| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第9-14页 |
| 1. 心衰是威胁人类健康的重要公共问题 | 第9页 |
| 2. 心肌肥厚是心衰的病理生理基础 | 第9-10页 |
| 3. 心肌能量代谢紊乱是心肌肥厚的重要特征 | 第10-11页 |
| 3.1 心脏脂肪酸代谢 | 第10-11页 |
| 3.2 心脏糖代谢 | 第11页 |
| 4. Sirt3的功能提示它可能与心肌能量代谢有关 | 第11-13页 |
| 4.1 Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶Sirtuins的特征 | 第11-12页 |
| 4.2 Sirt3的表达与疾病相关的刺激有关 | 第12页 |
| 4.3 Sirt3对心肌肥厚的作用 | 第12-13页 |
| 5. Sirt3对心肌肥厚时心肌代谢的作用及其分子机制是本研究的重点 | 第13-14页 |
| 实验材料 | 第14-15页 |
| 1. 实验用动物及饲料 | 第14页 |
| 2. 菌株与质粒 | 第14页 |
| 3. 其他主要试剂 | 第14页 |
| 4. 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 实验方法 | 第15-24页 |
| 1. Sirt3基因敲除小鼠的繁殖与鉴定 | 第15页 |
| 1.1 PCR鉴定基因敲除小鼠 | 第15页 |
| 1.2 Sirt3基因敲除小鼠的繁殖 | 第15页 |
| 2. Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚模型的建立 | 第15-16页 |
| 2.1 手术操作流程 | 第15-16页 |
| 2.2 心体比测定 | 第16页 |
| 3. 实时定量RT-PCR | 第16-19页 |
| 3.1 RNA的提取 | 第16页 |
| 3.2 逆转录PCR(RT-PCR) | 第16-19页 |
| 4. 大鼠H9C2心肌细胞的培养和药物处理 | 第19页 |
| 4.1 大鼠H9C2心肌细胞的传代培养 | 第19页 |
| 4.2 H9C2心肌细胞的冻存和复苏 | 第19页 |
| 5. 质粒构建和转染和细胞Ang Ⅱ处理 | 第19-21页 |
| 5.1 转染用质粒DNA的大量制备 | 第19-20页 |
| 5.2 非脂质体转染试剂转染细胞 | 第20页 |
| 5.3 Ang Ⅱ刺激转染后细胞 | 第20-21页 |
| 6. 腺病毒表达载体的构建、包装及靶细胞的感染 | 第21-23页 |
| 6.1 腺病毒表达载体的构建 | 第21页 |
| 6.2 pAdTrack-CMV表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 6.3 重组腺病毒载体的获得 | 第22页 |
| 6.4 腺病毒的包装及靶细胞的感染 | 第22-23页 |
| 7. 数据统计 | 第23-24页 |
| 实验结果 | 第24-37页 |
| 1. SIRT3在Ang Ⅱ诱导的心肌肥厚的心脏中表达升高 | 第24-25页 |
| 2. SIRT3参与调节心肌肥厚时的心脏代谢 | 第25-32页 |
| 2.1 SIRT3参与心脏脂肪酸代谢调节 | 第25-27页 |
| 2.2 SIRT3调节心肌肥厚时的糖代谢 | 第27-29页 |
| 2.3 SIRT3基因敲除抑制心肌肥厚时心脏的三羧酸循环 | 第29-30页 |
| 2.4 SIRT3参与心肌肥厚时心脏线粒体呼吸链的调节 | 第30-32页 |
| 3. SIRT3基因敲除抑制PPAR-α/PGC-1α信号通路激活 | 第32-33页 |
| 4. SIRT3过表达促进H9C2心肌细胞系PPAR-α/PGC-1α信号通路激活 | 第33-37页 |
| 讨论 | 第37-41页 |
| 1. 本研究概述 | 第37页 |
| 2. 心肌肥厚导致心脏SIRT3表达降低 | 第37-38页 |
| 3. SIRT3调控心脏脂肪酸代谢 | 第38-39页 |
| 4. SIRT3调控心脏糖代谢 | 第39页 |
| 5. SIRT3正性调节心肌细胞PPAR-α/PGC-1α信号通路 | 第39-40页 |
| 6. 本研究的不足 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 综述 | 第44-53页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
