| 中文摘要 | 第5-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 英汉缩略名词对照 | 第10-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-23页 |
| 1.1 乳腺癌的研究背景 | 第15-17页 |
| 1.2 ZIC1基因概况 | 第17-20页 |
| 1.3 苦参碱药效简介 | 第20-23页 |
| 第二章 ZIC1基因、苦参碱以及ZIC1转染联合苦参碱对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖迁移能力及凋亡的影响 | 第23-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验细胞的来源 | 第23页 |
| 2.1.2 基因与药物 | 第23页 |
| 2.1.3 实验主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 实验主要仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-32页 |
| 2.2.1 试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.2.1.1 磷酸盐缓冲液(PBS)的配制 | 第25页 |
| 2.2.1.2 细胞培养液的配制 | 第25页 |
| 2.2.1.3 细胞冻存液 | 第25页 |
| 2.2.1.4 苦参碱溶液 | 第25页 |
| 2.2.1.5 噻唑蓝(MTT)溶液的配制 | 第25页 |
| 2.2.1.6 TBST的配制 | 第25-26页 |
| 2.2.2 细胞培养、传代及冻存 | 第26-27页 |
| 2.2.2.1 细胞的复苏 | 第26页 |
| 2.2.2.2 细胞培养和传代 | 第26-27页 |
| 2.2.2.3 细胞计数 | 第27页 |
| 2.2.2.4 细胞冻存 | 第27页 |
| 2.2.3 实验方案的设计 | 第27-28页 |
| 2.2.4 ZIC1基因的转染及检测 | 第28-29页 |
| 2.2.4.1 慢病毒载体pLV-Zic1-PGK-Puro转 染人乳腺癌细胞MDA-MB-231 | 第28页 |
| 2.2.4.2 Western blot法检测ZIC1基因转染后在MDA-MB-231细胞中的表达 | 第28-29页 |
| 2.2.4.2.1 Western blot实验原理 | 第28页 |
| 2.2.4.2.2 Western blot步骤 | 第28-29页 |
| 2.2.5 MTT法检测不同浓度苦参碱对细胞增殖影响(细胞毒性试验) | 第29-30页 |
| 2.2.5.1 MTT实验原理 | 第29页 |
| 2.2.5.2 MTT法目的 | 第29页 |
| 2.2.5.3 MTT法步骤 | 第29-30页 |
| 2.2.6 细胞粘附实验(Cell Adhesion Assay) | 第30页 |
| 2.2.7 细胞划痕实验(Wound-Healing Assay) | 第30-31页 |
| 2.2.7.1 实验原理 | 第30-31页 |
| 2.2.7.2 实验目的 | 第31页 |
| 2.2.7.3 操作步骤 | 第31页 |
| 2.2.8 流式细胞术(Flow Cytometry,FCM) | 第31-32页 |
| 2.2.8.1 实验原理 | 第31-32页 |
| 2.2.8.2 实验目的 | 第32页 |
| 2.2.8.3 实验步骤 | 第32页 |
| 2.2.9 统计学处理 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-38页 |
| 2.3.1 ZIC1基因在人乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达及转染结果 | 第32-33页 |
| 2.3.2 ZIC1基因联合苦参碱对MDA-MB-231细胞生物学行为的影响 | 第33-38页 |
| 2.3.2.1 苦参碱的细胞毒作用及浓度筛查(细胞毒实验): | 第33-34页 |
| 2.3.2.2 ZIC1联合苦参碱对MDA-MB-231的增殖抑制作用(细胞粘附实验): | 第34-35页 |
| 2.3.2.3 ZIC1联合苦参碱对MDA-MB-231迁移抑制能力(细胞划痕实验): | 第35-37页 |
| 2.3.2.4 ZIC1联合苦参碱诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡(流式细胞术): | 第37-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-42页 |
| 2.5 结论 | 第42-43页 |
| 2.6 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第51-52页 |
| 附录(综述) 中药苦参碱的抗肿瘤活性及其相关机制 | 第52-69页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |