| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第10-23页 |
| 1.1 南极大陆的形成 | 第10-11页 |
| 1.2 南极鱼类寒冷适应性进化研究进展 | 第11-16页 |
| 1.2.1 抗冻蛋白与抗冻糖蛋白的进化 | 第11-13页 |
| 1.2.2 血红蛋白（hemoglobin,Hb）的进化 | 第13-14页 |
| 1.2.3 热休克反应的缺失 | 第14-15页 |
| 1.2.4 转录组和基因组层面的进化 | 第15-16页 |
| 1.3 卵壳蛋白（zona pellucida,ZP） | 第16-22页 |
| 1.3.1 卵壳蛋白的组成与结构 | 第16页 |
| 1.3.2 卵壳蛋白的功能 | 第16页 |
| 1.3.3 卵壳蛋白的进化 | 第16-18页 |
| 1.3.4 鳞头犬牙南极鱼（Dissostichus mawsoni）ZP基因 | 第18-19页 |
| 1.3.5 卵壳蛋白研究进展 | 第19-22页 |
| 1.4 研究ZP与南极寒冷环境的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 低温胁迫对DmZPC5_1 的表达及细胞存活率的影响 | 第23-32页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 材料 | 第23页 |
| 2.2.2 ZPC5基因重组质粒的测序鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.3 CHO细胞的培养 | 第24页 |
| 2.2.4 CHO细胞的转染及转染后蛋白水平成功表达的鉴定 | 第24页 |
| 2.2.5 低温处理策略及细胞存活率实验 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.3.1 ZPC5的编码区序列分析 | 第25-27页 |
| 2.3.2 ZPC5重组真核表达载体的结构分析 | 第27页 |
| 2.3.3 CHO细胞的转染及转染后蛋白水平成功表达的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.4 ZPC5蛋白表达量及存活率检测 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 低温胁迫下三种DmZPC5表达量及细胞存活率 | 第32-57页 |
| 3.1 前言 | 第32页 |
| 3.2 主要实验仪器及试剂 | 第32-35页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.2 试剂及试剂盒 | 第33-34页 |
| 3.2.3 样品、菌株和质粒 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法与步骤 | 第35-43页 |
| 3.3.1 重组质粒的鉴定 | 第35-38页 |
| 3.3.2 中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary ,CHO)的培养与蛋白鉴定 | 第38-42页 |
| 3.3.3 低温处理策略及细胞存活率实验 | 第42-43页 |
| 3.3.4 统计学处理 | 第43页 |
| 3.4 结果与分析 | 第43-55页 |
| 3.4.1 三种DmZPC5的编码区序列分析 | 第43-46页 |
| 3.4.2 三种DmZPC5重组真核表达载体的结构分析与酶切验证 | 第46-47页 |
| 3.4.3 转染CHO细胞后蛋白水平成功表达的鉴定 | 第47-49页 |
| 3.4.4 低温下三种DmZPC5表达量变化 | 第49-50页 |
| 3.4.5 低温胁迫及存活率的检测 | 第50-52页 |
| 3.4.6 低温下CHO细胞存活率差异分析 | 第52-55页 |
| 3.5 讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
