摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1. 前言 | 第12-16页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 降解木质纤维素的酶类 | 第12-13页 |
1.3 白蚁及其肠道共生微生物 | 第13-15页 |
1.3.1 白蚁的分类 | 第13页 |
1.3.2 白蚁肠道内的共生细菌 | 第13-14页 |
1.3.3 白蚁肠道内的鞭毛虫 | 第14-15页 |
1.4 研究目的和意义 | 第15-16页 |
2. 实验材料 | 第16-19页 |
2.1 黑胸散白蚁的采集与饲养 | 第16页 |
2.2 培养基 | 第16页 |
2.3 常用的溶液及试剂 | 第16-17页 |
2.4 其他常用的试剂 | 第17-18页 |
2.5 实验仪器设备 | 第18-19页 |
3. 实验方法 | 第19-24页 |
3.1 黑胸散白蚁肠道解剖 | 第19页 |
3.2 黑胸散白蚁肠道共生细菌的分离 | 第19页 |
3.3 肠道共生细菌DNA的提取 | 第19-20页 |
3.4 质粒的提取方法 | 第20-21页 |
3.5 β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达 | 第21页 |
3.5.1 β-葡萄糖苷酶全长基因的PCR扩增 | 第21页 |
3.5.2 重组质粒GL36862-30a构建 | 第21页 |
3.5.3 重组质粒在大肠杆菌中的同源表达 | 第21页 |
3.6 宏基因组测序序列的分析和注释 | 第21-22页 |
3.7 β-葡萄糖苷酶(RcBG3)酶学特性研究 | 第22-24页 |
3.7.1 葡萄糖标准曲线及回归方程 | 第22页 |
3.7.2 样品蛋白质浓度的测定 | 第22-23页 |
3.7.3 β-葡萄糖苷酶活性检测 | 第23-24页 |
4. 实验结果 | 第24-41页 |
4.1 黑胸散白蚁肠道共生细菌的宏基因组测序及分析 | 第24-34页 |
4.1.1 肠道共生细菌DNA的制备 | 第24页 |
4.1.2 宏基因组测序结果 | 第24页 |
4.1.3 宏基因组数据的功能注释 | 第24-25页 |
4.1.4 宏基因组数据的物种注释 | 第25-27页 |
4.1.5 共生细菌中糖基水解酶及相关蛋白基因多样性分析 | 第27-32页 |
4.1.5.1 共生细菌中的糖基水解酶基因多样性分析 | 第27-28页 |
4.1.5.2 共生细菌中糖基水解酶相关蛋白基因序列的分析 | 第28-32页 |
4.1.6 共生细菌中的固氮酶基因 | 第32-33页 |
4.1.7 β-葡萄糖苷酶基因序列分析 | 第33-34页 |
4.2 一种β-葡萄糖苷酶基因的克隆表达及酶特性研究 | 第34-41页 |
4.2.1 β-葡萄糖苷酶基因的克隆、表达 | 第34-37页 |
4.2.1.1 GL36862-30a重组质粒的构建 | 第34-35页 |
4.2.1.2 β-葡萄糖苷酶基因的表达 | 第35页 |
4.2.1.3 目的蛋白(RcBG3)纯化 | 第35-37页 |
4.2.2 β-葡萄糖苷酶RcBG3的特性研究 | 第37-41页 |
4.2.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第37页 |
4.2.2.2 蛋白质浓度标准曲线的绘制 | 第37-38页 |
4.2.2.3 β-葡萄糖苷酶(RcBG3)的酶活测定 | 第38-41页 |
5. 讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
致谢 | 第47页 |