| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 前言 | 第15-33页 |
| 1.1 纤维素与生物质能源 | 第15-16页 |
| 1.1.1 纤维素结构 | 第15-16页 |
| 1.1.2 纤维素生物燃料转化 | 第16页 |
| 1.2 纤维素酶 | 第16-21页 |
| 1.2.1 纤维素酶分类和分子结构 | 第17-18页 |
| 1.2.2 纤维素酶催化机理 | 第18-20页 |
| 1.2.3 纤维素酶应用 | 第20-21页 |
| 1.3 嗜热微生物源纤维素酶 | 第21-24页 |
| 1.4 立题依据和实验设计 | 第24-26页 |
| 1.5 参考文献 | 第26-33页 |
| 第2章 内切纤维素酶Ac Cel12B的性质研究 | 第33-71页 |
| 2.1 引言 | 第33-34页 |
| 2.2 实验材料 | 第34-39页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第34-35页 |
| 2.2.2 培养基 | 第35-36页 |
| 2.2.3 试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.4 溶液配制 | 第37-38页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第38-39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-47页 |
| 2.3.1 内切纤维素酶Ac Cel12B的序列分析 | 第39页 |
| 2.3.2 内切纤维素酶Ac Cel12B基因的克隆、构建与表达 | 第39-42页 |
| 2.3.3 重组内切纤维素酶Ac Cel12B的纯化 | 第42-43页 |
| 2.3.4 蛋白浓度的测定 | 第43页 |
| 2.3.5 内切纤维素酶Ac Cel12B酶活力的测定 | 第43页 |
| 2.3.6 最适p H、最适温度以及热稳定性测定 | 第43-44页 |
| 2.3.7 金属离子及化学试剂对酶活力的影响 | 第44页 |
| 2.3.8 酶底物特异性测定 | 第44-45页 |
| 2.3.9 内切纤维素酶Ac Cel12B动力学常数测定 | 第45页 |
| 2.3.10 HPLC法测定产物谱 | 第45页 |
| 2.3.11 酶对寡糖水解能力的测定 | 第45-46页 |
| 2.3.12 不溶性底物水解进程的测定 | 第46页 |
| 2.3.13 Ac Cel12B对Avicel吸附性测定 | 第46页 |
| 2.3.14 热力学稳定性分析 | 第46页 |
| 2.3.15 分子建模与底物对接 | 第46-47页 |
| 2.4 结果与分析 | 第47-63页 |
| 2.4.1 内切纤维素酶Ac Cel12B的序列分析 | 第47-49页 |
| 2.4.2 内切纤维素酶Ac Cel12B基因的克隆与构建 | 第49-50页 |
| 2.4.3 内切纤维素酶Ac Cel12B的表达和纯化 | 第50-51页 |
| 2.4.4 最适p H、最适温度以及热稳定性测定 | 第51-54页 |
| 2.4.5 金属离子及化学试剂对酶活力的影响 | 第54页 |
| 2.4.6 酶底物特异性测定 | 第54-55页 |
| 2.4.7 酶动力学常数测定 | 第55-56页 |
| 2.4.8 HPLC法测定产物谱 | 第56-57页 |
| 2.4.9 酶对寡糖水解能力的测定 | 第57-58页 |
| 2.4.10 不溶性底物水解进程的测定 | 第58-60页 |
| 2.4.11 Ac Cel12B对Avicel吸附性测定 | 第60页 |
| 2.4.12 热力学稳定性分析 | 第60-61页 |
| 2.4.13 分子建模与底物对接 | 第61-63页 |
| 2.5 小结 | 第63-65页 |
| 2.6 参考文献 | 第65-71页 |
| 第3章 Ac Cel12B纤维素酶协同作用的研究 | 第71-91页 |
| 3.1 引言 | 第71-72页 |
| 3.2 实验材料 | 第72-73页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第72页 |
| 3.2.2 培养基 | 第72-73页 |
| 3.2.3 试剂 | 第73页 |
| 3.2.4 溶液配制 | 第73页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第73页 |
| 3.3 实验方法 | 第73-75页 |
| 3.3.1 纤维素酶基因的克隆、构建与表达 | 第73-74页 |
| 3.3.2 重组纤维素酶的纯化 | 第74页 |
| 3.3.3 β-葡萄糖苷酶Ac Bgl1的性质表征 | 第74页 |
| 3.3.4 β-葡萄糖苷酶Ac Bgl1底物特异性测定 | 第74-75页 |
| 3.3.5 β-葡萄糖苷酶Ac Bgl1对寡糖水解能力的测定 | 第75页 |
| 3.3.6 纤维素酶协同性测定 | 第75页 |
| 3.4 结果与分析 | 第75-87页 |
| 3.4.1 纤维素酶的序列分析 | 第75-81页 |
| 3.4.2 纤维素酶基因的克隆、构建与表达 | 第81-82页 |
| 3.4.3 纤维素酶的表达和纯化 | 第82-83页 |
| 3.4.4 β-葡萄糖苷酶Ac Bgl1的性质表征 | 第83-84页 |
| 3.4.5 β-葡萄糖苷酶Ac Bgl1底物特异性测定 | 第84页 |
| 3.4.6 β-葡萄糖苷酶Ac Bgl1对寡糖水解能力的测定 | 第84-86页 |
| 3.4.7 纤维素酶协同性测定 | 第86-87页 |
| 3.5 小结 | 第87-88页 |
| 3.6 参考文献 | 第88-91页 |
| 第4章 Ac Cel12B中Linker作用的研究 | 第91-111页 |
| 4.1 引言 | 第91-92页 |
| 4.2 实验材料 | 第92-93页 |
| 4.2.1 菌株与质粒 | 第92页 |
| 4.2.2 培养基 | 第92-93页 |
| 4.2.3 试剂 | 第93页 |
| 4.2.4 溶液配制 | 第93页 |
| 4.2.5 主要仪器 | 第93页 |
| 4.3 实验方法 | 第93-97页 |
| 4.3.1 序列分析 | 第93页 |
| 4.3.2 突变体基因的克隆、构建与表达 | 第93-95页 |
| 4.3.3 突变体重组蛋白的纯化 | 第95页 |
| 4.3.4 蛋白浓度的测定 | 第95页 |
| 4.3.5 突变体酶活力的测定 | 第95页 |
| 4.3.6 最适p H、最适温度以及热稳定性测定 | 第95-96页 |
| 4.3.7 突变体酶动力学常数测定 | 第96页 |
| 4.3.8 HPLC法测定产物谱 | 第96页 |
| 4.3.9 不溶性底物水解进程的测定 | 第96页 |
| 4.3.10 热力学稳定性分析 | 第96-97页 |
| 4.4 结果与分析 | 第97-106页 |
| 4.4.1 序列分析 | 第97-99页 |
| 4.4.2 突变体基因的克隆、构建与表达 | 第99-100页 |
| 4.4.3 突变体蛋白的表达和纯化 | 第100-101页 |
| 4.4.4 最适p H、最适温度以及热稳定性测定 | 第101-104页 |
| 4.4.5 酶动力学常数测定 | 第104页 |
| 4.4.6 HPLC法测定产物谱 | 第104-105页 |
| 4.4.7 不溶性底物水解进程的测定 | 第105-106页 |
| 4.4.8 热力学稳定性分析 | 第106页 |
| 4.5 小结 | 第106-108页 |
| 4.6 参考文献 | 第108-111页 |
| 创新点 | 第111-113页 |
| 展望 | 第113-115页 |
| 攻读博士期间成果 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
