| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-23页 |
| 1.1 BMP家族基因研究概况 | 第16-18页 |
| 1.1.1 BMP家族基因概况 | 第16页 |
| 1.1.2 脊椎动物BMP家族基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.1.3 软体动物BMP家族基因的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2 软体动物贝壳形成 | 第18-21页 |
| 1.2.1 软体动物的贝壳 | 第18页 |
| 1.2.2 软体动物贝壳形成机理研究 | 第18-19页 |
| 1.2.3 贝壳形成中的钙代谢 | 第19-21页 |
| 1.3 合浦珠母贝的研究 | 第21页 |
| 1.4 本研究的目的意义、技术路线 | 第21-23页 |
| 1.4.1 本研究的目的意义 | 第21-22页 |
| 1.4.2 本研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 合浦珠母贝BMP3基因的克隆和功能初步研究 | 第23-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 实验用动物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 试验用菌株和质粒 | 第24页 |
| 2.1.3 试剂、培养基及配制方法 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-40页 |
| 2.2.1 试验用引物设计 | 第25-26页 |
| 2.2.2 RNA提取和cDNA合成 | 第26-27页 |
| 2.2.3 目的基因cDNA序列中间片段扩增 | 第27-28页 |
| 2.2.4 通过RACE获得目的基因全长cDNA序列 | 第28-33页 |
| 2.2.4.1 3' RACE | 第29-30页 |
| 2.2.4.2 5' RACE | 第30-33页 |
| 2.2.5 目的基因序列分析 | 第33-34页 |
| 2.2.6 Pf BMP3基因在不同发育时期和不同组织的表达分析 | 第34-35页 |
| 2.2.7 Pf BMP3基因的原位杂交分析 | 第35-36页 |
| 2.2.7.1 制备寡核苷酸探针 | 第35页 |
| 2.2.7.2 样品前处理 | 第35-36页 |
| 2.2.7.3 原位杂交 | 第36页 |
| 2.2.8 贝壳缺刻实验 | 第36页 |
| 2.2.9 养殖水体钙离子浓度对相关基因表达量的影响 | 第36页 |
| 2.2.10 Pf BMP3基因的RNA干扰实验 | 第36-40页 |
| 2.2.10.1 siRNA的设计 | 第37页 |
| 2.2.10.2 siRNA的制备 | 第37-39页 |
| 2.2.10.3 RNA干扰实验 | 第39-40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-51页 |
| 2.3.1 目的基因cDNA序列分析 | 第40-44页 |
| 2.3.2 Pf BMP3基因在不同发育时期和不同组织的表达结果 | 第44-45页 |
| 2.3.3 Pf BMP3基因的原位杂交实验结果 | 第45-47页 |
| 2.3.4 贝壳在缺刻处理后的形态变化和Pf BMP3的表达分析结果 | 第47-48页 |
| 2.3.5 养殖水体钙离子浓度对相关基因表达量的影响 | 第48-50页 |
| 2.3.6 Pf BMP3基因的RNA干扰实验结果 | 第50-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-55页 |
| 第三章 合浦珠母贝BMP10基因的克隆和功能初步研究 | 第55-63页 |
| 3.1 实验材料 | 第55页 |
| 3.2 试验方法 | 第55-57页 |
| 3.2.1 试验用引物设计 | 第55-56页 |
| 3.2.2 RNA提取和cDNA合成 | 第56页 |
| 3.2.3 目的基因cDNA序列中间片段扩增 | 第56页 |
| 3.2.4 通过RACE获得目的基因全长cDNA序列 | 第56页 |
| 3.2.5 目的基因序列分析 | 第56页 |
| 3.2.6 Pf BMP10基因在不同发育时期和不同组织的表达分析 | 第56页 |
| 3.2.7 贝壳缺刻实验 | 第56-57页 |
| 3.3 实验结果 | 第57-62页 |
| 3.3.1 目的基因cDNA序列分析 | 第57-60页 |
| 3.3.2 Pf BMP10基因在不同发育时期和不同组织的表达结果 | 第60-61页 |
| 3.3.3 贝壳在缺刻处理后的形态变化和Pf BMP10的表达分析 | 第61-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-63页 |
| 第四章 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 附录 硕士期间发表的论文和参加的会议 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
