一种文蛤多肽基因的克隆、原核表达、纯化及功能性研究
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.关于文蛤研究 | 第10-12页 |
| 1.1 文蛤的活性成分 | 第10-11页 |
| 1.2 文蛤的药理作用 | 第11-12页 |
| 2 抗癌药物研究 | 第12-21页 |
| 2.1 中草药抗癌研究 | 第14-18页 |
| 2.2 化学药物抗癌研究 | 第18-20页 |
| 2.3 纳米材料的抗癌研究 | 第20-21页 |
| 小节 | 第21-22页 |
| 第二章 原核表达体系构建及鉴定 | 第22-48页 |
| 1.试剂与材料 | 第22-25页 |
| 1.1 材料 | 第22-23页 |
| 1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2 试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.1 水平电泳试剂配制 | 第25页 |
| 2.2 SDS-page电泳试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.3 透析液缓冲液配制 | 第26页 |
| 3．实验方法 | 第26-38页 |
| 3.1 文蛤总RNA提取 | 第26-27页 |
| 3.2 DNA合成 | 第27-31页 |
| 3.3 原核表达构建 | 第31-35页 |
| 3.4 蛋白表达纯化 | 第35-37页 |
| 3.5 目的蛋白含量测定 | 第37-38页 |
| 4 实验结果 | 第38-45页 |
| 4.1 文蛤总RNA质量 | 第38页 |
| 4.2 PCR反应结果 | 第38-39页 |
| 4.3 目的基因的序列测定及分析 | 第39-42页 |
| 4.4 蛋白表达纯化结果 | 第42-45页 |
| 5 讨论 | 第45-46页 |
| 小节 | 第46-48页 |
| 第三章 响应面法优化培养基 | 第48-67页 |
| 1. 材料与仪器 | 第48-50页 |
| 1.1 材料 | 第48页 |
| 1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
| 1.3 实验仪器 | 第49-50页 |
| 2 试剂配制 | 第50-52页 |
| 2.1 单因素培养基设定 | 第50页 |
| 2.2 发酵培养基 | 第50-52页 |
| 2.3 免疫荧光检测试剂 | 第52页 |
| 3 试验方法 | 第52-56页 |
| 3.1 单因素实验 | 第53页 |
| 3.2 五种培养基的发酵 | 第53页 |
| 3.3 PB实验设计 | 第53-54页 |
| 3.4 响应面设计 | 第54-55页 |
| 3.5 目的蛋白含量测定 | 第55-56页 |
| 4. 实验结果 | 第56-65页 |
| 4.1 单因素实验结果 | 第56-58页 |
| 4.2 五种不同发酵培养基 | 第58-59页 |
| 4.3 PB实验结果与分析 | 第59-60页 |
| 4.4 响应面实验结果 | 第60-64页 |
| 4.5 免疫印迹实验结果 | 第64-65页 |
| 5 讨论 | 第65-66页 |
| 小节 | 第66-67页 |
| 第四章 蛋白的功能性研究 | 第67-77页 |
| 1．试剂与材料 | 第67-68页 |
| 1.1 实验材料 | 第67页 |
| 1.2 实验设备 | 第67-68页 |
| 2.试剂配制 | 第68-69页 |
| 3.试验方法 | 第69-72页 |
| 3.1 细胞复苏 | 第69页 |
| 3.2 细胞传代 | 第69-70页 |
| 3.3 细胞保存 | 第70页 |
| 3.4 细胞质抑制率实验 | 第70-71页 |
| 3.5 DAPI染色 | 第71-72页 |
| 4.实验结果 | 第72-75页 |
| 4.1 抑制率测定 | 第72-73页 |
| 4.2 DAPI染色结果 | 第73-75页 |
| 5．讨论 | 第75-76页 |
| 小节 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第85-86页 |
