| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| ABBREVIATIONS 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-31页 |
| 1.1 植物对低温胁迫的响应 | 第12-21页 |
| 1.1.1 低温胁迫引起植物的生理变化 | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物对低温信号的感知和传递 | 第13-15页 |
| 1.1.3 CBF低温信号途径及调控 | 第15-18页 |
| 1.1.4 不依赖CBF的低温响应调控 | 第18页 |
| 1.1.5 植物激素对低温的响应 | 第18-21页 |
| 1.2 乙烯的研究进展 | 第21-29页 |
| 1.2.1 乙烯的合成及调控机制 | 第21-23页 |
| 1.2.2 乙烯的信号转导途径 | 第23-26页 |
| 1.2.3 乙烯在非生物逆境中的作用 | 第26-29页 |
| 1.3 乙烯与低温胁迫的关系 | 第29-30页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第31-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 2.1.2 菌株材料 | 第31页 |
| 2.1.3 质粒和载体 | 第31-32页 |
| 2.2 酶、试剂盒及化学药品 | 第32-33页 |
| 2.3 常用培养基及试剂的配制 | 第33-36页 |
| 2.3.1 常用培养基的配制 | 第33-34页 |
| 2.3.2 常用抗生素配制及存放 | 第34页 |
| 2.3.3 Western blot相关缓冲液 | 第34页 |
| 2.3.4 原核表达蛋白纯化相关缓冲液 | 第34页 |
| 2.3.5 ChIP实验相关缓冲液 | 第34-35页 |
| 2.3.6 Z-buffer/X-gal显色液 | 第35页 |
| 2.3.7 其他常用溶液配制 | 第35-36页 |
| 2.4 实验仪器 | 第36页 |
| 2.5 实验方法 | 第36-44页 |
| 2.5.1 拟南芥种子灭菌及生长条件 | 第36-37页 |
| 2.5.2 冻胁迫处理模拟实验 | 第37页 |
| 2.5.3 基因组DNA的提取 | 第37页 |
| 2.5.4 总RNA的提取及反转录 | 第37-38页 |
| 2.5.5 PCR扩增 | 第38-39页 |
| 2.5.6 蛋白免疫印迹法 | 第39页 |
| 2.5.7 植物生理指标测定方法 | 第39-41页 |
| 2.5.8 激光共聚焦显微镜观察 | 第41页 |
| 2.5.9 原核蛋白表达纯化 | 第41页 |
| 2.5.10 气相色谱测乙烯含量 | 第41页 |
| 2.5.11 染色质免疫共沉淀实验 | 第41-42页 |
| 2.5.12 EMSA实验 | 第42-43页 |
| 2.5.13 酵母双杂交实验 | 第43-44页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第44-68页 |
| 3.1 乙烯合成影响拟南芥对低温的响应 | 第44-48页 |
| 3.1.1 外源ACC、AVG影响拟南芥的抗冻能力 | 第44-45页 |
| 3.1.2 内源乙烯对拟南芥低温响应的影响 | 第45-46页 |
| 3.1.3 低温条件下乙烯合成量改变 | 第46-47页 |
| 3.1.4 低温影响乙烯合成基因ACS的表达 | 第47-48页 |
| 3.2 乙烯信号影响拟南芥对低温的响应 | 第48-56页 |
| 3.2.1 外源Ag~+影响拟南芥的抗冻能力 | 第48-49页 |
| 3.2.2 乙烯受体的功能获得突变体具有抗冻表型 | 第49-50页 |
| 3.2.3 乙烯信号正调控因子缺失突变体具有抗冻表型 | 第50-51页 |
| 3.2.4 过表达EIN3降低拟南芥的抗冻能力 | 第51-53页 |
| 3.2.5 乙烯信号持续激活突变体具有冻敏感表型 | 第53-54页 |
| 3.2.6 冷驯化后乙烯信号相关突变体的冻表型 | 第54-56页 |
| 3.3 乙烯信号调控低温响应的机制探究 | 第56-68页 |
| 3.3.1 乙烯信号各组分在低温下的表达变化 | 第56-57页 |
| 3.3.2 EIN3在低温下的蛋白变化 | 第57-61页 |
| 3.3.3 乙烯突变体基因芯片分析 | 第61页 |
| 3.3.4 EIN3抑制CBFs及下游低温响应基因的表达 | 第61-64页 |
| 3.3.5 EIN3在体内与CBFs的启动子特异结合 | 第64-65页 |
| 3.3.6 EIN3在体外特异结合CBFs的启动子 | 第65-66页 |
| 3.3.7 乙烯信号突变体脯氨酸及可溶性糖的变化 | 第66-68页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第68-73页 |
| 4.1 乙烯调控拟南芥低温响应过程的作用模式 | 第68-69页 |
| 4.2 低温胁迫影响植物的乙烯合成 | 第69-70页 |
| 4.3 低温对ACS的表达影响 | 第70页 |
| 4.4 乙烯调控植物对低温胁迫的耐受能力 | 第70-71页 |
| 4.5 EIN3蛋白被低温诱导积累 | 第71-72页 |
| 4.6 EIN3作为转录抑制子在低温下发挥作用 | 第72页 |
| 4.7 展望 | 第72-73页 |
| 第五章 结论 | 第73-74页 |
| 第六章 COS8基因调控拟南芥响应低温的机制初探 | 第74-88页 |
| 6.1 引言 | 第74页 |
| 6.2 实验结果与分析 | 第74-86页 |
| 6.2.1 cos8-1冻敏感突变体的筛选和图位克隆 | 第74-76页 |
| 6.2.2 cos8-1突变体的表型由COS8基因突变引起 | 第76-77页 |
| 6.2.3 cos8突变体的冻敏感表型分析 | 第77-79页 |
| 6.2.4 cos8突变体花青素的合成增多 | 第79-81页 |
| 6.2.5 cos8-1突变体中CBF基因表达量降低 | 第81-83页 |
| 6.2.6 COS8与ICE1在酵母中发生相互作用 | 第83-84页 |
| 6.2.7 cos8-1突变体中脯氨酸含量降低 | 第84页 |
| 6.2.8 多种逆境影响cos8-1突变体的萌发 | 第84-86页 |
| 6.3 讨论与结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-108页 |
| 附录 | 第108-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 个人简介 | 第113页 |
