| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 绪论 | 第13-18页 |
| 1.1 有机磷农药的概述 | 第13页 |
| 1.2 有机磷农药结构 | 第13-14页 |
| 1.3 有机磷农药引发的问题 | 第14页 |
| 1.4 有机磷农药的生物降解 | 第14-15页 |
| 1.5 国内外的研究现状及分析 | 第15页 |
| 1.6 有机磷降解酶基因工程 | 第15-16页 |
| 1.7 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 1.8 课题的研究内容 | 第17-18页 |
| 2 有机磷农药降解菌株的筛选及鉴定 | 第18-31页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 毒死蜱的测定 | 第19-21页 |
| 2.2.2 菌株的分离筛选(初筛) | 第21页 |
| 2.2.3 菌株的分离筛选(复筛) | 第21-22页 |
| 2.2.4 菌株的鉴定 | 第22-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.3.1 菌株的分离筛选及降解有机磷农药性能的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.3.2 菌株的形态学及生理生化鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.3 26S rDNA序列比对分析及分子生物学鉴定 | 第26-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-31页 |
| 3 有机磷降解菌培养基的优化及降解条件的研究 | 第31-46页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第31-32页 |
| 3.1.1 实验菌种 | 第31页 |
| 3.1.2 主要仪器与设备 | 第31页 |
| 3.1.3 主要药品与试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.4 实验培养基 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 菌株RM-DY21的生长曲线及其对毒死蜱的降解曲线 | 第32页 |
| 3.2.2 不同培养基成分及含量对菌种降解有机磷农药的影响 | 第32-33页 |
| 3.2.3 不同无机盐及含量对菌种降解有机磷农药的影响 | 第33页 |
| 3.2.4 培养条件优化 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-44页 |
| 3.3.1 菌株RM-DY21的生长曲线及其对毒死蜱的降解曲线 | 第34页 |
| 3.3.2 培养基成分对菌株RM-DY21降解有机磷能力及菌体生长的影响 | 第34-36页 |
| 3.3.3 无机盐离子及含量对菌种降解有机磷农药的影响 | 第36-39页 |
| 3.3.4 培养条件对菌体生长及有机磷农药降解率的影响 | 第39-41页 |
| 3.3.5 响应面分析法优化菌株降解有机磷农药的条件 | 第41-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 4 有机磷降解酶的提取与纯化 | 第46-60页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验菌种 | 第46页 |
| 4.1.2 主要仪器与设备 | 第46-47页 |
| 4.1.3 主要药品与试剂 | 第47页 |
| 4.1.4 培养基 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-50页 |
| 4.2.1 酶活力的测定 | 第47-48页 |
| 4.2.2 有机磷农药降解酶的定位 | 第48页 |
| 4.2.3 有机磷农药降解酶的分离纯化 | 第48-49页 |
| 4.2.4 酶学性质研究 | 第49-50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-58页 |
| 4.3.1 降解酶的定位 | 第50-51页 |
| 4.3.2 有机磷农药降解酶的分离纯化 | 第51-53页 |
| 4.3.3 有机磷农药降解酶降解特性研究 | 第53-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-60页 |
| 5 有机磷降解酶基因的克隆及序列分析 | 第60-69页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第60-61页 |
| 5.1.1 菌种及载体 | 第60页 |
| 5.1.2 主要药品与试剂 | 第60页 |
| 5.1.3 仪器与设备 | 第60页 |
| 5.1.4 实验材料 | 第60-61页 |
| 5.1.5 实验用培养基与溶液 | 第61页 |
| 5.2 实验方法 | 第61-64页 |
| 5.2.1 菌株RM-DY21的有机磷农药降解酶基因克隆 | 第61-64页 |
| 5.3 结果与分析 | 第64-68页 |
| 5.3.1 有机磷农药降解酶基因的PCR扩增 | 第64页 |
| 5.3.2 重组克隆质粒pET22B-opd的转化及菌落PCR验证 | 第64-65页 |
| 5.3.3 opd基因的序列分析 | 第65-68页 |
| 5.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
