| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 文献综述 | 第17-28页 |
| 第一章 猪流行性腹泻与猪流行性腹泻病毒的研究进展 | 第17-28页 |
| 1.1 猪流行性腹泻的流行状况 | 第17-19页 |
| 1.2 PEDV 概况 | 第19-20页 |
| 1.2.1 PEDV 的分类 | 第19页 |
| 1.2.2 PEDV 的形态结构 | 第19页 |
| 1.2.3 PEDV 的理化特性 | 第19-20页 |
| 1.3 PEDV 的细胞培养特性 | 第20页 |
| 1.4 PEDV 的基因组结构 | 第20-21页 |
| 1.5 PEDV S 蛋白的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.5.1 S 蛋白的分子结构特征及作用 | 第21页 |
| 1.5.2 S 蛋白的分子遗传特征 | 第21-22页 |
| 1.6 PEDV M 蛋白的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.6.1 M 蛋白的分子结构特征及作用 | 第22页 |
| 1.6.2 M 蛋白的分子遗传特征 | 第22-23页 |
| 1.7 PEDV N 蛋白的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.7.1 N 蛋白的分子结构特征及作用 | 第23页 |
| 1.7.2 N 蛋白的分子遗传特征 | 第23-24页 |
| 1.8 PEDV E 蛋白的研究进展 | 第24页 |
| 1.9 PEDV 非结构蛋白及其功能 | 第24-25页 |
| 1.9.1 ORF1a/1b 蛋白 | 第24-25页 |
| 1.9.2 ORF3 蛋白 | 第25页 |
| 1.10 PEDV 检测方法的研究进展 | 第25-28页 |
| 1.10.1 血清学检测 | 第25-26页 |
| 1.10.2 分子生物学检测 | 第26-27页 |
| 1.10.3 限制性片段多态性（RFLP） | 第27页 |
| 1.10.4 等温环介导扩增技术（LAMP） | 第27-28页 |
| 第二章 广东省仔猪腹泻的病原调查及其分子流行病学调查 | 第28-35页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 确定仔猪腹泻主要病原的样品来源 | 第28页 |
| 2.1.2 PEDV 分子流行病学调查的样品来源 | 第28-29页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第29页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第29页 |
| 2.2 方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 粪样的处理 | 第29-30页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第30页 |
| 2.2.3 RNA 的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.4 RT-PCR 扩增 | 第31页 |
| 2.2.5 产房仔猪发病与死亡数据收集 | 第31-33页 |
| 2.2.6 数据分析 | 第33页 |
| 2.3 结果 | 第33页 |
| 2.3.1 仔猪腹泻样品中 3 种病毒的检测结果 | 第33页 |
| 2.3.2 粪样中 PEDV 的检测结果 | 第33页 |
| 2.3.3 不同规模猪场 PED 的发病率与死亡率 | 第33页 |
| 2.3.4 不同地区猪场 PED 的发病率与死亡率 | 第33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 PEDV 的分离鉴定及致病性研究 | 第35-47页 |
| 3.1 材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第35页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.3 样品来源 | 第36页 |
| 3.1.4 细胞 | 第36页 |
| 3.1.5 引物 | 第36页 |
| 3.1.6 试验抗体 | 第36页 |
| 3.1.7 试验动物 | 第36-37页 |
| 3.2 方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 样品的处理 | 第37页 |
| 3.2.2 PEDV 的检测 | 第37页 |
| 3.2.3 PEDV 的分离 | 第37-39页 |
| 3.2.4 PEDV 分离株致病性试验 | 第39-40页 |
| 3.3 结果 | 第40-45页 |
| 3.3.1 腹泻仔猪粪样中 PEDV 的检测 | 第40页 |
| 3.3.2 PEDV 的分离培养 | 第40页 |
| 3.3.3 分离毒 RT-PCR 检测结果 | 第40-41页 |
| 3.3.4 间接免疫荧光法检测 Vero 细胞中 PEDV 结果 | 第41页 |
| 3.3.5 PEDV 分离株 TCID50测定结果 | 第41-42页 |
| 3.3.6 仔猪人工感染 PEDV | 第42-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-46页 |
| 3.4.1 PEDV 的分离与培养 | 第45页 |
| 3.4.2 PEDV 的致病性 | 第45-46页 |
| 3.5 小结 | 第46-47页 |
| 第四章 猪流行性腹泻病毒的分子生物学特征分析 | 第47-78页 |
| 4.1 材料与方法 | 第47-48页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第47页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第47-48页 |
| 4.1.3 样品 | 第48页 |
| 4.1.4 引物 | 第48页 |
| 4.2 方法 | 第48-54页 |
| 4.2.1 样品的处理 | 第48页 |
| 4.2.2 RNA 的提取 | 第48页 |
| 4.2.3 cDNA 的合成 | 第48-49页 |
| 4.2.4 基因片段的 PCR 扩增 | 第49页 |
| 4.2.5 PCR 产物的纯化与回收 | 第49页 |
| 4.2.6 PCR 产物的连接与转化 | 第49-50页 |
| 4.2.7 DNA 的克隆与转化 | 第50-51页 |
| 4.2.8 序列的分析 | 第51-54页 |
| 4.3 结果 | 第54-75页 |
| 4.3.1 PEDV S、ORF3 和 M 基因 RT-PCR 和克隆测序结果 | 第54页 |
| 4.3.2 PEDV S 基因分子生物学特征分析 | 第54-67页 |
| 4.3.3 PEDV M 基因分子生物学特征分析 | 第67-71页 |
| 4.3.4 PEDV ORF3 基因分子生物学特征分析 | 第71-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-77页 |
| 4.4.1 PEDV S 基因 | 第75页 |
| 4.4.2 PEDV M 基因 | 第75-76页 |
| 4.4.3 PEDV ORF3 基因 | 第76-77页 |
| 4.5 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 猪流行性腹泻病毒传播途径的研究 | 第78-87页 |
| 5.1 材料 | 第78-79页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第78页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第78页 |
| 5.1.3 猪场基本情况 | 第78-79页 |
| 5.2 方法 | 第79-82页 |
| 5.2.1 样品的采集 | 第79-81页 |
| 5.2.2 RNA 的提取 | 第81-82页 |
| 5.2.7 引物 | 第82页 |
| 5.2.8 RT-PCR 检测 PEDV | 第82页 |
| 5.2.9 Real-time PCR 检测 PEDV | 第82页 |
| 5.3 结果 | 第82-84页 |
| 5.3.1 康复仔猪粪便内检测 PEDV 的结果 | 第82-83页 |
| 5.3.2 空气样品中 PEDV 检测结果 | 第83页 |
| 5.3.3 精液样品中 PEDV 检测结果 | 第83-84页 |
| 5.3.4 乳样中 PEDV 检测结果 | 第84页 |
| 5.3.5 同一猪场不同时间的 PED 疫情中 PEDV S 基因的序列分析 | 第84页 |
| 5.4 讨论 | 第84-86页 |
| 5.5 小结 | 第86-87页 |
| 本论文结论 | 第87页 |
| 创新点 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| 缩略词（Abbreviation Index） | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 作者简介 | 第99-100页 |
| 附录 | 第100-131页 |
