| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-21页 |
| 1.1 植物的耐旱研究 | 第14-15页 |
| 1.1.1 干旱对植物的伤害 | 第14页 |
| 1.1.2 植物对干旱胁迫的应答 | 第14-15页 |
| 1.2 棉花耐旱性研究 | 第15页 |
| 1.3 油菜素内酯 | 第15-18页 |
| 1.3.1 油菜素内酯的合成途径 | 第15-16页 |
| 1.3.2 油菜素内酯的信号通路 | 第16-17页 |
| 1.3.3 油菜素内酯的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.4 RING-finger蛋白的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 RING-finger蛋白的结构 | 第18-19页 |
| 1.4.2 RING-finger蛋白的的生物学功能 | 第19页 |
| 1.4.3 RING-finger蛋白在植物抗逆研究中的作用 | 第19-20页 |
| 1.5 本课题研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 陆地棉GhBRH1-L基因的克隆及序列分析 | 第21-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 酶及其他试剂耗材、试剂盒 | 第21页 |
| 2.1.4 引物 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.2.2 总RNA的提取及反转录 | 第21-23页 |
| 2.2.3 目的基因的克隆 | 第23-25页 |
| 2.2.4 目的基因的序列分析 | 第25页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.1 RNA提取结果 | 第25-26页 |
| 2.3.2 GhBRH1-L基因的克隆 | 第26页 |
| 2.3.3 GhBRH1-L基因的结构分析 | 第26-27页 |
| 2.3.4 GhBRH1-L基因的进化树分析 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.4.1 棉花叶片RNA的提取 | 第28页 |
| 2.4.2 GhBRH1-L蛋白的结构分析 | 第28-29页 |
| 第三章 GhBRH1-L基因的植物过表达载体构建及植物的转化 | 第29-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.1.1 载体及菌株 | 第29页 |
| 3.1.2 酶、其他试剂及耗材 | 第29页 |
| 3.1.3 引物 | 第29页 |
| 3.1.4 植物材料 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-35页 |
| 3.2.1 植物表达载体的构建 | 第29-32页 |
| 3.2.2 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第32-33页 |
| 3.2.3 蘸花法转化拟南芥 | 第33-34页 |
| 3.2.4 转基因拟南芥植株的筛选和鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第35-36页 |
| 3.3.1 植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.3.2 转基因拟南芥的获得 | 第36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 GhBRH1-L基因在拟南芥中的功能验证 | 第37-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第37页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 4.1.2 酶、生化试剂及仪器耗材 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 4.2.1 转基因拟南芥的敏旱表型的确定 | 第37页 |
| 4.2.2 转基因拟南芥离体叶片的失水率的测定 | 第37页 |
| 4.2.3 转基因拟南芥的根长观察 | 第37-38页 |
| 4.2.4 转基因拟南芥的光形态建成 | 第38页 |
| 4.3 实验结果 | 第38-40页 |
| 4.3.1 转基因拟南芥在干旱胁迫条件下的耐旱性鉴定 | 第38页 |
| 4.3.2 拟南芥离体叶片失水率测定 | 第38-39页 |
| 4.3.3 转基因拟南芥的根长观察 | 第39-40页 |
| 4.3.4 转基因拟南芥的光形态建成 | 第40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第五章 GhBRH1-L基因在棉花中的功能验证 | 第42-49页 |
| 5.1 实验材料 | 第42页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 5.1.2 酶、生化试剂及仪器耗材 | 第42页 |
| 5.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 5.2.1 VIGS干涉载体的构建及注射 | 第42-43页 |
| 5.2.2 VIGS后棉花叶片的失水率的测定 | 第43-44页 |
| 5.2.3 PEG胁迫处理棉花 | 第44页 |
| 5.2.4 BR处理棉花 | 第44页 |
| 5.3 实验结果 | 第44-47页 |
| 5.3.1 植物VIGS载体的构建及沉默效率 | 第44-45页 |
| 5.3.2 VIGS后的棉花干旱胁迫条件下的耐旱性鉴定 | 第45-46页 |
| 5.3.3 VIGS后的棉花离体叶片失水率测定： | 第46页 |
| 5.3.4 PEG胁迫处理棉花 | 第46-47页 |
| 5.3.5 BR处理棉花 | 第47页 |
| 5.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第六章 GhBRH1-L细胞生物学功能分析 | 第49-59页 |
| 6.1 材料与方法 | 第49页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 6.1.2 生化试剂及仪器耗材 | 第49页 |
| 6.2 实验方法 | 第49-54页 |
| 6.2.1 35s::GFP-GhBRH1-L的载体构建 | 第49页 |
| 6.2.2 GhBRH1-L的亚细胞定位 | 第49-50页 |
| 6.2.3 GhBRH1-L与GhBES1的酵母单杂交实验 | 第50-54页 |
| 6.3 实验结果 | 第54-57页 |
| 6.3.1 35s::GFP-GhBRH1-L的载体构建 | 第54-55页 |
| 6.3.2 GhBRH1-L的亚细胞定位 | 第55页 |
| 6.3.3 GhBRH1-L与GhBES1的酵母单杂交 | 第55-57页 |
| 6.4 讨论 | 第57-59页 |
| 第七章 结论及研究展望 | 第59-61页 |
| 7.1 全文结论 | 第59页 |
| 7.2 展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
