摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1 黄粉虫的研究进展 | 第10-12页 |
1.1 黄粉虫生活史 | 第10页 |
1.2 黄粉虫开发与利用 | 第10-12页 |
1.2.1 在食用方面 | 第11页 |
1.2.2 在饲用、肥料方面 | 第11-12页 |
1.2.3 在药用方面 | 第12页 |
1.2.4 在其他方面 | 第12页 |
2 抗菌肽的研究 | 第12-15页 |
2.1 抗菌肽的概况 | 第12-13页 |
2.2 抗菌肽的类型 | 第13-14页 |
2.2.1 天然来源抗菌肽 | 第13页 |
2.2.2 化学合成的抗菌肽 | 第13页 |
2.2.3 基因工程来源的抗菌肽 | 第13-14页 |
2.2.4 酶解获得的抗菌肽 | 第14页 |
2.3 抗菌肽的生物学特性 | 第14页 |
2.4 黄粉虫抗菌肽的研究 | 第14-15页 |
3 实时荧光定量PCR技术的研究 | 第15-16页 |
4 本文研究的目的与意义 | 第16-17页 |
第二章 黄粉虫抗菌肽的诱导 | 第17-36页 |
1 试验材料 | 第17-19页 |
1.1 供试昆虫与菌种 | 第17页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第17-18页 |
1.2.1 主要仪器 | 第17页 |
1.2.2 主要试剂 | 第17-18页 |
1.3 培养基的配置 | 第18页 |
1.4 试剂和缓冲液的配置 | 第18页 |
1.5 菌种的活化 | 第18页 |
1.6 虫龄的选择 | 第18-19页 |
2 试验方法 | 第19-22页 |
2.1 黄粉虫抗菌肽的诱导 | 第19-21页 |
2.1.1 不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第19-20页 |
2.1.1.1 微量注射不同浓度菌液对抗菌肽的诱导 | 第19页 |
2.1.1.2 饲喂不同浓度菌液对抗菌肽的诱导 | 第19页 |
2.1.1.3 针刺不同浓度菌液对抗菌肽的诱导 | 第19-20页 |
2.1.2 特定浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第20-21页 |
2.1.2.1 微量注射不同菌液量对抗菌肽的诱导 | 第20页 |
2.1.2.2 饲喂不同比例的菌液与饲料对抗菌肽的诱导 | 第20页 |
2.1.2.3 针刺不同次数对抗菌肽的诱导 | 第20-21页 |
2.2 抗菌肽的提取 | 第21页 |
2.3 抑菌试验 | 第21页 |
2.4 数据处理方法 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-34页 |
3.1 微量注射不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第22-24页 |
3.1.1 微量注射不同浓度大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第22-23页 |
3.1.2 微量注射不同浓度金黄色葡萄球菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第23-24页 |
3.2 饲喂不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第24-26页 |
3.2.1 饲喂不同浓度大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第24-25页 |
3.2.2 饲喂不同浓度金黄色葡萄球菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第25-26页 |
3.3 针刺不同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第26-28页 |
3.3.1 针刺不同浓度大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第26-27页 |
3.3.2 针刺不同浓度金黄色葡萄球菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第27-28页 |
3.4 微量注射相同浓度菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第28-30页 |
3.4.1 微量注射大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第28-29页 |
3.4.2 微量注射金黄色葡萄球菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第29-30页 |
3.5 饲喂不同比例菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第30-32页 |
3.5.1 饲喂不同比例大肠杆菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第30-31页 |
3.5.2 饲喂金黄色葡萄球菌菌液对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第31-32页 |
3.6 不同针刺次数对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第32-34页 |
3.6.1 针刺大肠杆菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第32-33页 |
3.6.2 针刺金黄色葡萄球菌对黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导 | 第33-34页 |
4 小结与讨论 | 第34-36页 |
4.1 不同龄期幼虫诱导效果比较 | 第34页 |
4.2 不同浓度菌液诱导效果比较 | 第34页 |
4.3 不同菌液与饲料比例诱导效果比较 | 第34-35页 |
4.4 不同诱导方法效果比较 | 第35-36页 |
第三章 黄粉虫抗菌肽Tenecin、Coleoptericin基因实时荧光定量PCR分析 | 第36-51页 |
1 试验材料 | 第36-37页 |
1.1 供试昆虫与菌种 | 第36页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第36-37页 |
1.2.1 主要仪器 | 第36-37页 |
1.2.2 主要试剂 | 第37页 |
2 试验方法 | 第37-41页 |
2.1 黄粉虫总RNA的提取 | 第37-38页 |
2.2 目的基因的引物设计 | 第38-39页 |
2.3 实时荧光定量PCR检测 | 第39-41页 |
2.3.1 RNA反转录 | 第39页 |
2.3.2 荧光定量PCR检测 | 第39-41页 |
2.3.2.1 实验样本 | 第39页 |
2.3.2.2 PCR反应步骤 | 第39-40页 |
2.3.2.3 仪器的操作 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-50页 |
3.1 内参基因实时荧光定量结果 | 第41-42页 |
3.2 目的基因Tenecin 1实时荧光定量结果 | 第42-44页 |
3.3 目的基因Tenecin 3实时荧光定量结果 | 第44-46页 |
3.4 目的基因Tenecin 4实时荧光定量结果 | 第46-48页 |
3.5 目的基因Coleoptericin C实时荧光定量结果 | 第48-50页 |
4 小结与讨论 | 第50-51页 |
第四章 总结与讨论 | 第51-54页 |
1 主要结论 | 第51页 |
1.1 黄粉虫抗菌肽诱导方法比较 | 第51页 |
1.2 实时荧光定量PCR分析 | 第51页 |
2 讨论 | 第51-52页 |
3 本研究的创新与不足 | 第52-53页 |
4 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
附录Ⅰ | 第58-61页 |
附录Ⅱ | 第61-64页 |
致谢 | 第64页 |