| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略语及中文对照 | 第7-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 杏鲍菇 | 第12-14页 |
| 1.1.1 杏鲍菇简介 | 第12页 |
| 1.1.2 杏鲍菇的营养及药用功能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 杏鲍菇采后贮藏保鲜研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 果蔬采后质地变化 | 第14-15页 |
| 1.2.1 采后果蔬硬化机理 | 第14-15页 |
| 1.3 木质素合成途径 | 第15-22页 |
| 1.3.1 苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase，PAL) | 第17页 |
| 1.3.2 肉桂酸 4-羟化酶（cinnamate4-hydroxylase，C4H） | 第17-18页 |
| 1.3.3 香豆酸 3-羟化酶（p-coumarate 3-hydroxylase，C3H） | 第18页 |
| 1.3.4 奎宁酸/莽萆酸羟基肉桂酰Co A转移酶（p-hydroxycinnamoyl-Co A:quinate/shikimatehydroxycinnamoyl transferase，HCT） | 第18-19页 |
| 1.3.5 阿魏酸 5-羟化酶（ferulate 5-hydroxylase，F5H） | 第19页 |
| 1.3.6 咖啡酰Co A-O-甲基转移酶（caffeoyl-Co A O-methyltransferase，CCo AOMT） | 第19-20页 |
| 1.3.7 咖啡酸-O-甲基转移酶（caffeic acid-O-methyltransferase，COMT） | 第20页 |
| 1.3.8 对香豆酸辅酶A连接酶（4-coumarate：coenzyme A ligase，4CL） | 第20-21页 |
| 1.3.9 肉桂酰辅酶A还原酶（cinnamoyl-Co A reductase，CCR） | 第21页 |
| 1.3.10 肉桂醇脱氢酶（cinnamyl alcohol dehydrogenase，CAD） | 第21-22页 |
| 1.3.11 过氧化物酶（Peroxidase，POD） | 第22页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-43页 |
| 2.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.2 实验设备 | 第24-25页 |
| 2.3 实验试剂 | 第25页 |
| 2.4 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.5 试验方法 | 第26-43页 |
| 2.5.1 低温贮藏下杏鲍菇生理生化的变化 | 第26-29页 |
| 2.5.1.1 质构分析 | 第26页 |
| 2.5.1.2 木质素含量的测定 | 第26-27页 |
| 2.5.1.3 几丁质含量的测定 | 第27页 |
| 2.5.1.4 纤维素含量的测定 | 第27页 |
| 2.5.1.5 木质素合成关键酶的提取与测定 | 第27-29页 |
| 2.5.2 杏鲍菇木质素合成途径关键基因克隆 | 第29-40页 |
| 2.5.2.1 木质素合成途径相关基因中间片段的克隆 | 第29-35页 |
| 2.5.2.2 RACE方法克隆 3’端序列 | 第35-37页 |
| 2.5.2.3 RACE方法克隆 5’端序列 | 第37-39页 |
| 2.5.2.4 杏鲍菇木质素合成途径基因生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 2.5.3 杏鲍菇木质素合成途径相关基因表达分析 | 第40-43页 |
| 2.5.3.1 杏鲍菇材料 | 第40页 |
| 2.5.3.2 总RNA提取以及纯度与完整性的鉴定 | 第40页 |
| 2.5.3.3 c DNA的合成 | 第40页 |
| 2.5.3.4 荧光定量PCR引物设计 | 第40-41页 |
| 2.5.3.5 实时荧光定量PCR条件和实时定量分析 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-84页 |
| 3.1 低温贮藏下杏鲍菇木质化相关的理化指标变化 | 第43-52页 |
| 3.1.1 菌褶部位的质地变化 | 第43-44页 |
| 3.1.2 菇体中部的质地变化 | 第44-45页 |
| 3.1.3 菇体尾部的质地变化 | 第45-47页 |
| 3.1.4 不同部位木质素含量变化 | 第47-48页 |
| 3.1.5 不同部位纤维素含量变化 | 第48-49页 |
| 3.1.6 不同部位几丁质含量变化 | 第49页 |
| 3.1.7 PAL、CAD、POD活性 | 第49-52页 |
| 3.2 木质化相关基因克隆 | 第52-79页 |
| 3.2.1 杏鲍菇总RNA的提取及检测 | 第52页 |
| 3.2.2 Pe PAL基因的克隆 | 第52-63页 |
| 3.2.2.1 PAL基因的扩增 | 第52-53页 |
| 3.2.2.2 Pe PAL基因序列全长 | 第53-56页 |
| 3.2.2.3 Pe PAL基本理化性质分析 | 第56-57页 |
| 3.2.2.4 Pe PAL结构域分析 | 第57-59页 |
| 3.2.2.5 Pe PAL蛋白的二级结构和三级结构预测分析 | 第59-60页 |
| 3.2.2.6 同源性比较及进化分析 | 第60-63页 |
| 3.2.3 Pe4cl1基因片段的克隆 | 第63-66页 |
| 3.2.3.1 Pe4cl1基因片段的扩增 | 第63页 |
| 3.2.3.2 Pe4cl1基因片段c DNA的序列 | 第63-66页 |
| 3.2.4 Pe4cl2基因片段的克隆 | 第66-69页 |
| 3.2.4.1 Pe4cl2基因片段的扩增 | 第66-67页 |
| 3.2.4.2 Pe4cl2基因片段c DNA的序列 | 第67-69页 |
| 3.2.5 Pe4cl3基因片段的克隆 | 第69-72页 |
| 3.2.5.1 Pe4cl3基因片段的扩增 | 第69-70页 |
| 3.2.5.2 Pe4cl3基因片段c DNA的序列 | 第70-72页 |
| 3.2.6 Pe4cl4基因片段的克隆 | 第72-76页 |
| 3.2.6.1 Pe4cl4基因片段的扩增 | 第72-73页 |
| 3.2.6.2 Pe4cl4基因片段c DNA的序列 | 第73-76页 |
| 3.2.7 Pe Pod基因片段的克隆 | 第76-79页 |
| 3.2.7.1 Pe Pod基因片段的扩增 | 第76页 |
| 3.2.7.2 Pe Pod基因片段c DNA的序列 | 第76-79页 |
| 3.3 冷藏下木质化关键基因的荧光定量PCR分析 | 第79-84页 |
| 3.3.1 冷藏后杏鲍菇总RNA提取 | 第79-80页 |
| 3.3.2 q RT-PCR引物的检测 | 第80-82页 |
| 3.3.3 杏鲍菇冷藏期间木质化关键基因的表达分析 | 第82-84页 |
| 4 讨论与结论 | 第84-90页 |
| 4.1 杏鲍菇韧性增加 | 第84-85页 |
| 4.2 杏鲍菇木质素合成关键基因的克隆 | 第85-87页 |
| 4.3 低温贮藏下杏鲍菇木质素代谢关键酶基因表达分析 | 第87-88页 |
| 4.4 结论 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-104页 |
| 附录 | 第104页 |
