摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第11-17页 |
1.1 文献综述 | 第11-15页 |
1.1.1 斑节对虾卵巢发育研究现状 | 第11-12页 |
1.1.2 斑节对虾卵巢发育相关基因的研究进展 | 第12-13页 |
1.1.3 细胞周期蛋白依赖性激酶2的研究进展 | 第13-14页 |
1.1.4 p53基因的研究进展 | 第14-15页 |
1.2 研究目的、意义、内容及技术路线 | 第15-17页 |
1.2.1 研究目的与意义 | 第15-16页 |
1.2.2 主要研究内容 | 第16页 |
1.2.3 技术路线 | 第16-17页 |
第二章 斑节对虾细胞周期蛋白依赖性激酶2的克隆及功能分析 | 第17-42页 |
2.1 引言 | 第17页 |
2.2 实验材料 | 第17-21页 |
2.2.1 实验动物 | 第17-18页 |
2.2.2 主要化学试剂 | 第18-20页 |
2.2.3 实验菌种和质粒 | 第20页 |
2.2.4 实验仪器 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-30页 |
2.3.1 总RNA提取与c DNA合成 | 第21页 |
2.3.2 PmC DK2基因的克隆 | 第21-24页 |
2.3.3 PmC DK2基因的序列分析,多重比对分析和进化分析 | 第24页 |
2.3.4 PmC DK2基因在不同组织及卵巢发育各期的表达 | 第24-25页 |
2.3.5 PmC DK2基因的原核表达及蛋白纯化 | 第25-28页 |
2.3.6 PmC DK2/PmC yclinE的pull-down实验 | 第28-30页 |
2.4 实验结果 | 第30-39页 |
2.4.1 PmC DK2的cDNA序列特征 | 第30-35页 |
2.4.2 PmC DK2基因在不同组织及卵巢发育各期的表达分析 | 第35-37页 |
2.4.3 PmC DK2-pET21a在大肠杆菌中表达结果 | 第37-38页 |
2.4.4 PmC DK2/PmC yclinE的pull-down结果 | 第38-39页 |
2.5 分析讨论 | 第39-42页 |
第三章 斑节对虾p53基因的克隆及功能分析 | 第42-65页 |
3.1 引言 | 第42页 |
3.2 实验材料 | 第42-43页 |
3.2.1 实验动物 | 第42页 |
3.2.2 酶、化学试剂和试剂盒 | 第42页 |
3.2.3 实验菌种 | 第42-43页 |
3.3 实验方法 | 第43-51页 |
3.3.1 总RNA提取与c DNA合成 | 第43页 |
3.3.2 Pmp53基因的克隆 | 第43-45页 |
3.3.3 Pmp53基因的序列分析,多重比对分析和进化分析 | 第45页 |
3.3.4 Pmp53基因在不同组织及卵巢发育各期的表达 | 第45页 |
3.3.5 Pmp53基因双链RNA干扰试验 | 第45-50页 |
3.3.6 Pmp53基因 5-HT注射试验 | 第50-51页 |
3.3.7 Pmp53基因的原核表达 | 第51页 |
3.4 实验结果 | 第51-61页 |
3.4.1 Pmp53的cDNA序列特征 | 第51-56页 |
3.4.2 Pmp53基因在不同组织及卵巢发育各期的表达分析 | 第56-58页 |
3.4.3 Pmp53 mRNA和PmCDK2 mRNA在p53-dsRNA干扰之后的表达模式 | 第58-59页 |
3.4.4 Pmp53 mRN A和PmCDK2 mRNA在 5-HT刺激后的表达模式 | 第59-60页 |
3.4.5 Pmp53-pET21a在大肠杆菌中表达结果 | 第60-61页 |
3.5 分析讨论 | 第61-65页 |
总结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录 | 第72-74页 |
缩略词表 | 第72-73页 |
硕士期间发表论文及参加会议 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |