摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
常用词语缩写 | 第9-13页 |
1 文献综述 | 第13-18页 |
1.1 肌纤维的类型 | 第13-14页 |
1.2 肌纤维的特点 | 第14页 |
1.3 Ⅰ型肌纤维对肌肉品质的影响 | 第14-16页 |
1.3.1 肉色 | 第14-15页 |
1.3.2 pH值 | 第15页 |
1.3.3 嫩度 | 第15页 |
1.3.4 风味 | 第15页 |
1.3.5 系水力 | 第15-16页 |
1.4 钙调磷酸酶在肌纤维分化上的作用 | 第16页 |
1.5 钙调磷酸酶肌小节结合蛋白家族的研究现状 | 第16-17页 |
1.6 本研究目的及意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 试验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 试验动物及样品采集 | 第18-19页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第19-20页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-29页 |
2.2.1 组织样总RNA的抽取 | 第21-22页 |
2.2.2 总RNA的质量与浓度检测 | 第22页 |
2.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第22页 |
2.2.4 特异性引物设计 | 第22-23页 |
2.2.5 MYOZ2和MYOZ3基因的cDNA的克隆测序 | 第23-25页 |
2.2.5.1 常规PCR | 第23页 |
2.2.5.2 PCR产物的纯化回收 | 第23-24页 |
2.2.5.3 目的基因与pMD19-T载体的连接 | 第24页 |
2.2.5.4 连接产物的转化 | 第24页 |
2.2.5.5 阳性克隆筛选及测序 | 第24-25页 |
2.2.6 荧光定量PCR | 第25-26页 |
2.2.6.1 标准品的制备 | 第25页 |
2.2.6.2 定量PCR | 第25-26页 |
2.2.7 蛋白免疫印迹 | 第26-29页 |
2.2.7.1 组织总蛋白的提取 | 第26页 |
2.2.7.2 组织样蛋白含量测定 | 第26-27页 |
2.2.7.3 SDS-聚丙酰胺凝胶电泳 | 第27-28页 |
2.2.7.4 切胶与转膜 | 第28页 |
2.2.7.5 免疫反应 | 第28-29页 |
2.2.7.6 化学发光与成像 | 第29页 |
2.3 数据分析 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-49页 |
3.1 天府肉羊MYOZ2和MYOZ3基因的克隆 | 第30-31页 |
3.1.1 组织样的总RNA提取 | 第30页 |
3.1.2 PCR结果 | 第30-31页 |
3.1.3 克隆产物测序结果 | 第31页 |
3.2 天府肉羊MYOZ2和MYOZ3基因生物信息学分析 | 第31-41页 |
3.2.1 天府肉羊MYOZ2基因的生物信息学分析 | 第31-36页 |
3.2.1.1 天府肉羊MYOZ2基因的序列比对 | 第31-34页 |
3.2.1.2 MYOZ2基因CDS序列的碱基组成 | 第34页 |
3.2.1.3 MYOZ2蛋白性质分析 | 第34-35页 |
3.2.1.4 MYOZ2蛋白结构预测 | 第35-36页 |
3.2.1.5 MYOZ2的系统发育分析 | 第36页 |
3.2.2 天府肉羊MYOZ3基因的生物信息学分析 | 第36-41页 |
3.2.2.1 天府肉羊MYOZ3基因的序列比对 | 第36-39页 |
3.2.2.2 MYOZ3基因CDS序列的碱基组成 | 第39页 |
3.2.2.3 MYOZ3蛋白性质分析 | 第39-40页 |
3.2.2.4 MYOZ3蛋白结构预测 | 第40页 |
3.2.2.5 MYOZ3的系统发育分析 | 第40-41页 |
3.3 mRNA的表达 | 第41-46页 |
3.3.1 标准曲线的绘制 | 第41-42页 |
3.3.2 天府肉羊MYOZ2和MYOZ3基因的mRNA表达 | 第42-46页 |
3.3.2.1 天府肉羊MYOZ2基因的mRNA表达 | 第42-44页 |
3.3.2.2 天府肉羊MYOZ3基因的mRNA表达 | 第44-46页 |
3.4 蛋白质的表达 | 第46-49页 |
3.4.1 天府肉羊MYOZ2蛋白的表达 | 第46-47页 |
3.4.2 天府肉羊MYOZ3的蛋白表达 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
4.1 MYOZ2基因和MYOZ3基因的生物信息学分析 | 第49-51页 |
4.1.1 MYOZ2基因和MYOZ3基因的序列分析 | 第49-50页 |
4.1.2 MYOZ2蛋白和MYOZ3蛋白的理化性质分析 | 第50页 |
4.1.3 MYOZ2蛋白和MYOZ3蛋白结构的预测分析 | 第50-51页 |
4.2 mRNA的表达分析 | 第51-52页 |
4.2.1 不同组织表达分析 | 第51页 |
4.2.2 不同生长阶段表达分析 | 第51-52页 |
4.3 蛋白质的表达分析 | 第52-53页 |
4.3.1 不同组织表达分析 | 第52-53页 |
4.3.2 不同生长阶段表达分析 | 第53页 |
5 结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第61页 |