中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 绪论 | 第13-24页 |
1. 炎症与炎症药物现状 | 第13-14页 |
2. 内毒素与炎症反应 | 第14-15页 |
3. 趋化因子及其受体与炎症反应 | 第15-17页 |
4. 来源于病毒性趋化因子蛋白vMIP-Ⅱ的N15P多肽 | 第17-20页 |
5. 本课题的主要研究内容以及研究意义 | 第20-22页 |
6. 技术路线 | 第22-24页 |
第二章 N15P多肽对体外内毒素炎症模型的作用 | 第24-78页 |
1. 前言 | 第24-25页 |
2. 实验材料与器材 | 第25-29页 |
·主要实验材料 | 第25-26页 |
·仪器设备 | 第26-27页 |
·主要试剂配制方法 | 第27-28页 |
·药品的配制 | 第28-29页 |
3. 实验方法 | 第29-39页 |
·多肽N15P的合成、纯化与检测 | 第29页 |
·外周血单核细胞(PBMC)的分离和培养 | 第29-30页 |
·细胞炎症模型的建立及验证 | 第30-32页 |
·N15P肽对细胞炎症模型炎性因子(TNF-a、IL-6、IL-8)影响 | 第32-35页 |
·NO分泌水平检测 | 第35页 |
·MTT 法检测 N15 多肽对 PBMC 细胞的毒性 | 第35-36页 |
·N15多肽对体外炎症模型的作用机制探讨 | 第36-39页 |
·western blot 检测炎性蛋白 NF-kB 表达的变化 | 第36-38页 |
·荧光定量 PCR 检测炎症介质 NF-kB、COX-2、TLR4、MyD88、PI3K、AKT mRNA含量的变化 | 第38-39页 |
·统计学分析 | 第39页 |
4. 实验结果 | 第39-73页 |
·N15P 多肽的合成及检测 | 第39-41页 |
·内毒素刺激细胞建立急性炎症模型的形态观察结果 | 第41-42页 |
·内毒素刺激细胞建立急性炎症模型的炎症因子蛋白含量变化 | 第42-47页 |
·N15P多肽对细胞炎性因子TNF-a、IL-6、IL-8的蛋白分泌情况影响 | 第47-51页 |
·N15P多肽对细胞炎性因子TNF-a、IL-6、IL-8的mRNA表达情况影响 | 第51-58页 |
·不同浓度 N15P 多肽对细胞上清液中 NO 分泌的影响 | 第58-60页 |
·MTT 法分析 N15P 多肽对 PBMC 细胞毒性 | 第60-61页 |
·western blot 检测细胞中炎症介质 NF-kB p65 蛋白表达的变化 | 第61-63页 |
·荧光定量法检测炎症介质(NF-kB、COX-2、TLR4、MyD88、PI3K、AKT)mRNA含量的变化 | 第63-73页 |
5. 讨论 | 第73-76页 |
·选择外周血单个核细胞(PBMC)作为细胞炎症模型的原因 | 第73页 |
·荧光定量PCR法在检测主要炎症因子及炎症介质mRNA的应用 | 第73-74页 |
·探讨N15P多肽对炎症反应中NO分泌的影响 | 第74页 |
·探讨N15P多肽对重要炎症介质(NF-kB、COX-2)的影响 | 第74-76页 |
·探讨N15P多肽对TLR4介导的两大炎症信号通路的影响 | 第76页 |
6. 第二章内容小结 | 第76-78页 |
第三章 N15P多肽对内毒素炎症小鼠的保护作用研究 | 第78-108页 |
1. 前言 | 第78页 |
2. 实验材料和器材 | 第78-79页 |
·主要实验材料 | 第78-79页 |
·主要仪器 | 第79页 |
·药品的配制 | 第79页 |
3.方法 | 第79-86页 |
·动物分组 | 第79-80页 |
·检测指标 | 第80-85页 |
·一般情况 | 第80页 |
·标本留取 | 第80页 |
·检测血常规和血液生化指标 | 第80页 |
·ELISA 检测血清细胞因子 | 第80页 |
·NO 分泌水平检测 | 第80-81页 |
·小鼠内脏器官组织切片的制作 | 第81-82页 |
·免疫组化染色观察 NF-KB P65 在肝组织的表达 | 第82-83页 |
·Western blot 检测 NF-kB P65 蛋白表达 | 第83页 |
·RT-PCR 检测肝组织炎症介质(NF-kB、COX-2、TLR4)mRNA 表达 | 第83-85页 |
·统计学分析 | 第85-86页 |
4. 实验结果 | 第86-104页 |
·各组小鼠的一般行为学及生存率观察 | 第86页 |
·各组小鼠的血液指标检测 | 第86-87页 |
·ELISA检测小鼠细胞因子(TNF-a、IL-6、IL-8)结果 | 第87-93页 |
·检测小鼠血清NO含量的结果 | 第93-95页 |
·小鼠肝脏以及肺部组织变化 | 第95-100页 |
·免疫组化法观察NF-KB P65在肝组织的表达情况 | 第100-102页 |
·western blot 检测肝组织中 NF-kB p65 蛋白表达变化 | 第102-103页 |
·RT-PCR 检测肝组织炎症介质(NF-kB、COX-2、TLR4)mRNA 表达 | 第103-104页 |
5. 讨论 | 第104-106页 |
·内毒素小鼠炎症模型的建立以及 N15P 多肽对小鼠的保护作用 | 第104-105页 |
·N15P多肽在内毒素小鼠炎症模型中作用机制的探讨 | 第105-106页 |
6. 第三章内容小结 | 第106-108页 |
全文总结及展望 | 第108-111页 |
参考文献 | 第111-120页 |
附录 | 第120-124页 |
附录1 英文缩略词简表 | 第120-121页 |
附录2 氨基酸缩写表 | 第121-122页 |
附录3 攻读博士学位期间论文及论著发表、课题情况 | 第122-124页 |
致谢 | 第124页 |