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克氏原螯虾两种SOD基因克隆与功能研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第10-19页
    1 克氏原螯虾的养殖现状及常见病害第10-11页
    2 无脊椎动物免疫第11-12页
        2.1 先天性免疫与获得性免疫的差异第11-12页
        2.2 无脊椎动物免疫防御机制第12页
    3 国内外超氧化物歧化酶的的研究概况第12-16页
        3.1 超氧化物歧化酶的分类第13-14页
        3.2 超氧化物歧化酶的生物学功能第14-15页
        3.3 超氧化物歧化酶在水生动物中的研究进展第15-16页
    4 本论文的研究目的、内容、意义和技术路线第16-19页
        4.1 本论文的研究内容如下第17-18页
        4.2 本论文的实验技术路线如下第18-19页
第二章 克氏原螯虾ecCuZnSOD的克隆及序列分析第19-33页
    1 实验材料第19-21页
        1.1 实验动物第19页
        1.2 实验仪器第19页
        1.3 实验试剂和培养基的配制第19-20页
        1.4 实验所用引物设计与合成第20-21页
    2 实验方法第21-27页
        2.1 克氏原螯虾ecCuZnSOD基因中间片段的获得第21-24页
        2.2 RACE-PCR扩增克氏原螯虾胞外型铜锌SOD基因全长第24-27页
    3 实验结果第27-31页
        3.1 总的RNA的制备第27页
        3.2 克氏原螯虾ecCuZnSOD全长cDNA序列及推导的氨基酸序列第27-30页
        3.3 不同物种的ecCuZnSOD的氨基酸序列的同源性对比及系统进化分析第30-31页
    4 讨论第31-33页
第三章 克氏原螯虾mtMnSOD的克隆及序列分析第33-39页
    1 实验材料第33页
        1.1 实验动物第33页
        1.2 实验仪器第33页
        1.3 实验试剂和培养基的配制第33页
    2 实验方法第33-34页
        2.1 从血细胞中提取总RNA并进行反转录第33页
        2.2 设计实验所用引物PCR扩增mtMnSOD基因第33-34页
        2.3 mtMnSOD基因的生物信息学分析第34页
    3 实验结果第34-37页
        3.1 mtMnSOD的基因结构特征及分析第34-36页
        3.2 mtMnSOD的氨基酸序列的同源对比和系统发育分析第36-37页
    4 讨论第37-39页
第四章 病原菌刺激克氏原螯虾ecCuZnSOD、mtMnSOD基因水平和蛋白水平的表达变化第39-56页
    1 实验材料第39-41页
        1.1 实验动物和菌株第39页
        1.2 主要试剂及配制第39-40页
        1.3 主要仪器设备第40页
        1.4 引物设计与合成第40-41页
    2 实验方法第41-42页
        2.1 实时荧光定量PCR分别检测克氏原螯虾ecCuZnSOD和mtMnSOD的组织分布第41页
        2.2 菌种培养第41页
        2.3 两种病原菌注射与组织样的提取(用于总RNA的提取和SOD的活性检测)第41页
        2.4 RNA反转录成单链cDNA第41页
        2.5 实时荧光定量PCR及数据分析第41-42页
        2.6 克氏原螯虾组织中总的SOD活性的检测和CZSOD活性的测定第42页
    3 实验结果第42-54页
        3.1 实时荧光定量PCR鉴定克氏原螯虾的两种SOD在不同组织中的表达变化第42-43页
        3.2 中华绒螯蟹螺原体刺激下的克氏原螯虾的各组织ecCuZnSOD和mtMnSOD的mRNA的表达变化研究第43-47页
        3.3 嗜水气单胞菌刺激下的克氏原螯虾的各组织ecCuZnSOD和mtMnSOD的mRNA的表达变化研究第47-50页
        3.4 中华绒螯蟹螺原体刺激克氏原螯虾后组织中的总-SOD和CZSOD的活性检测第50-52页
        3.5 嗜水气单胞菌刺激克氏原螯虾后组织中的总-SOD和CZSOD的活性检测第52-54页
    4 讨论第54-56页
全文小结第56-57页
参考文献第57-64页
读研期间科研成果第64-65页
致谢第65-66页

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