中文摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
1 前言 | 第15-26页 |
1.1 传染性法氏囊病病毒VP2研究进展 | 第15-17页 |
1.1.1 传染性法氏囊病病毒简介 | 第15页 |
1.1.2 传染性法氏囊病毒VP2疫苗研究现状 | 第15-16页 |
1.1.3 IBDV VP2蛋白在不同表达系统的表达 | 第16-17页 |
1.2 禽源IgY抗体Fc片段研究进展 | 第17-20页 |
1.2.1 禽源IgY抗体在进化上的地位 | 第17页 |
1.2.2 禽源IgY的结构及与相关受体相互作用的研究 | 第17-19页 |
1.2.3 IgY的沉淀和凝集反应特性 | 第19页 |
1.2.4 IgY-Fc受体的研究 | 第19-20页 |
1.3 蛋白表达系统的选择 | 第20-22页 |
1.3.1 毕赤酵母简介 | 第20-22页 |
1.3.2 毕赤酵母诱导表达 | 第22页 |
1.4 泰山松花粉多糖的研究概况 | 第22-25页 |
1.4.1 多糖的研究概况 | 第22-23页 |
1.4.2 多糖的生物学活性 | 第23-24页 |
1.4.2.1 免疫药理作用 | 第23页 |
1.4.2.2 抗病毒活性 | 第23-24页 |
1.4.2.3 抗肿瘤活性 | 第24页 |
1.4.2.4 其它生物学活性 | 第24页 |
1.4.3 松花粉多糖的研究进展 | 第24-25页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
2 材料和方法 | 第26-36页 |
2.1 菌株和细胞 | 第26页 |
2.2 试剂和仪器 | 第26-27页 |
2.3 VP2-Fc融合基因毕赤酵母重组阳性转化子的构建 | 第27-32页 |
2.3.1 VP2-Fc融合基因的PCR扩增 | 第27-30页 |
2.3.2 VP2-Fc融合基因的克隆与测序 | 第30页 |
2.3.3 pPIC9-VP2-Fc重组表达载体的构建 | 第30-31页 |
2.3.4 pPIC9-VP2-Fc质粒线性化 | 第31页 |
2.3.5 毕赤酵母阳性转化子的构建 | 第31-32页 |
2.4 VP2-Fc融合蛋白诱导表达、鉴定及纯化 | 第32-34页 |
2.4.1 融合蛋白的表达与获取 | 第32-33页 |
2.4.2 重组蛋白的SDS-PAGE分析和Western Blot鉴定 | 第33-34页 |
2.5 融合蛋白及TPPPS佐剂对融合蛋白的免疫增强效果的研究 | 第34-36页 |
2.5.1 疫苗制备 | 第34页 |
2.5.2 动物试验 | 第34-35页 |
2.5.3 融合蛋白及TPPPS佐剂对雏鸡体内免疫反应的影响 | 第35-36页 |
2.5.3.1 血清抗体效价的测定 | 第35页 |
2.5.3.2 血清IL-2 和IL-4 分泌量的测定 | 第35页 |
2.5.3.3 血清IFN-γ分泌量的测定 | 第35页 |
2.5.3.4 外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞含量的测定 | 第35页 |
2.5.3.5 T淋巴细胞转化率的测定 | 第35-36页 |
2.5.4 数据分析 | 第36页 |
3 结果与分析 | 第36-46页 |
3.1 VP2-Fc融合基因毕赤酵母阳性转化子的构建 | 第36-39页 |
3.2 VP2-Fc融合蛋白的表达与鉴定 | 第39-40页 |
3.3 融合蛋白及TPPPS佐剂对雏鸡细胞及体液免疫增强作用的研究 | 第40-46页 |
3.3.1 融合蛋白及TPPPS佐剂对免疫雏鸡血清抗体效价的影响 | 第40-41页 |
3.3.2 融合蛋白及TPPPS佐剂对免疫雏鸡血清细胞因子分泌的影响 | 第41-43页 |
3.3.3 融合蛋白及TPPPS佐剂对免疫雏鸡外周血CD4+、CD8+淋巴细胞数的影响 | 第43页 |
3.3.4 融合蛋白及TPPPS对免疫雏鸡外周血淋巴细胞转化率的影响 | 第43-44页 |
3.3.5 免疫保护性试验 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
个人简介 | 第58页 |