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CXCR4拮抗剂N15P多肽对内毒素炎症的作用效应及机制研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 绪论第13-24页
 1. 炎症与炎症药物现状第13-14页
 2. 内毒素与炎症反应第14-15页
 3. 趋化因子及其受体与炎症反应第15-17页
 4. 来源于病毒性趋化因子蛋白vMIP-Ⅱ的N15P多肽第17-20页
 5. 本课题的主要研究内容以及研究意义第20-22页
 6. 技术路线第22-24页
第二章 N15P多肽对体外内毒素炎症模型的作用第24-78页
 1. 前言第24-25页
 2. 实验材料与器材第25-29页
   ·主要实验材料第25-26页
   ·仪器设备第26-27页
   ·主要试剂配制方法第27-28页
   ·药品的配制第28-29页
 3. 实验方法第29-39页
   ·多肽N15P的合成、纯化与检测第29页
   ·外周血单核细胞(PBMC)的分离和培养第29-30页
   ·细胞炎症模型的建立及验证第30-32页
   ·N15P肽对细胞炎症模型炎性因子(TNF-a、IL-6、IL-8)影响第32-35页
   ·NO分泌水平检测第35页
   ·MTT 法检测 N15 多肽对 PBMC 细胞的毒性第35-36页
   ·N15多肽对体外炎症模型的作用机制探讨第36-39页
     ·western blot 检测炎性蛋白 NF-kB 表达的变化第36-38页
     ·荧光定量 PCR 检测炎症介质 NF-kB、COX-2、TLR4、MyD88、PI3K、AKT mRNA含量的变化第38-39页
   ·统计学分析第39页
 4. 实验结果第39-73页
   ·N15P 多肽的合成及检测第39-41页
   ·内毒素刺激细胞建立急性炎症模型的形态观察结果第41-42页
   ·内毒素刺激细胞建立急性炎症模型的炎症因子蛋白含量变化第42-47页
   ·N15P多肽对细胞炎性因子TNF-a、IL-6、IL-8的蛋白分泌情况影响第47-51页
   ·N15P多肽对细胞炎性因子TNF-a、IL-6、IL-8的mRNA表达情况影响第51-58页
   ·不同浓度 N15P 多肽对细胞上清液中 NO 分泌的影响第58-60页
   ·MTT 法分析 N15P 多肽对 PBMC 细胞毒性第60-61页
   ·western blot 检测细胞中炎症介质 NF-kB p65 蛋白表达的变化第61-63页
   ·荧光定量法检测炎症介质(NF-kB、COX-2、TLR4、MyD88、PI3K、AKT)mRNA含量的变化第63-73页
 5. 讨论第73-76页
   ·选择外周血单个核细胞(PBMC)作为细胞炎症模型的原因第73页
   ·荧光定量PCR法在检测主要炎症因子及炎症介质mRNA的应用第73-74页
   ·探讨N15P多肽对炎症反应中NO分泌的影响第74页
   ·探讨N15P多肽对重要炎症介质(NF-kB、COX-2)的影响第74-76页
   ·探讨N15P多肽对TLR4介导的两大炎症信号通路的影响第76页
 6. 第二章内容小结第76-78页
第三章 N15P多肽对内毒素炎症小鼠的保护作用研究第78-108页
 1. 前言第78页
 2. 实验材料和器材第78-79页
   ·主要实验材料第78-79页
   ·主要仪器第79页
   ·药品的配制第79页
 3.方法第79-86页
   ·动物分组第79-80页
   ·检测指标第80-85页
     ·一般情况第80页
     ·标本留取第80页
     ·检测血常规和血液生化指标第80页
     ·ELISA 检测血清细胞因子第80页
     ·NO 分泌水平检测第80-81页
     ·小鼠内脏器官组织切片的制作第81-82页
     ·免疫组化染色观察 NF-KB P65 在肝组织的表达第82-83页
     ·Western blot 检测 NF-kB P65 蛋白表达第83页
     ·RT-PCR 检测肝组织炎症介质(NF-kB、COX-2、TLR4)mRNA 表达第83-85页
   ·统计学分析第85-86页
 4. 实验结果第86-104页
   ·各组小鼠的一般行为学及生存率观察第86页
   ·各组小鼠的血液指标检测第86-87页
   ·ELISA检测小鼠细胞因子(TNF-a、IL-6、IL-8)结果第87-93页
   ·检测小鼠血清NO含量的结果第93-95页
   ·小鼠肝脏以及肺部组织变化第95-100页
   ·免疫组化法观察NF-KB P65在肝组织的表达情况第100-102页
   ·western blot 检测肝组织中 NF-kB p65 蛋白表达变化第102-103页
   ·RT-PCR 检测肝组织炎症介质(NF-kB、COX-2、TLR4)mRNA 表达第103-104页
 5. 讨论第104-106页
   ·内毒素小鼠炎症模型的建立以及 N15P 多肽对小鼠的保护作用第104-105页
   ·N15P多肽在内毒素小鼠炎症模型中作用机制的探讨第105-106页
 6. 第三章内容小结第106-108页
全文总结及展望第108-111页
参考文献第111-120页
附录第120-124页
 附录1 英文缩略词简表第120-121页
 附录2 氨基酸缩写表第121-122页
 附录3 攻读博士学位期间论文及论著发表、课题情况第122-124页
致谢第124页

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