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黑胸散白蚁肠道微生物的宏基因组学研究以及一种β-葡萄糖苷酶的特性研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1. 前言第12-16页
    1.1 引言第12页
    1.2 降解木质纤维素的酶类第12-13页
    1.3 白蚁及其肠道共生微生物第13-15页
        1.3.1 白蚁的分类第13页
        1.3.2 白蚁肠道内的共生细菌第13-14页
        1.3.3 白蚁肠道内的鞭毛虫第14-15页
    1.4 研究目的和意义第15-16页
2. 实验材料第16-19页
    2.1 黑胸散白蚁的采集与饲养第16页
    2.2 培养基第16页
    2.3 常用的溶液及试剂第16-17页
    2.4 其他常用的试剂第17-18页
    2.5 实验仪器设备第18-19页
3. 实验方法第19-24页
    3.1 黑胸散白蚁肠道解剖第19页
    3.2 黑胸散白蚁肠道共生细菌的分离第19页
    3.3 肠道共生细菌DNA的提取第19-20页
    3.4 质粒的提取方法第20-21页
    3.5 β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达第21页
        3.5.1 β-葡萄糖苷酶全长基因的PCR扩增第21页
        3.5.2 重组质粒GL36862-30a构建第21页
        3.5.3 重组质粒在大肠杆菌中的同源表达第21页
    3.6 宏基因组测序序列的分析和注释第21-22页
    3.7 β-葡萄糖苷酶(RcBG3)酶学特性研究第22-24页
        3.7.1 葡萄糖标准曲线及回归方程第22页
        3.7.2 样品蛋白质浓度的测定第22-23页
        3.7.3 β-葡萄糖苷酶活性检测第23-24页
4. 实验结果第24-41页
    4.1 黑胸散白蚁肠道共生细菌的宏基因组测序及分析第24-34页
        4.1.1 肠道共生细菌DNA的制备第24页
        4.1.2 宏基因组测序结果第24页
        4.1.3 宏基因组数据的功能注释第24-25页
        4.1.4 宏基因组数据的物种注释第25-27页
        4.1.5 共生细菌中糖基水解酶及相关蛋白基因多样性分析第27-32页
            4.1.5.1 共生细菌中的糖基水解酶基因多样性分析第27-28页
            4.1.5.2 共生细菌中糖基水解酶相关蛋白基因序列的分析第28-32页
        4.1.6 共生细菌中的固氮酶基因第32-33页
        4.1.7 β-葡萄糖苷酶基因序列分析第33-34页
    4.2 一种β-葡萄糖苷酶基因的克隆表达及酶特性研究第34-41页
        4.2.1 β-葡萄糖苷酶基因的克隆、表达第34-37页
            4.2.1.1 GL36862-30a重组质粒的构建第34-35页
            4.2.1.2 β-葡萄糖苷酶基因的表达第35页
            4.2.1.3 目的蛋白(RcBG3)纯化第35-37页
        4.2.2 β-葡萄糖苷酶RcBG3的特性研究第37-41页
            4.2.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制第37页
            4.2.2.2 蛋白质浓度标准曲线的绘制第37-38页
            4.2.2.3 β-葡萄糖苷酶(RcBG3)的酶活测定第38-41页
5. 讨论第41-43页
参考文献第43-47页
致谢第47页

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