| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 材料与方法 | 第11-24页 |
| 1 实验材料 | 第11-13页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第11页 |
| 1.2 实验仪器设备及产地 | 第11-12页 |
| 1.3 主要试剂耗材及产地 | 第12-13页 |
| 2 实验方法及步骤 | 第13页 |
| 2.1 实验分组 | 第13页 |
| 2.2 TGF-β1 溶解分装 | 第13页 |
| 3 细胞培养 | 第13-16页 |
| 3.1 配置细胞培养液 | 第13-14页 |
| 3.2 细胞复苏 | 第14页 |
| 3.3 细胞传代 | 第14-15页 |
| 3.4 细胞冻存 | 第15页 |
| 3.5 细胞污染的处理 | 第15-16页 |
| 4 CCK-8 检测卵巢癌细胞增殖能力 | 第16-17页 |
| 5 细胞转染 | 第17页 |
| 6 Real-time qRT-PCR检测miR-99 家族表达水平变化 | 第17-19页 |
| 6.1 细胞总RNA提取 | 第17-18页 |
| 6.2 miRNA逆转录 | 第18-19页 |
| 6.3 Real-time qRT-PCR反应 | 第19页 |
| 7 Western-blot检测E-cadherin及Vimentin | 第19-22页 |
| 7.1 细胞总蛋白提取 | 第19-20页 |
| 7.2 蛋白SDS-PAGE凝胶电泳 | 第20-21页 |
| 7.3 转膜（槽式湿转） | 第21页 |
| 7.4 封闭PVDF膜 | 第21页 |
| 7.5 孵育一抗、二抗及洗膜 | 第21页 |
| 7.6 压片显影 | 第21-22页 |
| 8 数据处理 | 第22页 |
| 9 ibidi细胞划痕实验 | 第22页 |
| 10 Transwell细胞迁移实验 | 第22-23页 |
| 11 Transwell细胞侵袭实验 | 第23页 |
| 12 统计学分析 | 第23-24页 |
| 结果 | 第24-30页 |
| 1 TGF-β1 对卵巢癌细胞系增殖能力的影响 | 第24页 |
| 2 TGF-β1 对卵巢癌细胞系miR-99 家族表达水平的影响 | 第24-25页 |
| 3 TGF-β1 对卵巢癌细胞系E-cadherin及Vimentin表达水平的影响 | 第25-26页 |
| 4 miRNA模拟物和抑制物对miR-99 家族表达水平的影响 | 第26页 |
| 5 TGF-β1 促卵巢癌细胞增殖效应中miR-99 家族的作用 | 第26-27页 |
| 6 TGF-β1 及miR-99 家族对卵巢癌细胞迁移能力的影响 | 第27-29页 |
| 7 TGF-β1 及miR-99 家族对卵巢癌细胞侵袭能力的影响 | 第29-30页 |
| 讨论 | 第30-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 综述 | 第36-48页 |
| 综述参考文献 | 第43-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 缩略词表 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
