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黄粉虫抗菌肽诱导方法的比较及实时荧光定量PCR分析

摘要第8-9页
Abstract第9页
第一章 文献综述第10-17页
    1 黄粉虫的研究进展第10-12页
        1.1 黄粉虫生活史第10页
        1.2 黄粉虫开发与利用第10-12页
            1.2.1 在食用方面第11页
            1.2.2 在饲用、肥料方面第11-12页
            1.2.3 在药用方面第12页
            1.2.4 在其他方面第12页
    2 抗菌肽的研究第12-15页
        2.1 抗菌肽的概况第12-13页
        2.2 抗菌肽的类型第13-14页
            2.2.1 天然来源抗菌肽第13页
            2.2.2 化学合成的抗菌肽第13页
            2.2.3 基因工程来源的抗菌肽第13-14页
            2.2.4 酶解获得的抗菌肽第14页
        2.3 抗菌肽的生物学特性第14页
        2.4 黄粉虫抗菌肽的研究第14-15页
    3 实时荧光定量PCR技术的研究第15-16页
    4 本文研究的目的与意义第16-17页
第二章 黄粉虫抗菌肽的诱导第17-36页
    1 试验材料第17-19页
        1.1 供试昆虫与菌种第17页
        1.2 主要仪器与试剂第17-18页
            1.2.1 主要仪器第17页
            1.2.2 主要试剂第17-18页
        1.3 培养基的配置第18页
        1.4 试剂和缓冲液的配置第18页
        1.5 菌种的活化第18页
        1.6 虫龄的选择第18-19页
    2 试验方法第19-22页
        2.1 黄粉虫抗菌肽的诱导第19-21页
            2.1.1 不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第19-20页
                2.1.1.1 微量注射不同浓度菌液对抗菌肽的诱导第19页
                2.1.1.2 饲喂不同浓度菌液对抗菌肽的诱导第19页
                2.1.1.3 针刺不同浓度菌液对抗菌肽的诱导第19-20页
            2.1.2 特定浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第20-21页
                2.1.2.1 微量注射不同菌液量对抗菌肽的诱导第20页
                2.1.2.2 饲喂不同比例的菌液与饲料对抗菌肽的诱导第20页
                2.1.2.3 针刺不同次数对抗菌肽的诱导第20-21页
        2.2 抗菌肽的提取第21页
        2.3 抑菌试验第21页
        2.4 数据处理方法第21-22页
    3 结果与分析第22-34页
        3.1 微量注射不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第22-24页
            3.1.1 微量注射不同浓度大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第22-23页
            3.1.2 微量注射不同浓度金黄色葡萄球菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第23-24页
        3.2 饲喂不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第24-26页
            3.2.1 饲喂不同浓度大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第24-25页
            3.2.2 饲喂不同浓度金黄色葡萄球菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第25-26页
        3.3 针刺不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第26-28页
            3.3.1 针刺不同浓度大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第26-27页
            3.3.2 针刺不同浓度金黄色葡萄球菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第27-28页
        3.4 微量注射相同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第28-30页
            3.4.1 微量注射大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第28-29页
            3.4.2 微量注射金黄色葡萄球菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第29-30页
        3.5 饲喂不同比例菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第30-32页
            3.5.1 饲喂不同比例大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第30-31页
            3.5.2 饲喂金黄色葡萄球菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第31-32页
        3.6 不同针刺次数对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第32-34页
            3.6.1 针刺大肠杆菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第32-33页
            3.6.2 针刺金黄色葡萄球菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导第33-34页
    4 小结与讨论第34-36页
        4.1 不同龄期幼虫诱导效果比较第34页
        4.2 不同浓度菌液诱导效果比较第34页
        4.3 不同菌液与饲料比例诱导效果比较第34-35页
        4.4 不同诱导方法效果比较第35-36页
第三章 黄粉虫抗菌肽Tenecin、Coleoptericin基因实时荧光定量PCR分析第36-51页
    1 试验材料第36-37页
        1.1 供试昆虫与菌种第36页
        1.2 主要仪器与试剂第36-37页
            1.2.1 主要仪器第36-37页
            1.2.2 主要试剂第37页
    2 试验方法第37-41页
        2.1 黄粉虫总RNA的提取第37-38页
        2.2 目的基因的引物设计第38-39页
        2.3 实时荧光定量PCR检测第39-41页
            2.3.1 RNA反转录第39页
            2.3.2 荧光定量PCR检测第39-41页
                2.3.2.1 实验样本第39页
                2.3.2.2 PCR反应步骤第39-40页
                2.3.2.3 仪器的操作第40-41页
    3 结果与分析第41-50页
        3.1 内参基因实时荧光定量结果第41-42页
        3.2 目的基因Tenecin 1实时荧光定量结果第42-44页
        3.3 目的基因Tenecin 3实时荧光定量结果第44-46页
        3.4 目的基因Tenecin 4实时荧光定量结果第46-48页
        3.5 目的基因Coleoptericin C实时荧光定量结果第48-50页
    4 小结与讨论第50-51页
第四章 总结与讨论第51-54页
    1 主要结论第51页
        1.1 黄粉虫抗菌肽诱导方法比较第51页
        1.2 实时荧光定量PCR分析第51页
    2 讨论第51-52页
    3 本研究的创新与不足第52-53页
    4 展望第53-54页
参考文献第54-58页
附录Ⅰ第58-61页
附录Ⅱ第61-64页
致谢第64页

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