| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-35页 |
| 1.1 生物活性肽的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 鸭及其副产物高质化 | 第14-17页 |
| 1.2.1 国内外鸭利用 | 第14-15页 |
| 1.2.2 鸭内脏资源利用 | 第15-16页 |
| 1.2.3 鸭肫研究现状 | 第16-17页 |
| 1.3 蛋白质酶解技术 | 第17-19页 |
| 1.3.1 蛋白质酶解技术的特点 | 第17页 |
| 1.3.2 酶解产物活性特性 | 第17-18页 |
| 1.3.3 活性肽的制备技术 | 第18-19页 |
| 1.4 抗氧化活性肽的研究现状 | 第19-26页 |
| 1.4.1 抗氧化肽的来源 | 第20页 |
| 1.4.2 抗氧化肽的分离纯化鉴定 | 第20-22页 |
| 1.4.3 抗氧化肽构效研究进展 | 第22-26页 |
| 1.4.3.1 氨基酸的组成 | 第22-23页 |
| 1.4.3.2 肽构象 | 第23页 |
| 1.4.3.3 抗氧化肽QSAR模型建立 | 第23-24页 |
| 1.4.3.4 抗氧化肽建模方法的比较 | 第24-25页 |
| 1.4.3.5 抗氧化肽的作用机理 | 第25-26页 |
| 1.5 选题意义与研究内容 | 第26-29页 |
| 1.5.1 选题意义 | 第26页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第26-29页 |
| 1.5.2.1 鸭肫酶解产物特性及制备工艺研究 | 第26-27页 |
| 1.5.2.2 鸭肫酶解产物抗氧化特性研究 | 第27页 |
| 1.5.2.3 鸭肫抗氧化肽分离纯化鉴定 | 第27页 |
| 1.5.2.4 抗氧化肽QSAR定量构效模型的构建与验算 | 第27页 |
| 1.5.2.5 基于细胞水平研究鸭肫抗氧化肽机理 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-35页 |
| 第二章 鸭肫制备抗氧化产物工艺及特性研究 | 第35-56页 |
| 2.1 前言 | 第35-36页 |
| 2.2 材料与方法 | 第36-40页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第36页 |
| 2.2.2 仪器与设备 | 第36-37页 |
| 2.2.3 试验方法 | 第37-40页 |
| 2.2.3.1 鸭肫预处理 | 第37页 |
| 2.2.3.2 单酶酶解鸭肫工艺 | 第37页 |
| 2.2.3.3 酶解液氨基酸测定 | 第37-38页 |
| 2.2.3.4 DPPH自由基清除能力的测定 | 第38页 |
| 2.2.3.5 水解度测定 | 第38-39页 |
| 2.2.3.6 单因素及响应面试验设计 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-52页 |
| 2.3.1 酶解液的氨基酸分析 | 第40-42页 |
| 2.3.2 木瓜蛋白酶水解鸭肫蛋白单因素试验 | 第42-46页 |
| 2.3.2.1 酶解时间对水解度和DPPH清除率的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.2.2 温度对水解度和DPPH清除率的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.2.3 加酶量对水解度和DPPH清除率的影响 | 第44页 |
| 2.3.2.4 pH值对水解度和DPPH清除率的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.2.5 不同料液比对水解度和DPPH清除率的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.3 响应面优化试验分析 | 第46-51页 |
| 2.3.3.1 响应面优化及结果分析 | 第47-50页 |
| 2.3.3.2 DPPH清除率响应面优化及结果 | 第50-51页 |
| 2.3.4 鸭肫蛋白水解度与DPPH自由基清除能力的关系 | 第51-52页 |
| 2.3.5 鸭肫酶解产物对DPPH清除率 | 第52页 |
| 2.4 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第三章 鸭肫酶解多肽体外抗氧化活性及对DNA损伤保护作用研究 | 第56-68页 |
| 3.1 前言 | 第56-57页 |
| 3.2 材料和方法 | 第57-60页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第57页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第57-58页 |
| 3.2.3 方法 | 第58-60页 |
| 3.2.3.1 鸭肫多肽的制备 | 第58页 |
| 3.2.3.2 DPPH清除率测定 | 第58页 |
| 3.2.3.3 对超氧阴离子自由基的清除作用 | 第58-59页 |
| 3.2.3.4 对羟基自由基的清除作用 | 第59页 |
| 3.2.3.5 对过氧化氢的清除作用 | 第59页 |
| 3.2.3.6 对DNA损伤的保护作用 | 第59-60页 |
| 3.2.3.7 数据处理 | 第60页 |
| 3.3 结果与分析 | 第60-63页 |
| 3.3.1 不同分子量鸭肫酶解产物肽对DPPH清除率 | 第60-61页 |
| 3.3.2 鸭肫肽ZT1对超氧阴离子的清除作用 | 第61页 |
| 3.3.3 鸭肫肽ZT1对羟基自由基的清除作用 | 第61-62页 |
| 3.3.4 鸭肫肽ZT1对过氧化氢的清除作用 | 第62-63页 |
| 3.3.5 鸭肫肽ZT1对DNA损伤的保护作用 | 第63页 |
| 3.4 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 第四章 鸭肫酶解产物抗氧化肽的分离纯化与鉴定 | 第68-84页 |
| 4.1 前言 | 第68-69页 |
| 4.2 材料和方法 | 第69-74页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第69-70页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第70页 |
| 4.2.3 试验方法 | 第70-74页 |
| 4.2.3.1 鸭肫酶解产物分离纯化流程图 | 第70-71页 |
| 4.2.3.2 原料制备 | 第71页 |
| 4.2.3.3 鸭肫肽的ORAC值的测定 | 第71-72页 |
| 4.2.3.4 中空纤维素膜超滤法分离 | 第72页 |
| 4.2.3.5 鸭肫肽分子量测定及分布 | 第72页 |
| 4.2.3.6 葡聚糖凝胶色谱分离 | 第72-73页 |
| 4.2.3.7 半制备RP-HPLC分离 | 第73页 |
| 4.2.3.8 质谱技术鉴定氨基酸序列 | 第73-74页 |
| 4.3 结果与分析 | 第74-80页 |
| 4.3.1 鸭肫酶解液超滤不同分子量抗氧化活性ORAC值 | 第74-75页 |
| 4.3.2 ZT1 (< 3 kDa)产物分子量及分子量分布 | 第75-76页 |
| 4.3.3 凝胶色谱分离鸭肫酶解产物ZT1及各组分ORAC值 | 第76-77页 |
| 4.3.4 半制备型液相色谱分离纯化结果 | 第77-78页 |
| 4.3.5 抗氧化肽质谱图分析 | 第78-80页 |
| 4.4 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 第五章 抗氧化肽构效关系分析及建模验算 | 第84-107页 |
| 5.1 引言 | 第84-85页 |
| 5.2 数据与方法 | 第85-97页 |
| 5.2.1 数据来源 | 第85-86页 |
| 5.2.2 抗氧化肽性质分析方法 | 第86页 |
| 5.2.3 ORAC值测定 | 第86页 |
| 5.2.4 多元线性回归分析建模方法 | 第86-87页 |
| 5.2.5 偏最小二乘模型建模方法 | 第87-88页 |
| 5.2.6 人工神经网络建模方法 | 第88-97页 |
| 5.3 结果与验算预测 | 第97-103页 |
| 5.3.1 ACD/Labs软件对抗氧化肽性质分析 | 第97-98页 |
| 5.3.2 MLR建模分析 | 第98-100页 |
| 5.3.3 PLS建模分析 | 第100页 |
| 5.3.4 BPNN的QSAR分析 | 第100-102页 |
| 5.3.5 肽活性预测与观测 | 第102-103页 |
| 5.4 结论 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-107页 |
| 第六章 鸭肫合成肽的抗氧化活性机理研究 | 第107-126页 |
| 6.1 前言 | 第107-108页 |
| 6.2 材料与仪器 | 第108-109页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第108页 |
| 6.2.2 试剂 | 第108-109页 |
| 6.2.3 仪器 | 第109页 |
| 6.3 实验方法 | 第109-115页 |
| 6.3.1 鸭肫合成肽的合成 | 第109-111页 |
| 6.3.1.1 肽链的合成 | 第109-110页 |
| 6.3.1.2 合成 | 第110页 |
| 6.3.1.3 肽链的纯化及纯度鉴定 | 第110-111页 |
| 6.3.2 鸭肫合成肽液的配制 | 第111页 |
| 6.3.3 细胞培养 | 第111页 |
| 6.3.4 细胞生长抑制率检测 | 第111-112页 |
| 6.3.5 总蛋白的提取 | 第112页 |
| 6.3.6 蛋白质浓度的测定及标准曲线的绘制 | 第112页 |
| 6.3.7 细胞内超氧化物岐化(SOD)活性的测定 | 第112-113页 |
| 6.3.8 细胞内过氧化氢酶(CAT)活性的检测 | 第113页 |
| 6.3.9 细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的测定 | 第113页 |
| 6.3.10 细胞周期检测 | 第113-114页 |
| 6.3.11 细胞凋亡检测 | 第114页 |
| 6.3.12 qRT-PCR检测SOD、CAT、GSH-Px mRNA的表达 | 第114-115页 |
| 6.3.13 数据统计学分析 | 第115页 |
| 6.4 结果与分 | 第115-121页 |
| 6.4.1 鸭肫合成肽的合成 | 第115-116页 |
| 6.4.2 细胞生长抑制率 | 第116-117页 |
| 6.4.3 HT对BPH1细胞周期的调控 | 第117-118页 |
| 6.4.4 HT对细胞凋亡的影响 | 第118-119页 |
| 6.4.5 HT对BPH1细胞内抗氧化酶活力的影响 | 第119-120页 |
| 6.4.6 qRT-PCR检测SOD、CAT、GSH-Px mRNA的表达 | 第120-121页 |
| 6.5 结论 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-126页 |
| 第七章 结论与展望 | 第126-128页 |
| 1.结论 | 第126-127页 |
| 2.论文创新点 | 第127页 |
| 3.展望 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文、专利及主持参加项目 | 第129-132页 |
