摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1 克氏原螯虾的养殖现状及常见病害 | 第10-11页 |
2 无脊椎动物免疫 | 第11-12页 |
2.1 先天性免疫与获得性免疫的差异 | 第11-12页 |
2.2 无脊椎动物免疫防御机制 | 第12页 |
3 国内外超氧化物歧化酶的的研究概况 | 第12-16页 |
3.1 超氧化物歧化酶的分类 | 第13-14页 |
3.2 超氧化物歧化酶的生物学功能 | 第14-15页 |
3.3 超氧化物歧化酶在水生动物中的研究进展 | 第15-16页 |
4 本论文的研究目的、内容、意义和技术路线 | 第16-19页 |
4.1 本论文的研究内容如下 | 第17-18页 |
4.2 本论文的实验技术路线如下 | 第18-19页 |
第二章 克氏原螯虾ecCuZnSOD的克隆及序列分析 | 第19-33页 |
1 实验材料 | 第19-21页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 实验仪器 | 第19页 |
1.3 实验试剂和培养基的配制 | 第19-20页 |
1.4 实验所用引物设计与合成 | 第20-21页 |
2 实验方法 | 第21-27页 |
2.1 克氏原螯虾ecCuZnSOD基因中间片段的获得 | 第21-24页 |
2.2 RACE-PCR扩增克氏原螯虾胞外型铜锌SOD基因全长 | 第24-27页 |
3 实验结果 | 第27-31页 |
3.1 总的RNA的制备 | 第27页 |
3.2 克氏原螯虾ecCuZnSOD全长cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第27-30页 |
3.3 不同物种的ecCuZnSOD的氨基酸序列的同源性对比及系统进化分析 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
第三章 克氏原螯虾mtMnSOD的克隆及序列分析 | 第33-39页 |
1 实验材料 | 第33页 |
1.1 实验动物 | 第33页 |
1.2 实验仪器 | 第33页 |
1.3 实验试剂和培养基的配制 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-34页 |
2.1 从血细胞中提取总RNA并进行反转录 | 第33页 |
2.2 设计实验所用引物PCR扩增mtMnSOD基因 | 第33-34页 |
2.3 mtMnSOD基因的生物信息学分析 | 第34页 |
3 实验结果 | 第34-37页 |
3.1 mtMnSOD的基因结构特征及分析 | 第34-36页 |
3.2 mtMnSOD的氨基酸序列的同源对比和系统发育分析 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第四章 病原菌刺激克氏原螯虾ecCuZnSOD、mtMnSOD基因水平和蛋白水平的表达变化 | 第39-56页 |
1 实验材料 | 第39-41页 |
1.1 实验动物和菌株 | 第39页 |
1.2 主要试剂及配制 | 第39-40页 |
1.3 主要仪器设备 | 第40页 |
1.4 引物设计与合成 | 第40-41页 |
2 实验方法 | 第41-42页 |
2.1 实时荧光定量PCR分别检测克氏原螯虾ecCuZnSOD和mtMnSOD的组织分布 | 第41页 |
2.2 菌种培养 | 第41页 |
2.3 两种病原菌注射与组织样的提取(用于总RNA的提取和SOD的活性检测) | 第41页 |
2.4 RNA反转录成单链cDNA | 第41页 |
2.5 实时荧光定量PCR及数据分析 | 第41-42页 |
2.6 克氏原螯虾组织中总的SOD活性的检测和CZSOD活性的测定 | 第42页 |
3 实验结果 | 第42-54页 |
3.1 实时荧光定量PCR鉴定克氏原螯虾的两种SOD在不同组织中的表达变化 | 第42-43页 |
3.2 中华绒螯蟹螺原体刺激下的克氏原螯虾的各组织ecCuZnSOD和mtMnSOD的mRNA的表达变化研究 | 第43-47页 |
3.3 嗜水气单胞菌刺激下的克氏原螯虾的各组织ecCuZnSOD和mtMnSOD的mRNA的表达变化研究 | 第47-50页 |
3.4 中华绒螯蟹螺原体刺激克氏原螯虾后组织中的总-SOD和CZSOD的活性检测 | 第50-52页 |
3.5 嗜水气单胞菌刺激克氏原螯虾后组织中的总-SOD和CZSOD的活性检测 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
全文小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
读研期间科研成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |