| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 研究背景 | 第13-22页 |
| 1.1.1 影响嫁接不亲和的因素 | 第13-14页 |
| 1.1.1.1 遗传因素 | 第13-14页 |
| 1.1.1.2 外界因素 | 第14页 |
| 1.1.2 嫁接不亲和性机制的研究进展 | 第14-20页 |
| 1.1.2.1 生理方面 | 第14-16页 |
| 1.1.2.2 生化方面 | 第16-17页 |
| 1.1.2.3 结构方面 | 第17-19页 |
| 1.1.2.4 分子生物学方面 | 第19-20页 |
| 1.1.3 嫁接亲和性早期鉴定 | 第20-21页 |
| 1.1.4 荔枝嫁接方面的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.2 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 1.3 研究技术路线 | 第23-25页 |
| 1.3.1 技术路线图 | 第23-24页 |
| 1.3.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 第2章 嫁接亲和性的评价 | 第25-38页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 材料 | 第25页 |
| 2.2.2 方法 | 第25-28页 |
| 2.2.2.1 嫁接 | 第25-26页 |
| 2.2.2.2 形态指标测定 | 第26-27页 |
| 2.2.2.3 嫁接组合光合特性观测 | 第27-28页 |
| 2.2.2.4 嫁接相关酶活性测定 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-35页 |
| 2.3.1 嫁接亲和性初步评价 | 第28-30页 |
| 2.3.2 嫁接亲和性再评价 | 第30-34页 |
| 2.3.3 嫁接组合光合速率 | 第34页 |
| 2.3.4 嫁接相关酶活性 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 2.5 本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 嫁接亲和性早期鉴定指标筛选 | 第38-56页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 材料与方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 材料 | 第38页 |
| 3.2.3 方法 | 第38-42页 |
| 3.2.3.1 流式细胞仪测定荔枝品种基因组大小 | 第38-39页 |
| 3.2.3.2 SCoT分子标记分析 | 第39-40页 |
| 3.2.3.3 生理生化指标 | 第40-42页 |
| 3.2.3.4 石蜡切片制作 | 第42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-54页 |
| 3.3.1 流式细胞仪测定基因组大小结果 | 第42页 |
| 3.3.2 SCo T分子标记分析样品间亲缘关系 | 第42-46页 |
| 3.3.3 叶片干物重与嫁接亲和力 | 第46页 |
| 3.3.4 叶片水势与嫁接亲和力 | 第46-48页 |
| 3.3.5 叶片氮磷钾含量与嫁接亲和力 | 第48-49页 |
| 3.3.6 叶片可溶性糖含量与嫁接亲和力 | 第49页 |
| 3.3.7 叶片蛋白含量与嫁接亲和力 | 第49-50页 |
| 3.3.8 叶片淀粉含量与嫁接亲和力 | 第50-51页 |
| 3.3.9 叶片相对电导率与嫁接亲和力 | 第51页 |
| 3.3.10 叶片总酚含量与嫁接亲和力 | 第51-52页 |
| 3.3.11 荔枝嫁接亲和性生理指标测定与嫁接亲和相关分析 | 第52-53页 |
| 3.3.12 愈合处石蜡切片观察 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 3.5 本章小结 | 第55-56页 |
| 第4章 嫁接组合转录组特征与亲和相关基因分析 | 第56-84页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 材料与方法 | 第56-58页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.2.2 方法 | 第56-58页 |
| 4.2.2.1 嫁接愈合部愈合过程石蜡切片观测 | 第56页 |
| 4.2.2.2 RNA提取，建库准备以及RNA-seq测序 | 第56-57页 |
| 4.2.2.3 基因功能注释 | 第57页 |
| 4.2.2.4 WGCNA算法基础 | 第57-58页 |
| 4.2.2.5 定量RT-PCR | 第58页 |
| 4.3 结果与分析 | 第58-81页 |
| 4.3.1 嫁接成活率和生长势 | 第58-59页 |
| 4.3.2 嫁接愈合处愈合过程石蜡切片观察 | 第59-60页 |
| 4.3.3 RNA提取与质量检测 | 第60-62页 |
| 4.3.4 转录组测序数据质量评估 | 第62-63页 |
| 4.3.5 转录组数据功能注释 | 第63-67页 |
| 4.3.6 WGCNA | 第67-70页 |
| 4.3.7 基因表达验证分析 | 第70页 |
| 4.3.8 差异表达基因筛选 | 第70-72页 |
| 4.3.9 嫁接愈合过程中差异基因表达模式聚类分析 | 第72-73页 |
| 4.3.10 嫁接愈合过程中差异基因转录因子筛选 | 第73-74页 |
| 4.3.11 嫁接亲和相关基因筛选 | 第74-81页 |
| 4.3.11.1 植物内源激素IAA相关基因 | 第74-76页 |
| 4.3.11.2 嫁接愈合过程木质素合成相关基因 | 第76-78页 |
| 4.3.11.3 嫁接愈合过程信号转导相关基因 | 第78-81页 |
| 4.4 讨论 | 第81-83页 |
| 4.5 本章小结 | 第83-84页 |
| 第5章 Lc POD和Lc PAL的功能验证 | 第84-106页 |
| 5.1 引言 | 第84页 |
| 5.2 材料与方法 | 第84-92页 |
| 5.2.1 材料 | 第84-85页 |
| 5.2.1.1 植物材料 | 第84页 |
| 5.2.1.2 主要实验试剂 | 第84-85页 |
| 5.2.1.3 主要仪器设备 | 第85页 |
| 5.2.2 Lc POD和Lc PAL克隆与分析 | 第85-87页 |
| 5.2.2.1 荔枝RNA的提取及检测 | 第85页 |
| 5.2.2.2 引物设计 | 第85页 |
| 5.2.2.3 c DNA第一链的合成 | 第85-86页 |
| 5.2.2.4 目的基因片段的扩增和检测 | 第86页 |
| 5.2.2.5 目的基因片段回收、载体连接、转化、阳性克隆的鉴定与测序 | 第86页 |
| 5.2.2.6 c DNA片段序列的比对生物信息学分析 | 第86-87页 |
| 5.2.3 Lc POD和Lc PAL的表达分析 | 第87页 |
| 5.2.3.1 定量引物设计 | 第87页 |
| 5.2.3.2 Real-Time PCR反应 | 第87页 |
| 5.2.3.3 基因相对表达量分析 | 第87页 |
| 5.2.4 Lc POD和Lc PAL的功能验证 | 第87-90页 |
| 5.2.4.1 植物表达载体构建 | 第87-89页 |
| 5.2.4.2 农杆菌转化检测 | 第89页 |
| 5.2.4.3 烟草遗传转化程序 | 第89-90页 |
| 5.2.4.4 转基因烟草的分子检测 | 第90页 |
| 5.2.4.5 转基因植株的表型分析及嫁接实验 | 第90页 |
| 5.2.5 荔枝重要嫁接相关转录因子的亚细胞定位分析 | 第90-91页 |
| 5.2.5.1 载体构建 | 第90-91页 |
| 5.2.5.2 重组质粒的农杆菌转化检测 | 第91页 |
| 5.2.5.3 本氏烟草注射及观察 | 第91页 |
| 5.2.6 双荧光报告实验 | 第91-92页 |
| 5.3 结果与分析 | 第92-104页 |
| 5.3.1 Lc POD和Lc PAL克隆与序列分析 | 第92-96页 |
| 5.3.1.1 Lc POD和Lc PAL开放阅读框全长的克隆 | 第92-93页 |
| 5.3.1.2 Lc POD和Lc PAL的氨基酸序列比对及进化树分析 | 第93-96页 |
| 5.3.2 Lc POD和Lc PAL的时空表达特性分析 | 第96-97页 |
| 5.3.2.1 荔枝POD基因在荔枝嫁接愈合不同时期的表达特征 | 第96页 |
| 5.3.2.2 荔枝PAL基因在荔枝嫁接愈合不同时期的表达特征 | 第96-97页 |
| 5.3.3 Lc POD和Lc PAL基因转化烟草的表型分析 | 第97-101页 |
| 5.3.4 荔枝MYB基因的克隆与序列分析 | 第101页 |
| 5.3.5 Lc MYB基因亚细胞定位分析 | 第101-103页 |
| 5.3.6 双荧光报告实验 | 第103-104页 |
| 5.4 讨论 | 第104-105页 |
| 5.4.1 荔枝POD同源基因 | 第104页 |
| 5.4.2 荔枝PAL同源基因 | 第104页 |
| 5.4.3 荔枝MYB同源基因 | 第104-105页 |
| 5.5 本章小结 | 第105-106页 |
| 第6章全文讨论与结论 | 第106-109页 |
| 6.1 全文讨论 | 第106-107页 |
| 6.2 全文结论 | 第107-109页 |
| 本文的创新性 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-123页 |
| 在读期间发表论文及奖励 | 第123-124页 |
| 附录A SCoT引物序列 | 第124-125页 |
| 附录B q RT-PCR所选基因引物序列 | 第125-126页 |
| 附录C 生长素相关的差异表达基因的q RT-PCR验证 | 第126-127页 |
| 附录D 嫁接亲和组合与嫁接不亲和组合嫁接后不同时期愈合处IAA含量测定 | 第127-128页 |
| 附录E 木质素合成相关基因的q RT-PCR验证 | 第128-129页 |
| 附录F 转基因烟草嫁接后生长情况 | 第129-134页 |
| 附录G 克隆基因序列 | 第134-137页 |
