页
    1 引言第35页
    2 材料和方法第35-45页
        2.1 实验材料第35-37页
            2.1.1 主要试剂及仪器第35-37页
        2.2 实验方法第37-45页
            2.2.1 实验材料第37页
            2.2.2 RNA提取第37-38页
            2.2.3 cDNA第一链的合成第38页
            2.2.4 kiss1/kiss1R和GnRH1 cDNA序列全长扩增第38-41页
            2.2.5 DNA提取第41页
            2.2.6 引物设计及目的片段的扩增和测序第41-42页
            2.2.7 生物信息学和进化分析第42-45页
    3 结果第45-57页
        3.1 扬子鳄kiss1/kiss1R和GnRH1 cDNA全长及氨基酸序列分析第45-51页
        3.2 kiss1,kiss1R以及GnRH1的系统进化分析第51-53页
        3.3 扬子鳄kiss1R基因启动子序列分析第53-57页
    4 讨论第57-59页
第三章 kiss1和性类固醇激素受体在扬子鳄脑及 不同组织中的定位表达第59-70页
    1 引言第59页
    2 材料和方法第59-61页
        2.1 实验材料第59-60页
            2.1.1 主要试剂及仪器第59-60页
        2.2 实验方法第60-61页
            2.2.1 取材第60页
            2.2.2 免疫组织化学SABC法第60-61页
    3 结果第61-68页
        3.1 kiss1蛋白在成年扬子鳄各组织中的定位表达第61-64页
        3.2 类固醇激素受体蛋白在成年扬子鳄脑组织中的定位表达第64-68页
    4 讨论第68-70页
第四章 kiss1/kiss1R以及大脑垂体性腺轴相关基因的 表达规律第70-93页
    1 引言第70页
    2 材料和方法第70-72页
        2.1 实验材料第70页
            2.1.1 主要试剂及仪器第70页
        2.2 实验方法第70-72页
            2.2.1 取材第70-71页
            2.2.2 总RNA提取第71页
            2.2.3 cDNA第一链的合成第71页
            2.2.4 实时荧光定量PCR第71-72页
    3 结果第72-89页
        3.1 扬子鳄kiss1/kiss1R mRNA在各组织中的相对表达水平第72-74页
        3.2 扬子鳄大脑垂体性腺轴相关基因在各组织中的相对表达水平第74-80页
        3.3 扬子鳄生殖周期不同阶段kiss1/kiss1R mRNA在下丘脑、垂体和卵巢中的表达变化第80-83页
        3.4 扬子鳄生殖周期不同阶段大脑垂体性腺轴相关基因在下丘脑、垂体和卵巢中的表达变化第83-89页
    4 讨论第89-93页
第五章 扬子鳄kiss1R基因双荧光素酶载体构建 及其活性分析第93-106页
    1 引言第93页
    2 材料与方法第93-98页
        2.1 实验材料第93-94页
            2.1.1 细胞和载体第93页
            2.1.2 主要试剂及仪器第93-94页
        2.2 实验方法第94-98页
            2.2.1 合成扬子鳄kiss1R基因第94页
            2.2.2 扬子鳄kiss1R基因双荧光素酶表达载体的构建第94页
            2.2.3 扬子鳄Kiss1R基因的双荧光素酶活性检测第94-98页
    3 结果第98-103页
        3.1 扬子鳄kiss1R基因双荧光素酶表达载体的构建第98-101页
        3.2 扬子鳄Kiss1R的信号转导通路和配体选择性第101-103页
    4 讨论第103-106页
第六章 主要结论与展望第106-108页
    1 本研究主要结论第106页
    2 本研究主要创新点第106-107页
    3 研究展望第107-108页
参考文献第108-129页
致谢第129-130页
附:读博期间论文发表情况第130页

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