| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 膀胱肿瘤及治疗现状 | 第13-14页 |
| 1.2 肿瘤基因治疗 | 第14-20页 |
| 1.3 膀胱癌特异性溶瘤腺病毒膀胱内灌注治疗及联合治疗 | 第20-21页 |
| 1.4 顺铂吉西他滨在膀胱癌治疗中的应用 | 第21-22页 |
| 1.5 前期工作、立题依据和本课题主要研究内容 | 第22-25页 |
| 参考文献 | 第25-31页 |
| 第一部分 膀胱癌特异性溶瘤腺病毒的扩增、纯化及感染效率的测定 | 第31-50页 |
| 1.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 1.1.1 主要材料和试剂 | 第31-32页 |
| 1.1.2 主要溶液的配制 | 第32-33页 |
| 1.1.3 主要仪器及设备 | 第33-34页 |
| 1.2 实验方法 | 第34-44页 |
| 1.2.1 HEK293人胚肾细胞的复苏、培养、传代及冻存 | 第34-36页 |
| 1.2.2 溶瘤腺病毒的扩增与纯化 | 第36-37页 |
| 1.2.3 溶瘤腺病毒滴度的测定 | 第37-38页 |
| 1.2.4 膀胱癌细胞的复苏、培养、传代及冻存 | 第38-39页 |
| 1.2.5 重组腺病毒对膀胱癌细胞感染效率的测定 | 第39-44页 |
| 1.2.6 统计学方法 | 第44页 |
| 1.3 结果 | 第44-46页 |
| 1.3.1 扩增纯化后重组腺病毒滴度测定结果 | 第44页 |
| 1.3.2 重组腺病毒纯度测定结果 | 第44-45页 |
| 1.3.3 Ad/PSCAE/UPII/Luc对膀胱癌细胞感染效率的测定 | 第45页 |
| 1.3.4 溶瘤腺病毒感染膀胱癌细胞后E1A基因在细胞中的表达 | 第45-46页 |
| 1.4 讨论 | 第46-48页 |
| 1.5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第二部分 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂或吉西他滨联用对膀胱癌细胞生长的抑制作用 | 第50-78页 |
| 2.1 实验材料 | 第50-52页 |
| 2.1.1 主要材料和试剂 | 第50页 |
| 2.1.2 主要溶液的配制 | 第50-51页 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 | 第51-52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 2.2.1 膀胱癌细胞的复苏、培养、传代及冻存 | 第52页 |
| 2.2.2 MTT比色法检测细胞活力 | 第52-54页 |
| 2.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第54-55页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测细胞周期分布 | 第55-56页 |
| 2.2.5 统计学方法 | 第56页 |
| 2.3 结果 | 第56-73页 |
| 2.3.1 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂单用对人膀胱癌细胞生长的抑制作用 | 第56-58页 |
| 2.3.2 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂联用对人膀胱癌细胞生长的抑制作用 | 第58-60页 |
| 2.3.3 Ad/PSCAE/UPII/E1A与吉西他滨单用对人膀胱癌细胞生长的抑制作用 | 第60-62页 |
| 2.3.4 Ad/PSCAE/UPII/E1A与吉西他滨联用对人膀胱癌细胞生长的抑制作用 | 第62-64页 |
| 2.3.5 Ad/PSCAE/UPII/E1A、顺铂与吉西他滨分别单用对正常人尿路上皮细胞SV-HUC-1的影响 | 第64-65页 |
| 2.3.6 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂或吉西他滨联用对正常人尿路上皮细胞SV-HUC-1的影响 | 第65-67页 |
| 2.3.7 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂联用对人膀胱癌细胞凋亡的影响 | 第67-68页 |
| 2.3.8 Ad/PSCAE/UPII/E1A与吉西他滨联用对人膀胱癌细胞凋亡的影响 | 第68-69页 |
| 2.3.9 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂联用对人膀胱癌细胞周期分布的影响 | 第69-71页 |
| 2.3.10 Ad/PSCAE/UPII/E1A与吉西他滨联用对人膀胱癌细胞周期分布的影响 | 第71-73页 |
| 2.4 讨论 | 第73-76页 |
| 2.5 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-78页 |
| 第三部分 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂或吉西他滨联用发挥协同抗膀胱肿瘤作用的机制 | 第78-109页 |
| 3.1 实验材料 | 第78-81页 |
| 3.1.1 主要材料和试剂 | 第78-79页 |
| 3.1.2 主要仪器及设备 | 第79-80页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第80-81页 |
| 3.2 实验方法 | 第81-90页 |
| 3.2.1 膀胱癌细胞的复苏、培养、传代及冻存 | 第81页 |
| 3.2.2 qRT-PCR法检测凋亡相关基因mRNA水平的变化 | 第81-84页 |
| 3.2.3 Western blot法检测凋亡相关基因蛋白水平的变化 | 第84-88页 |
| 3.2.4 吉西他滨对重组腺病毒感染CAR低表达的膀胱癌细胞的效率的影响 | 第88-89页 |
| 3.2.5 Western blot法检测吉西他滨对T24细胞CAR表达的影响 | 第89-90页 |
| 3.2.6 统计学方法 | 第90页 |
| 3.3 结果 | 第90-98页 |
| 3.3.1 Ad/PSCAE/UPII/E1A与顺铂联用对凋亡相关基因表达的影响 | 第90-92页 |
| 3.3.2 Ad/PSCAE/UPII/E1A与吉西他滨联用对凋亡相关基因表达的影响 | 第92-96页 |
| 3.3.3 吉西他滨对重组腺病毒感染CAR低表达的膀胱癌细胞的效率的影响 | 第96-97页 |
| 3.3.4 吉西他滨对T24细胞CAR表达的影响 | 第97-98页 |
| 3.4 讨论 | 第98-104页 |
| 3.5 结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-109页 |
| 中英文缩写索引 | 第109-112页 |
| 在学期间的研究成果 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
