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黄瓜低霜霉威残留性相关基因CsDIR16的鉴定及功能分析

摘要第9-11页
英文摘要第11-12页
1 前言第13-31页
    1.1 研究的目的和意义第13-14页
    1.2 国内外研究进展第14-29页
        1.2.1 农药残留的问题与现状第14-18页
        1.2.2 霜霉威残留量与黄瓜种质资源和遗传属性之间的关系第18-20页
        1.2.3 霜霉威残留与积极响应其胁迫的基因之间的关系第20-22页
        1.2.4 DIR基因的研究进展第22-26页
        1.2.5 黄瓜转基因技术现状第26-28页
        1.2.6 存在的问题及思路第28-29页
    1.3 研究内容和技术路线第29-31页
        1.3.1 研究内容第29-30页
        1.3.2 技术路线第30-31页
2 材料与方法第31-47页
    2.1 试验材料与设备第31-33页
        2.1.1 试验材料第31页
        2.1.2 主要仪器设备与试剂第31-33页
    2.2 试验方法第33-47页
        2.2.1 黄瓜霜霉威残留相关基因的筛选第33-36页
        2.2.2 CsDIR16全长的克隆、测序及生物信息学分析第36-39页
        2.2.3 CsDIR16表达模式分析第39页
        2.2.4 CsDIR16的亚细胞定位第39-41页
        2.2.5 CsDIR16植物表达载体构建第41-42页
        2.2.6 子叶节侵染法将pCXSN-CsDIR16(±)转入黄瓜第42-44页
        2.2.7 CsDIR16的功能验证第44-47页
3 结果与分析第47-82页
    3.1 霜霉威胁迫下差异基因的筛选第47-50页
        3.1.1 响应霜霉威胁迫差异表达基因的功能比对第47-48页
        3.1.2 实时荧光定量qRT-PCR测定第48-50页
    3.2 CsDIR16的克隆及生物信息学分析第50-60页
        3.2.1 CsDIR16编码区全长的获得第50-51页
        3.2.2 CsDIR16编码蛋白的性质及结构预测第51-54页
        3.2.3 CsDIR家族蛋白及系统进化分析第54-60页
    3.3 CsDIR16表达模式分析第60-63页
        3.3.1 霜霉威胁迫下黄瓜果皮中CsDIR16表达模式分析第60-61页
        3.3.2 霜霉威胁迫下CsDIR16在黄瓜其他组织中的表达分析第61-62页
        3.3.3 其他逆境胁迫和激素诱导下CsDIR16的表达模式分析第62-63页
    3.4 CsDIR16的亚细胞定位第63-65页
        3.4.1 CsDIR16-pGII-EGFP融合表达载体的鉴定第63-64页
        3.4.2 拟南芥原生质体中的定位与分析第64-65页
    3.5 CsDIR16植物表达载体构建第65-66页
        3.5.1 pCXSN-CsDIR16植物表达载体的构键第65-66页
        3.5.2 pCXSN-CsDIR16表达载体导入农杆菌验证第66页
    3.6 pCXSN-CsDIR16的遗传转化第66-69页
        3.6.1 草甘膦抗压的筛选第66-68页
        3.6.2 Cs DIR16对黄瓜的遗传转化第68页
        3.6.3 转CsDIR16黄瓜T0代的鉴定第68-69页
    3.7 CsDIR16基因的功能验证第69-82页
        3.7.1 转CsDIR16黄瓜T0代的表达分析第69-70页
        3.7.2 转CsDIR16黄瓜T0农药残留量检测第70-71页
        3.7.3 转CsDIR16黄瓜T1代的鉴定第71-72页
        3.7.4 转CsDIR16黄瓜T1代的表达分析第72-73页
        3.7.5 转CsDIR16黄瓜T1农药残留量检测第73-74页
        3.7.6 转CsDIR16黄瓜T1代生理生化指标分析第74-82页
4 讨论第82-89页
    4.1 响应霜霉威胁迫的相关基因CsDIR16第82-83页
    4.2 CsDIR16中突变位点的影响第83页
    4.3 CsDIR16受霜霉威胁迫的响应模式第83-84页
    4.4 CsDIR16启动子中的顺式元件第84页
    4.5 CsDIR16对黄瓜的遗传转化第84-85页
    4.6 转CsDIR16植株霜霉威残留量及受霜霉威胁迫生理生化指标的关系第85-86页
    4.7 CsDIR16对霜霉威代谢路径解析第86-87页
    4.8 本研究的创新与不足第87-89页
        4.8.1 本研究的创新之处第87页
        4.8.2 本研究的不足之处第87-89页
5 结论第89-90页
致谢第90-91页
参考文献第91-99页
附录第99-105页
攻读博士学位期间发表的学术论文第105页

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