| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-25页 |
| 1.1 拟南芥简述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 拟南芥生物学特性 | 第10-11页 |
| 1.1.2 拟南芥的遗传学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.3 拟南芥研究历史 | 第12页 |
| 1.2 十字花科芥子酶防御体系研究进展 | 第12-18页 |
| 1.2.1 芥子酶防御体系简介 | 第12-13页 |
| 1.2.2 硫代葡糖苷及其代谢过程 | 第13-14页 |
| 1.2.3 芥子酶 | 第14-16页 |
| 1.2.4 植物以外其它生物的芥子酶 | 第16页 |
| 1.2.5 芥子酶/硫代葡糖苷系统功能 | 第16-18页 |
| 1.3 植物基因功能研究主要方法 | 第18-21页 |
| 1.3.1 超量表达(Over-expression) | 第19页 |
| 1.3.2 RNA干扰(RNAi) | 第19页 |
| 1.3.3 插入突变 | 第19-20页 |
| 1.3.4 基因的定点突变(site-directed mutagenesis,SDM) | 第20页 |
| 1.3.5 微列阵(microarry) | 第20页 |
| 1.3.6 酵母双杂交技术(Yeast two-hybridsystem) | 第20-21页 |
| 1.4 植物对胁迫的反应 | 第21-22页 |
| 1.4.1 涝害胁迫生理 | 第21页 |
| 1.4.2 缺硫胁迫生理 | 第21-22页 |
| 1.5 T-DNA插入突变体鉴定方法 | 第22-23页 |
| 1.5.1 三引物法 | 第22-23页 |
| 1.5.2 双引物法 | 第23页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第23-25页 |
| 1.7 研究技术路线 | 第25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第25-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验用培养基的配制 | 第26-27页 |
| 1) MS培养基配制1000ml | 第27页 |
| 2) 无硫培养基配制 | 第27页 |
| 3) 琼脂培养基 | 第27页 |
| 4) 无糖培养基 | 第27页 |
| 2.1.4 酶与生化试剂 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 拟南芥种植方法 | 第28-29页 |
| 2.2.1.1 拟南芥种子消毒方法 | 第28页 |
| 2.2.1.2 拟南芥种子播种方法 | 第28页 |
| 2.2.1.3 拟南芥栽培方法 | 第28页 |
| 2.2.1.4 拟南芥杂交方法 | 第28-29页 |
| 2.2.1.5 纯合双突变体筛选 | 第29页 |
| 2.2.2 突变体筛选与鉴定 | 第29-32页 |
| 2.2.2.1 CTAB法提取各个不同基因型拟南芥基因组DNA | 第29-30页 |
| 2.2.2.2 PCR鉴定单、双突变体 | 第30-32页 |
| 2.2.3 拟南芥根部芥子酶的酶学测定与鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.3.1 拟南芥根部芥子酶粗酶液的制备 | 第32页 |
| 2.2.3.2 酶活力测定方法 | 第32页 |
| 2.2.3.3 拟南芥根部芥子酶活性最适测定条件的确定 | 第32-33页 |
| 2.2.4 TGG4、TGG5对拟南芥生长过程中的作用 | 第33-35页 |
| 2.2.4.1 各个基因型拟南芥地上部分表型分析 | 第33-34页 |
| 2.2.4.2 TGG4、TGG5基因对拟南芥萌发过程中的作用 | 第34页 |
| 2.2.4.3 不同培养基中TGG4、TGG5对拟南芥根部生长影响 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-56页 |
| 3.1 拟南芥突变体筛选鉴定 | 第35-41页 |
| 3.1.1 单基因突变体亲本检测 | 第35-36页 |
| 3.1.2 F1代植株鉴定 | 第36-37页 |
| 3.1.3 F2代植株筛选鉴定 | 第37-39页 |
| 3.1.4 F3代纯合体植株鉴定验证 | 第39-41页 |
| 3.2 拟南芥根部芥子酶的酶学特性 | 第41-47页 |
| 3.2.1 拟南芥根部芥子酶的酶学特性 | 第41-45页 |
| 3.2.2 不同基因型拟南芥根部酶活性测定 | 第45-47页 |
| 3.3 TGG4、TGG5对拟南芥早期生长过程中的作用 | 第47-56页 |
| 3.3.1 各个基因型拟南芥地上部分表型分析 | 第47-48页 |
| 3.3.2 TGG4、TGG5基因对拟南芥萌发过程中的作用 | 第48-51页 |
| 3.3.3 不同培养条件对TGG4、TGG5对拟南芥根部生长影响 | 第51-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 拟南芥栽培杂交以及双突变体筛选鉴定 | 第56页 |
| 4.2 TGG4、TGG5与植株地上部分生长关系 | 第56页 |
| 4.3 TGG4、TGG5与拟南芥萌发关系 | 第56-57页 |
| 4.4 TGG4、TGG5与拟南芥根部生长关系 | 第57-59页 |
| 4.5 下一步研究设想 | 第59页 |
| 5 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
