| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-28页 |
| 1.1 肺癌简介 | 第11-15页 |
| 1.2 肺癌的病因概述 | 第15-18页 |
| 1.3 测序技术与肺癌的靶向治疗 | 第18-20页 |
| 1.4 测序技术简述 | 第20-24页 |
| 1.5 测序技术在肺癌中的应用 | 第24-28页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第28-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-31页 |
| 2.1.1 实验所用细胞系 | 第28页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验试剂耗材 | 第29-30页 |
| 2.1.4 实验所用抗体 | 第30页 |
| 2.1.5 实验所用引物序列 | 第30页 |
| 2.1.6 主要试剂的配置 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-40页 |
| 2.2.1 细胞的复苏 | 第31页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第31-32页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第32页 |
| 2.2.4 TRIZOL法提取RNA | 第32-33页 |
| 2.2.5 RNA反转录为cDNA | 第33页 |
| 2.2.6 RT-PCR | 第33-34页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR | 第34页 |
| 2.2.8 SiRNA干扰 | 第34-35页 |
| 2.2.9 SDS煮沸法提蛋白质 | 第35页 |
| 2.2.10 蛋白质免疫印迹 | 第35页 |
| 2.2.11 pcDNA-Flag-ZNF511质粒的构建 | 第35-36页 |
| 2.2.12 DNA胶回收 | 第36-37页 |
| 2.2.13 质粒的瞬时转染 | 第37页 |
| 2.2.14 慢病毒转染ZNF511 | 第37-38页 |
| 2.2.15 CRISPR/Cas9基因敲除术构建ZNF511敲除稳定株 | 第38-39页 |
| 2.2.16 统计分析 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-58页 |
| 3.1 肿瘤组织与癌旁组织体细胞突变情况 | 第40-42页 |
| 3.2 癌旁组织突变情况分组比较 | 第42-43页 |
| 3.3 腺癌癌旁基因组突变特征 | 第43-44页 |
| 3.4 高频突变基因突变情况 | 第44-46页 |
| 3.5 癌旁突变与预后正相关的基因及病人存活曲线 | 第46-47页 |
| 3.6 癌旁突变与预后负相关的基因及病人存活曲线 | 第47-49页 |
| 3.7 ZNF511突变情况分析 | 第49-50页 |
| 3.8 ZNF511表达量与预后相关性 | 第50-51页 |
| 3.9 ZNF511野生型与突变型质粒构建 | 第51-52页 |
| 3.10 ZNF511在各细胞系mRNA水平表达检测 | 第52页 |
| 3.11 ZNF511野生型及突变型质粒的瞬时转染 | 第52-53页 |
| 3.12 慢病毒稳转株的构建 | 第53-54页 |
| 3.13 在细胞系中干扰ZNF511 | 第54-55页 |
| 3.14 干扰ZNF511对细胞增殖的影响 | 第55-56页 |
| 3.15 干扰ZNF511对信号通路的影响 | 第56-57页 |
| 3.16 CRISPR/CAS9稳定敲除细胞株的构建 | 第57-58页 |
| 第四章 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
