| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-28页 |
| ·概况 | 第13页 |
| ·病原学 | 第13-19页 |
| ·病毒学分类与结构特性 | 第13-14页 |
| ·理化特性 | 第14-15页 |
| ·基因组结构 | 第15-17页 |
| ·基因编码蛋白及功能研究 | 第17-19页 |
| ·临床症状与病理变化 | 第19-20页 |
| ·临床症状 | 第19-20页 |
| ·病理变化 | 第20页 |
| ·流行病学特性 | 第20-21页 |
| ·诊断方法 | 第21-22页 |
| ·电镜观察法 | 第21页 |
| ·血凝和血凝抑制试验 | 第21-22页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第22页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应 | 第22页 |
| ·防控 | 第22-23页 |
| ·蛋白与蛋白相互作用研究的相关技术 | 第23-25页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第23-24页 |
| ·免疫共沉淀技术 | 第24页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第24-25页 |
| ·串联亲和纯化技术 | 第25页 |
| ·膜突蛋白的研究进展 | 第25-26页 |
| ·兔出血症病毒相互作用蛋白的研究进展 | 第26-27页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| 第二章 兔肝脏CDNA 文库中VP60 相互作用蛋白的筛选 | 第28-40页 |
| ·材料和方法 | 第28-32页 |
| ·菌株与细胞 | 第28页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·兔肝脏总RNA 的提取 | 第29页 |
| ·兔肝脏cDNA 真核表达文库的构建 | 第29-31页 |
| ·兔肝脏cDNA 真核表达文库的质量鉴定 | 第31-32页 |
| ·转染用cDNA 文库重组质粒的制备 | 第32页 |
| ·SP2/0 细胞的嘌呤霉素MLD 的测定 | 第32页 |
| ·兔肝脏cDNA 文库重组质粒转染细胞试验 | 第32页 |
| ·细胞筛选试验 | 第32页 |
| ·重组质粒特异表达序列的鉴定 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-36页 |
| ·兔肝脏总RNA 的含量及纯度 | 第32-33页 |
| ·ds cDNA 的鉴定 | 第33页 |
| ·文库质量的鉴定 | 第33-34页 |
| ·SP2/0 细胞的嘌呤霉素最小致死浓度的测定 | 第34页 |
| ·筛选的阳性SP2/0 细胞中重组表达质粒的PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组表达质粒的序列分析 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-40页 |
| ·兔肝脏cDNA 真核表达文库的构建 | 第36-37页 |
| ·兔肝脏cDNA 真核表达文库的筛选 | 第37-40页 |
| 第三章 VP60 与膜突蛋白相互作用的验证 | 第40-58页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·病毒、菌株、质粒、抗体、细胞 | 第40页 |
| ·试剂与药品 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·Moesin 部分片段基因的克隆与表达 | 第40-42页 |
| ·RHDV 的纯化 | 第42页 |
| ·VP60 与Moesin 相互作用的免疫共沉淀验证 | 第42-43页 |
| ·VP60 与Moesin 相互作用的血凝抑制试验验证 | 第43页 |
| ·VP60 与Moesin 相互作用的细胞内共定位验证 | 第43-44页 |
| ·Moesin 介导RHDV 进入细胞的初步探索 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-54页 |
| ·Moesin 部分片段基因的克隆 | 第45-46页 |
| ·Moesin 部分片段基因的表达与纯化 | 第46-47页 |
| ·RHDV 的纯化 | 第47-48页 |
| ·VP60 与Moesin 相互作用的免疫共沉淀验证结果 | 第48页 |
| ·VP60 与Moesin 相互作用的血凝抑制试验验证结果 | 第48-49页 |
| ·Moesin 真核表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·VP60 真核表达载体的构建 | 第50页 |
| ·VP60 在 HEK293T 细胞内表达的 IFA 分析结果 | 第50-51页 |
| ·VP60 在 HEK293T 细胞内表达 Western blot 分析结果 | 第51-52页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察 VP60 与 Moesin 的细胞内共定位结果 | 第52页 |
| ·Moesin 介导 RHDV 进入细胞的初步探索结果 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| ·Moesin 部分片段基因的克隆与表达 | 第54-55页 |
| ·VP60 与 Moesin 相互作用的验证 | 第55-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录 Ⅰ | 第67-68页 |
| 附录 Ⅱ | 第68-69页 |
| 附录 Ⅲ | 第69-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |
