摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
中英文对照和缩略词表 | 第16-17页 |
第一章 绪论 | 第17-39页 |
·引言 | 第17页 |
·细胞死亡 | 第17-27页 |
·细胞死亡分类 | 第17-20页 |
·细胞死亡通路 | 第20-24页 |
·细胞死亡研究方法 | 第24-27页 |
·CELL-IN-CELL | 第27-32页 |
·Cell-in-cell 的定义与分类 | 第27-28页 |
·Cell-in-cell 的生物学过程 | 第28-29页 |
·Cell-in-cell 现象的生物学意义 | 第29-32页 |
·CELL-IN-CELL 中细胞死亡 | 第32-36页 |
·Cell-in-cell 细胞胞内死亡及其特征 | 第32-33页 |
·Cell-in-cell 细胞胞内死亡的通路及机制 | 第33-36页 |
·本课题的目的意义和研究内容 | 第36-39页 |
·目的意义 | 第36-37页 |
·研究内容 | 第37-39页 |
第二章 免疫细胞与肿瘤细胞 CELL-IN-CELL 细胞胞内死亡的特征 | 第39-56页 |
·引言 | 第39页 |
·材料与方法 | 第39-44页 |
·实验材料 | 第39-40页 |
·细胞培养方法 | 第40页 |
·细胞 cell-in-cell 的统计 | 第40-41页 |
·Celltracker red/green 活细胞荧光标记 | 第41页 |
·活细胞观察 | 第41页 |
·TUNEL | 第41-42页 |
·内部细胞死亡动态统计 | 第42页 |
·免疫荧光 | 第42-43页 |
·溶酶体特征标记方法 | 第43页 |
·LDH 法测细胞杀伤 | 第43-44页 |
·透射电镜标本制备 | 第44页 |
·结果和讨论 | 第44-54页 |
·Cell-in-cell 现象可以广泛发生于各类细胞相互作用中 | 第44-45页 |
·Cell-in-cell 细胞胞内死亡是 cell-in-cell 的主要命运 | 第45-49页 |
·Entosis 在同质细胞内和异质细胞间均发生 | 第49-53页 |
·免疫细胞在肿瘤细胞内不同死亡方式的发生可能与细胞本身的杀伤活性有关 | 第53-54页 |
·本章小结 | 第54-56页 |
第三章 ENTOSIS 并非细胞选择性的 | 第56-70页 |
·引言 | 第56页 |
·材料与方法 | 第56-60页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·检测细胞内 caspase3 基因的缺陷 | 第57-58页 |
·免疫印迹(western blot) | 第58-59页 |
·DNA 片段化检测(DNA ladder) | 第59页 |
·细胞周期 | 第59-60页 |
·TUNEL 检测细胞死亡 | 第60页 |
·免疫荧光 | 第60页 |
·溶酶体死亡特征检测 | 第60页 |
·透射电镜样本制作 | 第60页 |
·结果与讨论 | 第60-69页 |
·MCF7 细胞株的 caspase3 基因缺陷 | 第60-63页 |
·缺失 caspase3 的表达导致 MCF7 细胞不能被诱导凋亡 | 第63-65页 |
·MCF7 与其他肿瘤细胞均发生溶酶体样 cell-in-cell 胞内死亡 | 第65-69页 |
·本章小结 | 第69-70页 |
第四章 ENTOSIS 的细胞胞内死亡机理研究 | 第70-83页 |
·引言 | 第70页 |
·材料与方法 | 第70-72页 |
·实验材料 | 第70-71页 |
·细胞内细胞色素 C 释放 | 第71页 |
·细胞内 ROS 的检测 | 第71-72页 |
·TUNEL 检测细胞死亡 | 第72页 |
·免疫荧光 | 第72页 |
·溶酶体死亡特征检测 | 第72页 |
·透射电镜样本制作 | 第72页 |
·结果与讨论 | 第72-81页 |
·Entosis 是类似自噬过程 | 第72-76页 |
·Entosis 可以转换为 emtosis,而 MCF7 例外 | 第76-78页 |
·非杀伤性细胞 cell-in-cell 后内部凋亡信号 | 第78-81页 |
·本章小结 | 第81-83页 |
第五章 EMTOSIS 细胞胞内死亡机理研究 | 第83-103页 |
·引言 | 第83页 |
·材料与方法 | 第83-86页 |
·实验材料 | 第83-84页 |
·磁珠分选细胞 | 第84-85页 |
·流式检测分选细胞纯度 | 第85页 |
·CCK8 测细胞毒性 | 第85页 |
·小鼠脾脏 LAK 细胞的分离 | 第85-86页 |
·TUNEL 检测细胞死亡 | 第86页 |
·免疫荧光 | 第86页 |
·溶酶体死亡特征检测 | 第86页 |
·免疫印迹 | 第86页 |
·结果与讨论 | 第86-100页 |
·各淋巴细胞亚群都能发生 cell-in-cell 现象 | 第86-89页 |
·各淋巴细胞亚群的 cell-in-cell 胞内死亡方式不同 | 第89-91页 |
·免疫细胞的 emtosis 与细胞内杀伤因子颗粒酶 B 的表达有关 | 第91-93页 |
·颗粒酶 B 的释放在免疫细胞与肿瘤细胞的 cell-in-cell 细胞死亡有重要作用 | 第93-95页 |
·颗粒酶 B 的抑制剂能抑制 emtosis | 第95-96页 |
·非细胞毒性淋巴细胞的 emtosis 与细胞毒性淋巴细胞的 emtosis 不同通路 | 第96-97页 |
·颗粒酶 B 缺陷的杀伤细胞的 emtosis 延迟发生 | 第97-99页 |
·杀伤细胞内还有其他因素启动 emtosis 的发生 | 第99-100页 |
·本章小结 | 第100-103页 |
第六章 细胞 CELL-IN-CELL 的其他命运及体内生物学意义 | 第103-115页 |
·引言 | 第103页 |
·材料与方法 | 第103-107页 |
·实验材料 | 第103-104页 |
·小鼠 polyI:C/D-GalN 诱导肝脏损伤模型的建立[119] | 第104-105页 |
·HE 染色方法 | 第105页 |
·免疫组化方法 | 第105-106页 |
·血清转氨酶 ALT,AST 检测 | 第106-107页 |
·免疫荧光 | 第107页 |
·结果和讨论 | 第107-113页 |
·免疫细胞与肿瘤细胞发生 cell-in-cell 可导致外部肿瘤细胞异倍体产生 | 第107-108页 |
·体内肿瘤组织发生的 cell-in-cell | 第108-111页 |
·体内炎症组织发生的 cell-in-cell 现象 | 第111-113页 |
·本章小结 | 第113-115页 |
结论与展望 | 第115-118页 |
结论 | 第115-116页 |
1. Cell-in-cell 后胞内死亡方式的分类 | 第115页 |
2. Entosis 的死亡机制 | 第115-116页 |
3. Emtosis 的死亡机制 | 第116页 |
4. 体内 cell-in-cell 及胞内细胞死亡的生物学意义 | 第116页 |
创新性成果 | 第116-117页 |
展望 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-127页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第127-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
附件 | 第130页 |