摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一部分 文献综述 | 第8-31页 |
1 芋螺及芋螺毒素研究进展 | 第8-19页 |
1.1 芋螺生物学特性 | 第8-9页 |
1.2 芋螺毒素的分类和命名 | 第9-10页 |
1.3 芋螺毒素的药理学活性 | 第10-19页 |
1.3.1 作用于配体门控离子通道的芋螺毒素 | 第11-13页 |
1.3.2 作用于电压门控离子通道的芋螺毒素 | 第13-19页 |
2 疼痛 | 第19-27页 |
2.1 疼痛概述 | 第19页 |
2.2 大鼠疼痛模型研究进展 | 第19-27页 |
2.2.1 物理刺激法 | 第19-21页 |
2.2.2 化学刺激法 | 第21-23页 |
2.2.3 神经病理性痛模型 | 第23-27页 |
3 前景和应用 | 第27-29页 |
4 本研究的目的意义 | 第29-30页 |
5 技术路线 | 第30-31页 |
第二部分 动物实验 | 第31-52页 |
1 实验材料 | 第31-32页 |
1.1 实验动物 | 第31页 |
1.2 药品与试剂 | 第31-32页 |
1.3 仪器设备 | 第32页 |
2 实验方法 | 第32-37页 |
2.1 给药途径 | 第32-33页 |
2.1.1 腹腔给药法 | 第32页 |
2.1.2 侧脑室给药法 | 第32页 |
2.1.3 金鱼肌肉给药法 | 第32-33页 |
2.1.4 大鼠鞘内给药方法 | 第33页 |
2.2 芋螺毒素活性药物筛选 | 第33-34页 |
2.2.1 金鱼肌肉注射给药行为学筛选 | 第33页 |
2.2.2 幼鼠行为学筛选 | 第33-34页 |
2.3 镇痛药筛选方法 | 第34-36页 |
2.3.1 热板法 | 第34页 |
2.3.2 甩尾法 | 第34-35页 |
2.3.3 大鼠CCI模型的建立与机械痛觉刺激实验 | 第35-36页 |
2.4 统计方法 | 第36-37页 |
3 动物实验结果 | 第37-52页 |
3.1 金鱼、幼鼠行为学初筛 | 第37-39页 |
3.1.1 幼鼠中枢给药行为学的初筛结果 | 第37-38页 |
3.1.2 金鱼肌肉注射给药行为学的初筛结果 | 第38-39页 |
3.2 LvD21镇痛作用研究 | 第39-52页 |
3.2.1 侧脑室给药LvD21的镇痛效果 | 第39-43页 |
3.2.2 腹腔给药LvD21的镇痛效果 | 第43-47页 |
3.2.3 LvD21在大鼠CCI模型上的镇痛作用 | 第47-52页 |
第三部分 电生理实验部分 | 第52-61页 |
1 材料 | 第52-53页 |
1.1 菌种、质粒及培养基 | 第52页 |
1.2 实验动物 | 第52页 |
1.3 试剂与仪器 | 第52-53页 |
2 方法 | 第53-57页 |
2.1 CaCl2法制备E.coli DH5α感受态细胞 | 第53页 |
2.2 重组质粒转化入工程菌 | 第53-54页 |
2.3 使用BBI质粒中量提取试剂盒提取质粒 | 第54页 |
2.4 α3、β2乙酰胆碱受体基因质粒的线性化 | 第54-55页 |
2.5 α3、β2乙酰胆碱受体线性化DNA的体外转录 | 第55页 |
2.6 纯化α 3、β2乙酰胆碱受体的cRNA | 第55-56页 |
2.7 分离爪蟾卵母细胞 | 第56页 |
2.8 显微注射受体cRNA | 第56-57页 |
2.9 记录nAChRs门控电流 | 第57页 |
3 电生理实验结果 | 第57-61页 |
3.1 含有α3、β2 nAChR基因的质粒提取 | 第57-58页 |
3.2 α3、β2质粒的酶切线性化 | 第58-59页 |
3.3 α3、β2乙酰胆碱受体cRNA的制备、纯化和浓度测定 | 第59页 |
3.4 LvD21对α3 β2乙酰胆碱受体的作用 | 第59-61页 |
第四部分 讨论 | 第61-65页 |
1 动物疼痛模型 | 第61-63页 |
2 电生理实验 | 第63-65页 |
第五部分 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者在读期间科研成果简介 | 第71页 |