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孕酮受体基因(PGR)介导小鼠排卵的关键信号分子研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
英文缩略词对照表第11-13页
1 绪论第13-22页
    1.1 排卵过程第13-14页
        1.1.1 排卵的激素控制第13页
        1.1.2 排卵的人工控制第13页
        1.1.3 控制排卵的关键基因第13-14页
    1.2 PGR 对于排卵的关键作用第14-17页
        1.2.1 PGR 的结构和功能第14-16页
        1.2.2 PGR 对于排卵是必须的第16页
        1.2.3 PGR 介导排卵的下游基因第16-17页
    1.3 PGR 对卵巢中 ADAMTS-1 的作用第17-19页
        1.3.1 ADAMTS-1 在排卵过程中的表达第17-18页
        1.3.2 ADAMTS-1 在排卵过程中的功能第18-19页
    1.4 PGR 对卵巢中 Cathepsin L 的作用第19页
        1.4.1 Cathepsin L 在排卵过程中的表达第19页
        1.4.2 Cathepsin L 在排卵过程中的功能第19页
    1.5 PGR 对卵巢中 HIF 的作用第19-21页
        1.5.1 HIF 在卵巢中的表达第20页
        1.5.2 HIF 在排卵过程中的功能第20-21页
    1.6 研究目的与意义第21-22页
2 PGR 对 ADAMTS-1 表达的诱导第22-38页
    2.1 实验材料第22-25页
        2.1.1 实验动物与饲养管理第22页
        2.1.2 主要实验试剂与耗材第22-23页
        2.1.3 主要实验仪器第23页
        2.1.4 实验用部分溶液及其配制方法第23页
        2.1.5 分析工具软件与网站第23-24页
        2.1.6 小鼠中 PGR 和 HIF 基因引物设计第24-25页
    2.2 方法第25-30页
        2.2.1 外源促性腺激素(PMSG/hCG)处理性未成熟雌性昆明小鼠第25页
        2.2.2 阴道脱落细胞涂片的制作与细胞类型观察第25-26页
        2.2.3 体式显微镜下小鼠卵巢形态观察及超排卵检测第26-27页
        2.2.4 孕酮受体拮抗剂(RU486)灌胃处理外源促性腺激素处理的小鼠第27页
        2.2.5 实时荧光定量 PCR 检测小鼠卵巢中基因 mRNA 的表达量第27-30页
        2.2.6 结果分析第30页
    2.3 结果第30-36页
        2.3.1 外源促性腺激素(PMSG/hCG)诱导性未成熟小鼠发情第30-31页
        2.3.2 小鼠超排卵检测时间的确定第31-32页
        2.3.3 孕酮受体拮抗剂(RU486)对小鼠超排卵的抑制第32-33页
        2.3.4 ADAMTS-1 和 Cathepsin L 在小鼠围排卵期卵巢中的表达变化第33-35页
        2.3.5 孕酮受体拮抗剂(RU486)对 ADAMTS-1 和 Cathepsin L mRNA 表达的影响第35-36页
    2.4 讨论第36-38页
3 PGR 对 ADAMTS-1 表达的调控第38-49页
    3.1 实验材料第38-39页
        3.1.1 细胞培养主要试剂和耗材第38页
        3.1.2 Western blot 主要试剂和耗材第38-39页
        3.1.3 实时荧光定量 PCR 主要试剂和耗材第39页
        3.1.4 药物稀释第39页
        3.1.5 主要实验仪器第39页
    3.2 实验方法第39-43页
        3.2.1 MCF-7 细胞培养和药物处理第39-40页
        3.2.2 实时荧光定量 PCR 检测 MCF-7 细胞中 mRNA 的表达第40页
        3.2.3 Western blot 检测 MCF-7 细胞中蛋白质表达第40-43页
    3.3 结果第43-47页
        3.3.1 醋酸甲羟孕酮(MPA)对 ADAMTS-1 和 HIF 基因表达的作用第43页
        3.3.2 MPA 和 RU486 联合处理对 ADAMTS-1 和 HIF 基因表达的作用第43-44页
        3.3.3 氯化钴对 ADAMTS-1 蛋白质表达的作用第44-45页
        3.3.4 氯化钴对 ADAMTS-1 表达的作用第45-46页
        3.3.5 MPA 和氯化钴联合处理对 ADAMTS-1 和 HIF 基因 mRNA 表达的作用第46-47页
        3.3.6 棘霉素对 ADAMTS-1 蛋白质表达的作用第47页
    3.4 讨论第47-49页
4 总结与展望第49-51页
    4.1 总结第49-50页
    4.2 后续研究展望第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-56页
附录第56页
    作者在攻读学位期间发表的论文目录第56页

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