摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
英文缩略词 | 第11-12页 |
一. 前言 | 第12-13页 |
二. 材料与方法 | 第13-29页 |
2.1 材料 | 第13-15页 |
2.1.1 仪器设备 | 第13页 |
2.1.2 试剂溶液 | 第13-15页 |
2.2 方法 | 第15-29页 |
2.2.1 细胞培养 | 第15-17页 |
2.2.2 Real time PCR检测S1PRs表达 | 第17-20页 |
2.2.3 S1PR2 cDNA的克隆及克隆载体的构建 | 第20-25页 |
2.2.4 S1PR2 cDNA真核表达载体构建 | 第25-26页 |
2.2.5 S1PR2过表达A549细胞系建立 | 第26-28页 |
2.2.6 S1PR2在2种胃癌细胞迁移活性中的作用 | 第28页 |
2.2.7 S1PR2在SGC-7901细胞中抑制细胞迁移的信号通路研究 | 第28-29页 |
2.2.8 数据分析 | 第29页 |
三. 结果 | 第29-46页 |
3.1 细胞中S1PRs的mRNA表达情况 | 第29-32页 |
3.2 胃癌细胞迁移活性检测 | 第32-34页 |
3.2.1 SGC-7901细胞迁移活性检测 | 第32-33页 |
3.2.2 BGC-803细胞迁移活性的检测 | 第33-34页 |
3.3 人鞘氨醇-1-磷酸2型受体S1PR2真核表达载体的构建 | 第34-36页 |
3.3.1 人鞘氨醇-1-磷酸2型受体S1PR2的cDNA克隆 | 第34页 |
3.3.2 重组质粒pMD19-T-S1PR2的双酶切(SalI和BamHI)鉴定 | 第34-35页 |
3.3.3 重组质粒pMD19-T-S1PR2的测序鉴定 | 第35页 |
3.3.4 表达载体pIRES2-EGFP的双酶切(SalI和BamHl) | 第35-36页 |
3.3.5 重组表达载体pIRES2-EGFP-S1PR2双酶切鉴定 | 第36页 |
3.3.6 重组质粒pIRES2-EGFP-S1PR2的测序鉴定 | 第36页 |
3.4 S1PR2过表达A549细胞系的建立 | 第36-38页 |
3.4.1 A549细胞中转染表达载体pIRES2-EGFP-S1PR2后荧光显微照相 | 第36-37页 |
3.4.2 Real Time PCR相对定量结果 | 第37-38页 |
3.5 S1PR2过表达A549细胞迁移活性检测 | 第38-40页 |
3.6 SGC-7901细胞标准曲线和生长曲线的绘制 | 第40-41页 |
3.6.1 SGC-7901细胞的标准曲线绘制 | 第40页 |
3.6.2 SGC-7901细胞生长曲线绘制 | 第40-41页 |
3.7 S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的信号通路探究 | 第41-46页 |
3.7.1 PTX对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响 | 第41-42页 |
3.7.2 PD98059对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响 | 第42-43页 |
3.7.3 Y27632对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响 | 第43-44页 |
3.7.4 BAY对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响 | 第44-46页 |
四. 讨论 | 第46-47页 |
五. 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-49页 |
文献综述 | 第49-56页 |
参考文献 | 第53-56页 |
附录 | 第56-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读硕士学位期间发表的论文与参与的科研项目 | 第61页 |