| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-35页 |
| 1.1 结核杆菌及结核病研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1.1 结核杆菌 | 第15-16页 |
| 1.1.2 结核病发病机制 | 第16-18页 |
| 1.1.3 结核病诊断 | 第18-19页 |
| 1.2 结核分枝杆菌与巨噬细胞相互作用 | 第19-22页 |
| 1.2.1 结核分枝杆菌感染引起巨噬细胞信号转导 | 第19-21页 |
| 1.2.2 结核分枝杆菌感染引起巨噬细胞凋亡和坏死 | 第21-22页 |
| 1.3 病原菌诱导巨噬细胞凋亡研究 | 第22-25页 |
| 1.3.1 线粒体介导的细胞凋亡 | 第22-24页 |
| 1.3.2 CD95/CD95L介导的细胞凋亡 | 第24-25页 |
| 1.4 JAK/STAT信号通路研究进展 | 第25-32页 |
| 1.4.1 JAK/STAT通路 | 第25-26页 |
| 1.4.2 JAK/STAT通路在免疫应答中的作用 | 第26-29页 |
| 1.4.3 抑制JAK/STAT通路影响免疫逃逸 | 第29-31页 |
| 1.4.4 非磷酸化STAT的研究进展 | 第31-32页 |
| 1.5 eEF1A促进细胞凋亡 | 第32-34页 |
| 1.5.1 eEF1A参与细胞蛋白翻译 | 第32-33页 |
| 1.5.2 eEF1A参与到细胞凋亡的研究进展 | 第33-34页 |
| 1.6 本研究的内容和意义 | 第34-35页 |
| 第二章 感染早期磷酸化STAT1诱导巨噬细胞凋亡 | 第35-43页 |
| 2.1 材料和方法 | 第35-40页 |
| 2.1.1 材料 | 第35页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.3 主要仪器与耗材 | 第36页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第36-37页 |
| 2.1.5 细胞培养 | 第37页 |
| 2.1.6 攻菌实验 | 第37页 |
| 2.1.7 免疫印迹 | 第37-38页 |
| 2.1.8 测定肿瘤坏死因子（Tnf-α）表达水平 | 第38-39页 |
| 2.1.9 测定激活型Caspase-3 表达 | 第39页 |
| 2.1.10 细胞凋亡测定 | 第39-40页 |
| 2.2 结果 | 第40-41页 |
| 2.2.1 攻菌早期细胞内磷酸化STAT1表达量测定分析（1 小时内） | 第40页 |
| 2.2.2 攻菌早期细胞内促凋亡因子的表达量测定 | 第40-41页 |
| 2.2.3 STAT1磷酸化促进结核杆菌诱导的巨噬细胞凋亡 | 第41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-42页 |
| 2.4 结论 | 第42-43页 |
| 第三章 感染后期非磷酸化STAT1抑制巨噬细胞凋亡 | 第43-60页 |
| 3.1 材料和方法 | 第43-49页 |
| 3.1.1 材料 | 第43-44页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第44页 |
| 3.1.3 主要仪器与耗材 | 第44页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第44-45页 |
| 3.1.5 细胞培养 | 第45-46页 |
| 3.1.6 攻菌实验 | 第46页 |
| 3.1.7 免疫印迹 | 第46页 |
| 3.1.8 CFU测定 | 第46-47页 |
| 3.1.9 载体构建 | 第47页 |
| 3.1.10 细胞转染 | 第47页 |
| 3.1.11 质粒稳定转染巨噬细胞系构建 | 第47页 |
| 3.1.12 共聚焦免疫荧光蛋白定位分析 | 第47-48页 |
| 3.1.13 凋亡测定 | 第48页 |
| 3.1.14 下游基因定量验证 | 第48-49页 |
| 3.1.15 细胞表面蛋白表达量分析 | 第49页 |
| 3.1.16 核质蛋白及线粒体蛋白分离 | 第49页 |
| 3.2 结果 | 第49-57页 |
| 3.2.1 攻菌后细胞内STAT1蛋白表达量分析 | 第49-50页 |
| 3.2.2 攻菌后细胞内CFU测定分析 | 第50页 |
| 3.2.3 慢病毒表达载体构建 | 第50-51页 |
| 3.2.4 稳定表达非磷酸化STAT1的巨噬细胞系构建 | 第51-52页 |
| 3.2.5 攻菌后非磷酸化STAT1细胞内定位变化 | 第52-53页 |
| 3.2.6 非磷酸化STAT1影响攻菌后巨噬细胞凋亡率及胞内活菌数 | 第53-54页 |
| 3.2.7 非磷酸化STAT1调控巨噬细胞下游免疫相关基因表达 | 第54-55页 |
| 3.2.8 非磷酸化STAT1下调巨噬细胞表面CD95表达水平 | 第55页 |
| 3.2.9 非磷酸化STAT1抑制CD95/CD95L通路诱导的细胞凋亡 | 第55-56页 |
| 3.2.10 非磷酸化STAT1不影响CD95L的表达 | 第56页 |
| 3.2.11 非磷酸化STAT1影响攻菌后巨噬细胞内Caspase-3 的剪切，细胞色素c的释放及Mcl-1 的表达 | 第56-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-58页 |
| 3.4 结论 | 第58-60页 |
| 第四章 非磷酸化STAT1相互作用蛋白组研究 | 第60-78页 |
| 4.1 材料和方法 | 第60-66页 |
| 4.1.1 材料 | 第60页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第60-61页 |
| 4.1.3 主要仪器与耗材 | 第61页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第61-62页 |
| 4.1.5 细胞培养 | 第62页 |
| 4.1.6 BL21细菌基因组DNA提取 | 第62-63页 |
| 4.1.7 载体构建 | 第63页 |
| 4.1.8 细胞转染 | 第63页 |
| 4.1.9 生物素化质粒稳定转染巨噬细胞系构建 | 第63-64页 |
| 4.1.10 免疫印迹 | 第64页 |
| 4.1.11 亲和纯化富集非磷酸化STAT1蛋白复合体 | 第64-65页 |
| 4.1.12 质谱 | 第65页 |
| 4.1.13 相互作用蛋白验证 | 第65-66页 |
| 4.1.14 非磷酸化STAT1相互作用蛋白功能注释 | 第66页 |
| 4.1.15 蛋白质相互作用网络构建 | 第66页 |
| 4.2 结果 | 第66-76页 |
| 4.2.1 慢病毒表达载体构建 | 第66-67页 |
| 4.2.2 稳定表达生物素化非磷酸化STAT1的巨噬细胞系构建 | 第67页 |
| 4.2.3 链亲和素介导的亲和纯化分离非磷酸化STAT1蛋白复合物 | 第67-68页 |
| 4.2.4 质谱鉴定非磷酸化STAT1蛋白复合物 | 第68-74页 |
| 4.2.5 非磷酸化STAT1相互作用蛋白验证 | 第74页 |
| 4.2.6 非磷酸化STAT1相互作用蛋白功能注释 | 第74-75页 |
| 4.2.7 非磷酸化STAT1相互作用蛋白网络 | 第75-76页 |
| 4.3 讨论 | 第76-77页 |
| 4.4 结论 | 第77-78页 |
| 第五章 非磷酸化STAT1与STAT3复合物通过抑制CD95表达降低结核杆菌诱导的细胞凋亡 | 第78-88页 |
| 5.1 材料和方法 | 第78-82页 |
| 5.1.1 材料 | 第78页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第78-79页 |
| 5.1.3 主要仪器与耗材 | 第79页 |
| 5.1.4 溶液配制 | 第79-80页 |
| 5.1.5 攻菌实验 | 第80页 |
| 5.1.6 RNA干扰实验 | 第80页 |
| 5.1.7 实时定量PCR | 第80-81页 |
| 5.1.8 细胞表面蛋白表达量分析 | 第81页 |
| 5.1.9 凋亡测定 | 第81页 |
| 5.1.10 预测小鼠CD95启动子核心区域 | 第81页 |
| 5.1.11 染色质免疫共沉淀 | 第81-82页 |
| 5.2 结果 | 第82-86页 |
| 5.2.1 miRNA干扰STAT1，STAT3表达鉴定 | 第82-83页 |
| 5.2.2 攻菌后干扰STAT1，STAT3影响巨噬细胞表面CD95的表达及凋亡 | 第83-84页 |
| 5.2.3 小鼠CD95的启动子核心区域的鉴定 | 第84-85页 |
| 5.2.4 STAT1/STAT3复合体结合在CD95的启动子核心区域 | 第85-86页 |
| 5.3 讨论 | 第86页 |
| 5.4 结论 | 第86-88页 |
| 第六章 非磷酸化STAT1/eEF1A复合物抑制结核杆菌诱导的细胞凋亡 | 第88-96页 |
| 6.1 材料和方法 | 第88-92页 |
| 6.1.1 材料 | 第88页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第88-89页 |
| 6.1.3 主要仪器与耗材 | 第89页 |
| 6.1.4 溶液配制 | 第89-90页 |
| 6.1.5 攻菌实验 | 第90页 |
| 6.1.6 载体构建 | 第90页 |
| 6.1.7 细胞转染 | 第90页 |
| 6.1.8 蛋白免疫共沉淀 | 第90-91页 |
| 6.1.9 免疫印迹 | 第91-92页 |
| 6.2 结果 | 第92-94页 |
| 6.2.1 攻菌后IFIT1，eEF1A在巨噬细胞的表达升高 | 第92页 |
| 6.2.2 IFIT1真核表达载体构建 | 第92-93页 |
| 6.2.3 蛋白免疫共沉淀 | 第93页 |
| 6.2.4 非磷酸化STAT1竞争性结合，抑制凋亡复合物IFIT1/eEF1A的形成 | 第93-94页 |
| 6.3 讨论 | 第94-95页 |
| 6.4 结论 | 第95-96页 |
| 全文结论 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-117页 |
| 附录 | 第117-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 个人简介 | 第124页 |
