| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 CSN复合体 | 第9-10页 |
| 1.1.1 CSN复合体及生物学功能 | 第9-10页 |
| 1.1.2 CsnE及生物学功能 | 第10页 |
| 1.2 CsnE在真菌中的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2.1 CsnE影响真菌生长发育的研究 | 第10-11页 |
| 1.2.2 CsnE影响真菌的次级代谢产物研究 | 第11页 |
| 1.3 植物内生真菌无花果拟盘多毛孢次级代谢产物的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3.1 植物内生真菌简介 | 第11-12页 |
| 1.3.2 无花果拟盘多毛孢次级代谢产物研究进展 | 第12页 |
| 1.4 激活真菌沉默基因簇的策略及研究进展 | 第12-15页 |
| 1.4.1 改变菌株的生长条件 | 第13-14页 |
| 1.4.2 分子遗传操作激活沉默基因簇 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的内容 | 第15页 |
| 1.6 本研科学意义和应用前景 | 第15-17页 |
| 第二章 PfCsnE调控无花果拟盘多毛孢生长发育的研究 | 第17-30页 |
| 2.1 试验材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第17页 |
| 2.1.2 菌株培养及保存 | 第17-18页 |
| 2.1.2.1 接种及培养 | 第17-18页 |
| 2.1.2.2 孢子悬液制备 | 第18页 |
| 2.1.3 无花果拟盘多毛孢基因组DNA的提取 | 第18-20页 |
| 2.1.4 大肠杆菌感受态细胞制备转化及质粒提取 | 第20-21页 |
| 2.1.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| 2.1.4.2 大肠杆菌的转化 | 第20页 |
| 2.3.4.3 大肠杆菌质粒提取 | 第20-21页 |
| 2.1.5 酵母感受态细胞制备转化及质粒提取 | 第21-22页 |
| 2.1.5.1 酵母感受态制备 | 第21页 |
| 2.1.5.2 酵母转化 | 第21-22页 |
| 2.1.5.3 酵母质粒提取 | 第22页 |
| 2.1.6 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第22-23页 |
| 2.1.6.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第22页 |
| 2.1.6.2 农杆菌的转化 | 第22-23页 |
| 2.1.7 载体构建 | 第23-24页 |
| 2.1.7.1 敲除载体的构建 | 第23页 |
| 2.1.7.2 回补载体的构建 | 第23-24页 |
| 2.1.8 农杆菌介导的真菌转化-敲除菌株的构建 | 第24-25页 |
| 2.1.9 无花果拟盘多毛孢原生质体制备及转化-回补菌株的构建 | 第25-26页 |
| 2.1.10 P.fici基因组中PfCsnE的鉴定及生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2 结果分析 | 第26-29页 |
| 2.2.1 PfCsnE的预测 | 第26页 |
| 2.2.2 PfcsnE缺失突变株及回补菌株的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.3 PfCsnE影响菌株的生长速度和孢子的产生 | 第28-29页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 PfCsnE对无花果拟盘多毛孢次级代谢产物的影响 | 第30-38页 |
| 3.1 试验材料与方法 | 第30-32页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第30页 |
| 3.1.2 次级代谢产物小量提取及HPLC分析 | 第30-31页 |
| 3.1.3 次级代谢产物定量分析 | 第31页 |
| 3.1.4 真菌发酵及次级代谢产物的分离制备 | 第31页 |
| 3.1.5 新化合物的结构鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2 结果分析 | 第32-37页 |
| 3.2.1 PfCsnE影响主要已知次级代谢产物的产量 | 第33页 |
| 3.2.2 PfsnE基因缺失导致新的次级代谢产物产生 | 第33-34页 |
| 3.2.3 化合物的结构解析 | 第34-37页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 PfcsnE基因缺失突变株及野生菌株的转录组分析 | 第38-45页 |
| 4.1 试验材料及方法 | 第38-39页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 RNA提取方法 | 第38页 |
| 4.1.3 转录组分析 | 第38-39页 |
| 4.2 结果分析 | 第39-44页 |
| 4.2.1 基因整体表达情况分析 | 第39-41页 |
| 4.2.2 与生长发育相关的基因的表达情况 | 第41-42页 |
| 4.2.3 与次级代谢相关的基因的表达情况 | 第42-43页 |
| 4.2.4 转录组分析CsnE调控孢子形成与次级代谢之间的关系 | 第43-44页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第44-45页 |
| 论文总结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-77页 |
| 附录A | 第53-64页 |
| 附录B | 第64-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78页 |
