第一部分:拟南芥ckrc筛选体系的建立及基因CKRW1的功能研究 | 第6-49页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1. 第一章 文献综述 | 第8-21页 |
1.1. 生长素生物合成研究现状 | 第8-13页 |
1.1.1. 吲哚乙酰胺途径 | 第10-11页 |
1.1.2. 吲哚丙酮酸途径 | 第11-12页 |
1.1.3. 色胺途径 | 第12页 |
1.1.4. 吲哚乙醛肟途径 | 第12页 |
1.1.5. 生长素的合成是组织特异性的 | 第12-13页 |
1.2. 生长素突变体的筛选进展 | 第13-17页 |
1.2.1. sur1/2 | 第13-14页 |
1.2.2. cyb79b2/cyp7963 | 第14页 |
1.2.3. yuc | 第14-16页 |
1.2.4. wei2/7 | 第16页 |
1.2.5. taa1 | 第16-17页 |
1.3. 植物泛素连接酶研究现状 | 第17-20页 |
1.3.1. 泛素化(Ubiquitination) | 第17页 |
1.3.2. 泛素化在植物生长发育中的作用 | 第17-20页 |
本论文研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2. 第二章 材料和方法 | 第21-26页 |
2.1. 植物材料及培养条件 | 第21-22页 |
2.2. ckrc系统筛选拟南芥突变体的流程 | 第22页 |
2.3. 突变体的遗传分析 | 第22页 |
2.4. 基因克隆 | 第22-23页 |
2.5. 表型实验 | 第23-24页 |
2.5.1. 化学互补 | 第23页 |
2.5.2. 根生长曲线的绘制 | 第23页 |
2.5.3. 根向重力性统计 | 第23-24页 |
2.6. RNA提取及Real-time PCR | 第24页 |
2.7. 内源激素含量的测定 | 第24页 |
2.8. 载体的构建及转基因 | 第24-26页 |
3. 第三章 结果 | 第26-44页 |
3.1. ckrc筛选体系的建立 | 第26-37页 |
3.1.1. ckrc突变体的遗传学筛选 | 第26-29页 |
3.1.2. 化学互补和等位分析 | 第29-32页 |
3.1.3. 低浓度的IAA能刺激突变体ckrc2、ckrw1、2的根生长、恢复其向地性 | 第32-33页 |
3.1.4. 突变体ckrc2、ckrw1、2对外源IAA和tZ响应正常 | 第33-34页 |
3.1.5. 突变体ckrc/w的内源生长素含量降低 | 第34-36页 |
3.1.6. 突变体ckrc/w的基因克隆 | 第36-37页 |
3.2. 基因CKRW1的功能研究 | 第37-44页 |
3.2.1. 突变体ckrw1的遗传分析及基因克隆 | 第37-39页 |
3.2.2. 突变体ckrw1是生长素缺陷突变体 | 第39-40页 |
3.2.3. 突变体ckrw1和生长素运输突变体表型比较 | 第40-41页 |
3.2.4. 突变体ckrw1与细胞分裂素相关的研究 | 第41-44页 |
4. 第四章 讨论 | 第44-48页 |
4.1. ckrc筛选体系能有效分离生长素缺陷突变体 | 第44页 |
4.2. 几个新突变体对应基因的研究现状 | 第44-46页 |
4.3. 筛选预见的问题和可能的原因 | 第46页 |
4.4. 突变体ckrw1可能不是一个单纯的生长素缺陷突变体 | 第46-48页 |
5. 第五章 结论 | 第48-49页 |
第二部分:基因GFC1/DCR在细胞分裂素响应及暗形态建成中的功能研究 | 第49-105页 |
中文摘要 | 第49-50页 |
Abstract | 第50-51页 |
1. 第一章 文献综述 | 第51-63页 |
1.1. 细胞分裂素合成代谢及信号转导 | 第51-56页 |
1.1.1. 细胞分裂素的合成代谢 | 第52-53页 |
1.1.2. 细胞分裂素信号转导途径以及各个组分的作用 | 第53-55页 |
1.1.3. 细胞分裂素与许多生物学过程有关 | 第55-56页 |
1.2. 拟南芥角质研究进展 | 第56-62页 |
1.2.1. 蜡质的形成 | 第56-59页 |
1.2.1.1. 长链脂肪酸的合成 | 第56-57页 |
1.2.1.2. 角质层蜡质的合成 | 第57-58页 |
1.2.1.3. 蜡质的运输 | 第58-59页 |
1.2.2. 角质的形成 | 第59-62页 |
1.2.2.1. 角质合成的研究进展 | 第59-60页 |
1.2.2.2. 角质合成的模型 | 第60-61页 |
1.2.2.3. 角质层以及角质层的衍生物可能作为信号分子参与植物的防御 | 第61-62页 |
本论文研究的目的和意义 | 第62-63页 |
2. 第二章 材料和方法 | 第63-69页 |
2.1. 植物材料及培养条件 | 第63页 |
2.2. 突变体的遗传分析 | 第63-64页 |
2.3. 基因克隆 | 第64页 |
2.4. GUS染色 | 第64-65页 |
2.5. 表型实验 | 第65-66页 |
2.5.1. 突变体根长的测量及DIC观察突变体根结构 | 第65页 |
2.5.2. 各种激素诱导下的子叶鲜重、根长度的统计 | 第65页 |
2.5.3. 各种激素诱导下的暗下生长的下胚轴长度统计 | 第65页 |
2.5.4. 组培、不定根诱导、叶片衰老 | 第65页 |
2.5.5. 三色光培养 | 第65-66页 |
2.6. RNA提取及Real-time PCR | 第66页 |
2.7. 内源细胞分裂素含量的测定 | 第66页 |
2.8. 内源乙烯含量的测定 | 第66-67页 |
2.9. 载体的构建及转基因 | 第67-69页 |
3. 第三章 结果 | 第69-99页 |
3.1. 突变体筛选,基因克隆及表达研究 | 第69-73页 |
3.1.1. 突变体的筛选 | 第69-70页 |
3.1.2. 突变体的遗传分析及基因克隆 | 第70-72页 |
3.1.3. 基因GFC1的表达研究及组织表达模式 | 第72-73页 |
3.2. 突变体表型分析 | 第73-85页 |
3.2.1. 突变体gfc1在幼苗阶段外,其他各个生长阶段和野生型的表型差异 | 第73-74页 |
3.2.2. 突变体gfc1突变体株型变大,pCYCB1:GUS表达变强 | 第74-75页 |
3.2.3. 突变体gfc1突变体幼苗对细胞分裂素的响应变化 | 第75-77页 |
3.2.4. 组培分析,不定根分析及叶片衰老分析 | 第77-78页 |
3.2.5. 突变体gfc1幼苗在暗下具有类似去黄化的表型 | 第78-79页 |
3.2.6. 暗下突变体gfc1-1下胚轴伸长对细胞分裂素不敏感 | 第79-82页 |
3.2.7. 突变体gfc1-1对三色光的反应 | 第82-83页 |
3.2.8. 暗下突变体gfc1-1幼苗表现顶勾缺少(hook-less) | 第83-85页 |
3.3. 细胞分裂素信号途径相关基因的研究 | 第85-92页 |
3.3.1. 在突变体gfc1-1中type-A ARRs受细胞分裂素诱导后响应降低 | 第85-86页 |
3.3.2. 在突变体gfc1-1中type-A ARRs的本底升高,type-B ARRs本底不变 | 第86-88页 |
3.3.3. 超表达type-A ARRs的株系可以部分模拟突变体gfc1-1的表型 | 第88-89页 |
3.3.4. 细胞分裂素信号突变体与突变体gfc1-1的双突、三突的表型观察 | 第89-92页 |
3.4. 角质合成相关基因的研究 | 第92-96页 |
3.4.1. 角质合成相关基因突变体的鉴定 | 第92-93页 |
3.4.2. 角质合成相关基因突变体的表型观察 | 第93-96页 |
3.5. 突变体gfc1-1内源细胞分裂素含量的测定 | 第96-99页 |
4. 第四章 讨论 | 第99-104页 |
4.1. 在gfc1-1中,hook-less是生长素的不对称分布异常造成的 | 第99-100页 |
4.2. 角质合成基因GFC1、GPATs是幼苗发育和细胞分裂素响应必需的 | 第100-101页 |
4.3. 突变体gfc1-1中,细胞分裂素诱导的乙烯合成被阻断 | 第101-102页 |
4.4. 缺失酰基转移酶活性和gfc1表型是连锁的 | 第102-104页 |
5. 第五章 结论 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-122页 |
附录一 PCR反应所用到的引物 | 第122-124页 |
附录二 文中提及的测序及比对结果 | 第124-138页 |
附录三 载体图谱 | 第138-140页 |
附表 | 第140-146页 |
在学期间的研究成果 | 第146-147页 |
致谢 | 第147页 |