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免疫细胞细胞胞内死亡特征及机制研究

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
中英文对照和缩略词表第16-17页
第一章 绪论第17-39页
   ·引言第17页
   ·细胞死亡第17-27页
     ·细胞死亡分类第17-20页
     ·细胞死亡通路第20-24页
     ·细胞死亡研究方法第24-27页
   ·CELL-IN-CELL第27-32页
     ·Cell-in-cell 的定义与分类第27-28页
     ·Cell-in-cell 的生物学过程第28-29页
     ·Cell-in-cell 现象的生物学意义第29-32页
   ·CELL-IN-CELL 中细胞死亡第32-36页
     ·Cell-in-cell 细胞胞内死亡及其特征第32-33页
     ·Cell-in-cell 细胞胞内死亡的通路及机制第33-36页
   ·本课题的目的意义和研究内容第36-39页
     ·目的意义第36-37页
     ·研究内容第37-39页
第二章 免疫细胞与肿瘤细胞 CELL-IN-CELL 细胞胞内死亡的特征第39-56页
   ·引言第39页
   ·材料与方法第39-44页
     ·实验材料第39-40页
     ·细胞培养方法第40页
     ·细胞 cell-in-cell 的统计第40-41页
     ·Celltracker red/green 活细胞荧光标记第41页
     ·活细胞观察第41页
     ·TUNEL第41-42页
     ·内部细胞死亡动态统计第42页
     ·免疫荧光第42-43页
     ·溶酶体特征标记方法第43页
     ·LDH 法测细胞杀伤第43-44页
     ·透射电镜标本制备第44页
   ·结果和讨论第44-54页
     ·Cell-in-cell 现象可以广泛发生于各类细胞相互作用中第44-45页
     ·Cell-in-cell 细胞胞内死亡是 cell-in-cell 的主要命运第45-49页
     ·Entosis 在同质细胞内和异质细胞间均发生第49-53页
     ·免疫细胞在肿瘤细胞内不同死亡方式的发生可能与细胞本身的杀伤活性有关第53-54页
   ·本章小结第54-56页
第三章 ENTOSIS 并非细胞选择性的第56-70页
   ·引言第56页
   ·材料与方法第56-60页
     ·实验材料第56-57页
     ·检测细胞内 caspase3 基因的缺陷第57-58页
     ·免疫印迹(western blot)第58-59页
     ·DNA 片段化检测(DNA ladder)第59页
     ·细胞周期第59-60页
     ·TUNEL 检测细胞死亡第60页
     ·免疫荧光第60页
     ·溶酶体死亡特征检测第60页
     ·透射电镜样本制作第60页
   ·结果与讨论第60-69页
     ·MCF7 细胞株的 caspase3 基因缺陷第60-63页
     ·缺失 caspase3 的表达导致 MCF7 细胞不能被诱导凋亡第63-65页
     ·MCF7 与其他肿瘤细胞均发生溶酶体样 cell-in-cell 胞内死亡第65-69页
   ·本章小结第69-70页
第四章 ENTOSIS 的细胞胞内死亡机理研究第70-83页
   ·引言第70页
   ·材料与方法第70-72页
     ·实验材料第70-71页
     ·细胞内细胞色素 C 释放第71页
     ·细胞内 ROS 的检测第71-72页
     ·TUNEL 检测细胞死亡第72页
     ·免疫荧光第72页
     ·溶酶体死亡特征检测第72页
     ·透射电镜样本制作第72页
   ·结果与讨论第72-81页
     ·Entosis 是类似自噬过程第72-76页
     ·Entosis 可以转换为 emtosis,而 MCF7 例外第76-78页
     ·非杀伤性细胞 cell-in-cell 后内部凋亡信号第78-81页
   ·本章小结第81-83页
第五章 EMTOSIS 细胞胞内死亡机理研究第83-103页
   ·引言第83页
   ·材料与方法第83-86页
     ·实验材料第83-84页
     ·磁珠分选细胞第84-85页
     ·流式检测分选细胞纯度第85页
     ·CCK8 测细胞毒性第85页
     ·小鼠脾脏 LAK 细胞的分离第85-86页
     ·TUNEL 检测细胞死亡第86页
     ·免疫荧光第86页
     ·溶酶体死亡特征检测第86页
     ·免疫印迹第86页
   ·结果与讨论第86-100页
     ·各淋巴细胞亚群都能发生 cell-in-cell 现象第86-89页
     ·各淋巴细胞亚群的 cell-in-cell 胞内死亡方式不同第89-91页
     ·免疫细胞的 emtosis 与细胞内杀伤因子颗粒酶 B 的表达有关第91-93页
     ·颗粒酶 B 的释放在免疫细胞与肿瘤细胞的 cell-in-cell 细胞死亡有重要作用第93-95页
     ·颗粒酶 B 的抑制剂能抑制 emtosis第95-96页
     ·非细胞毒性淋巴细胞的 emtosis 与细胞毒性淋巴细胞的 emtosis 不同通路第96-97页
     ·颗粒酶 B 缺陷的杀伤细胞的 emtosis 延迟发生第97-99页
     ·杀伤细胞内还有其他因素启动 emtosis 的发生第99-100页
   ·本章小结第100-103页
第六章 细胞 CELL-IN-CELL 的其他命运及体内生物学意义第103-115页
   ·引言第103页
   ·材料与方法第103-107页
     ·实验材料第103-104页
     ·小鼠 polyI:C/D-GalN 诱导肝脏损伤模型的建立[119]第104-105页
     ·HE 染色方法第105页
     ·免疫组化方法第105-106页
     ·血清转氨酶 ALT,AST 检测第106-107页
     ·免疫荧光第107页
   ·结果和讨论第107-113页
     ·免疫细胞与肿瘤细胞发生 cell-in-cell 可导致外部肿瘤细胞异倍体产生第107-108页
     ·体内肿瘤组织发生的 cell-in-cell第108-111页
     ·体内炎症组织发生的 cell-in-cell 现象第111-113页
   ·本章小结第113-115页
结论与展望第115-118页
 结论第115-116页
  1. Cell-in-cell 后胞内死亡方式的分类第115页
  2. Entosis 的死亡机制第115-116页
  3. Emtosis 的死亡机制第116页
  4. 体内 cell-in-cell 及胞内细胞死亡的生物学意义第116页
 创新性成果第116-117页
 展望第117-118页
参考文献第118-127页
攻读博士学位期间取得的研究成果第127-129页
致谢第129-130页
附件第130页

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