| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-12页 |
| 主要符号表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-35页 |
| 1.1 固定化酶反应器 | 第14-21页 |
| 1.1.1 毛细管/芯片通道 | 第15-16页 |
| 1.1.2 整体材料 | 第16-18页 |
| 1.1.3 颗粒材料 | 第18-21页 |
| 1.1.4 膜材料 | 第21页 |
| 1.2 糖蛋白/糖肽分离富集方法 | 第21-27页 |
| 1.2.1 凝集素亲和法 | 第23-24页 |
| 1.2.2 酰肼化学法 | 第24-25页 |
| 1.2.3 硼亲和富集法 | 第25-26页 |
| 1.2.4 亲水作用色谱法 | 第26-27页 |
| 1.3 氧化石墨烯结构和性质 | 第27-28页 |
| 1.4 氧化石墨烯功能化 | 第28-32页 |
| 1.4.1 共价功能化 | 第28-30页 |
| 1.4.2 非共价功能化 | 第30-32页 |
| 1.5 功能化氧化石墨烯用于生物分析 | 第32-33页 |
| 1.6 本论文工作 | 第33-35页 |
| 2 基于氧化石墨烯固定化酶反应器制备及其应用 | 第35-65页 |
| 2.1 基于磁性氧化石墨烯固定化酶反应器制备及其应用 | 第36-49页 |
| 2.1.1 引言 | 第36页 |
| 2.1.2 实验部分 | 第36-40页 |
| 2.1.2.1 试剂和仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.2.2 氧化石墨烯制备 | 第37页 |
| 2.1.2.3 氨基功能化磁性纳米颗粒制备 | 第37页 |
| 2.1.2.4 固定化酶反应器制备 | 第37-38页 |
| 2.1.2.5 酶固载量测定 | 第38页 |
| 2.1.2.6 鼠肝蛋白质提取 | 第38-39页 |
| 2.1.2.7 蛋白质样品预处理 | 第39页 |
| 2.1.2.8 蛋白质样品酶解 | 第39页 |
| 2.1.2.9 质谱分析和数据处理 | 第39-40页 |
| 2.1.3 结果与讨论 | 第40-48页 |
| 2.1.3.1 固定化酶反应器制备流程 | 第40-41页 |
| 2.1.3.2 材料表征 | 第41-42页 |
| 2.1.3.3 酶固载量 | 第42-43页 |
| 2.1.3.4 微波辅助酶解条件优化 | 第43页 |
| 2.1.3.5 微波辅助酶解能力评价 | 第43-47页 |
| 2.1.3.6 鼠肝提取蛋白质酶解分析 | 第47-48页 |
| 2.1.4 小结 | 第48-49页 |
| 2.2 基于树枝状聚合物功能化氧化石墨烯固定化酶反应器制备及其应用 | 第49-65页 |
| 2.2.1 引言 | 第49页 |
| 2.2.2 实验部分 | 第49-53页 |
| 2.2.2.1 试剂和仪器 | 第49-50页 |
| 2.2.2.2 树枝状聚合物功能化氧化石墨烯制备 | 第50页 |
| 2.2.2.3 固定化酶反应器制备 | 第50-51页 |
| 2.2.2.4 考察GDT对MALDI信号影响 | 第51页 |
| 2.2.2.5 血浆蛋白质提取 | 第51页 |
| 2.2.2.6 蛋白质样品预处理 | 第51-52页 |
| 2.2.2.7 蛋白质样品酶解 | 第52页 |
| 2.2.2.8 质谱分析和数据处理 | 第52-53页 |
| 2.2.3 结果与讨论 | 第53-63页 |
| 2.2.3.1 固定化酶反应器制备流程 | 第53页 |
| 2.2.3.2 材料表征 | 第53-56页 |
| 2.2.3.3 GDT对MALDI信号影响 | 第56-58页 |
| 2.2.3.4 靶上酶解条件优化 | 第58-60页 |
| 2.2.3.5 靶上酶解能力评价 | 第60-62页 |
| 2.2.3.6 血浆蛋白质酶解分析 | 第62-63页 |
| 2.2.4 小结 | 第63-65页 |
| 3 基于纳米金功能化氧化石墨烯糖肽富集材料制备及其应用 | 第65-103页 |
| 3.1 GO/PEI/Au/L-Cys制备及其用于亲水富集N-连接糖肽 | 第66-88页 |
| 3.1.1 引言 | 第66页 |
| 3.1.2 实验部分 | 第66-70页 |
| 3.1.2.1 试剂和仪器 | 第66-67页 |
| 3.1.2.2 GO/PEI/Au/L-Cys复合纳米材料制备 | 第67-68页 |
| 3.1.2.3 蛋白质样品酶解 | 第68页 |
| 3.1.2.4 GO/PEI/Au/L-Cys亲水富集糖肽 | 第68页 |
| 3.1.2.5 糖肽去N-糖基化 | 第68-69页 |
| 3.1.2.6 糖肽回收率考察 | 第69页 |
| 3.1.2.7 质谱分析和数据处理 | 第69-70页 |
| 3.1.3 结果与讨论 | 第70-83页 |
| 3.1.3.1 GO/PEI/Au/L-Cys复合纳米材料制备 | 第70页 |
| 3.1.3.2 材料表征 | 第70-75页 |
| 3.1.3.3 优化GO/PEI/Au/L-Cys富集糖肽条件 | 第75页 |
| 3.1.3.4 评价GO/PEI/Au/L-Cys富集糖肽能力 | 第75-77页 |
| 3.1.3.5 评价GO/PEI/Au/L-Cys亲水性 | 第77-79页 |
| 3.1.3.6 评价GO/PEI/Au/L-Cys回收率 | 第79-80页 |
| 3.1.3.7 评价GO/PEI/Au/L-Cys检测限 | 第80-81页 |
| 3.1.3.8 血浆样品中N-连接糖肽分析 | 第81-83页 |
| 3.1.4 小结 | 第83-88页 |
| 3.2 GO/PEI/Au/4-MPB制备及其用于硼亲和富集N-连接糖肽 | 第88-103页 |
| 3.2.1 引言 | 第88页 |
| 3.2.2 实验部分 | 第88-90页 |
| 3.2.2.1 试剂和仪器 | 第88-89页 |
| 3.2.2.2 GO/PEI/Au/4-MPB复合纳米材料制备 | 第89页 |
| 3.2.2.3 蛋白质样品酶解 | 第89-90页 |
| 3.2.2.4 亲水富集糖肽流程 | 第90页 |
| 3.2.2.5 GO/PEI/Au/4-MPB硼亲和富集糖肽流程 | 第90页 |
| 3.2.2.6 糖肽去N-糖基化 | 第90页 |
| 3.2.2.7 质谱分析和数据处理 | 第90页 |
| 3.2.3 结果与讨论 | 第90-100页 |
| 3.2.3.1 GO/PEI/Au/4-MPB复合纳米材料制备 | 第90-91页 |
| 3.2.3.2 材料表征 | 第91-96页 |
| 3.2.3.3 GO/PEI/Au/4-MPB硼亲和富集糖肽评价 | 第96-100页 |
| 3.2.4 小结 | 第100-103页 |
| 4 GO/Fe_3O_4/PEI/Au/PEG制备及其用于亲水富集N-连接糖肽 | 第103-123页 |
| 4.1 引言 | 第103页 |
| 4.2 实验部分 | 第103-106页 |
| 4.2.1 试剂和仪器 | 第103-104页 |
| 4.2.2 GO/Fe_3O_4/PEI/Au/PEG复合纳米材料制备 | 第104-105页 |
| 4.2.3 蛋白质样品酶解 | 第105页 |
| 4.2.4 GO/Fe_3O_4/PEI/Au/PEG亲水富集糖肽流程 | 第105-106页 |
| 4.2.5 糖肽去N-糖基化 | 第106页 |
| 4.2.6 糖肽回收率考察 | 第106页 |
| 4.2.7 质谱分析和数据处理 | 第106页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第106-120页 |
| 4.3.1 GO/Fe_3O_4/PEI/Au/PEG复合纳米材料制备 | 第106-107页 |
| 4.3.2 材料表征 | 第107-111页 |
| 4.3.3 优化GO/Fe_3O_4/PEI/Au/PEG亲水富集糖肽条件 | 第111-113页 |
| 4.3.4 评价GO/Fe_3O_4/PEI/Au/PEG亲水富集糖肽能力 | 第113-116页 |
| 4.3.5 评价GO/Fe_3O_4/PEI/Au/PEG回收率 | 第116-118页 |
| 4.3.6 血浆样品中N-连接糖肽富集分析 | 第118-120页 |
| 4.4 小结 | 第120-123页 |
| 5 GO/Fe_3O_4/PEI/Ag制备及其用于多相互作用富集N-连接糖肽 | 第123-139页 |
| 5.1 引言 | 第123页 |
| 5.2 实验部分 | 第123-126页 |
| 5.2.1 试剂和仪器 | 第123-124页 |
| 5.2.2 GO/Fe_3O_4/PEI/Ag复合纳米材料制备 | 第124-125页 |
| 5.2.3 蛋白质样品酶解 | 第125页 |
| 5.2.4 GO/Fe_3O_4/PEI/Ag多相互作用富集糖肽流程 | 第125-126页 |
| 5.2.5 糖肽去N-糖基化 | 第126页 |
| 5.2.6 糖肽回收率考察 | 第126页 |
| 5.2.7 质谱分析和数据处理 | 第126页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第126-137页 |
| 5.3.1 GO/Fe_3O_4/PEI/Ag复合纳米材料制备 | 第126-127页 |
| 5.3.2 材料表征 | 第127-129页 |
| 5.3.3 优化GO/Fe_3O_4/PEI/Ag多相互作用富集糖肽条件 | 第129-130页 |
| 5.3.4 评价GO/Fe_3O_4/PEI/Ag多相互作用富集糖肽 | 第130-134页 |
| 5.3.5 评价GO/Fe_3O_4/PEI/Ag回收率 | 第134-135页 |
| 5.3.6 血浆样品中N-连接糖肽富集分析 | 第135-137页 |
| 5.4 小结 | 第137-139页 |
| 6 总结及展望 | 第139-141页 |
| 6.1 结论 | 第139页 |
| 6.2 创新点 | 第139-140页 |
| 6.3 展望 | 第140-141页 |
| 参考文献 | 第141-157页 |
| 附录 血浆蛋白酶解产物经过不同材料富集后情况汇总 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 作者简介 | 第159页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第159-160页 |
