摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 绪论 | 第15-27页 |
1.1 流感病毒简介 | 第16-18页 |
1.1.1 流感病毒组成 | 第16页 |
1.1.2 流感病毒的复制 | 第16-17页 |
1.1.3 流感病毒的重组、进化与生态 | 第17-18页 |
1.2 流感病毒的宿主种类 | 第18-22页 |
1.2.1 流感病毒在鸟类中的分布 | 第19-20页 |
1.2.2 流感病毒在蝙蝠体内的分布 | 第20页 |
1.2.3 流感病毒在猪体内的分布 | 第20-21页 |
1.2.4 流感病毒在人体内的分布 | 第21页 |
1.2.5 流感病毒在马体内的分布 | 第21页 |
1.2.6 流感病毒在犬和猫体内的分布 | 第21-22页 |
1.2.7 流感病毒在海洋哺乳动物体内的分布 | 第22页 |
1.3 禽类感染流感病毒的病理变化特点 | 第22-24页 |
1.3.1 鸡形目 | 第22-23页 |
1.3.2 雁行目 | 第23-24页 |
1.3.3 其他禽类 | 第24页 |
1.4 鸟类在流感病毒中的角色及流感病毒在鸟类中的传播方式 | 第24-25页 |
1.5 安徽省概况 | 第25-26页 |
1.6 本研究目的与意义 | 第26-27页 |
2 2014-2015 年安徽省野鸟源禽流感病毒的遗传演化分析 | 第27-89页 |
2.1 材料 | 第27-30页 |
2.1.1 试验样品 | 第27-28页 |
2.1.2 鸡胚和血清 | 第28页 |
2.1.3 试剂 | 第28-29页 |
2.1.4 主要仪器与耗材 | 第29-30页 |
2.2 方法 | 第30-33页 |
2.2.1 野禽粪便样品采集 | 第30页 |
2.2.2 样品的处理,分离与鉴定 | 第30-31页 |
2.2.3 病毒的纯化 | 第31-32页 |
2.2.4 核酸提取及反转录(Trizol法) | 第32页 |
2.2.5 PCR扩增 | 第32页 |
2.2.6 胶回收 | 第32-33页 |
2.2.7 测序 | 第33页 |
2.2.8 数据分析及处理 | 第33页 |
2.3 结果 | 第33-85页 |
2.3.1 病毒分离结果 | 第33-36页 |
2.3.2 流感病毒的电镜鉴定结果 | 第36页 |
2.3.3 遗传演化分析-表面基因 | 第36-65页 |
2.3.4 遗传演化分析-内部基因 | 第65-81页 |
2.3.5 病毒来源的初步推测 | 第81-85页 |
2.4 讨论 | 第85-87页 |
2.5 本章小结 | 第87-89页 |
3 野鸟源禽流感病毒对哺乳动物及人危害的风险评估 | 第89-100页 |
3.1 实验材料 | 第89-90页 |
3.1.1 实验动物 | 第89页 |
3.1.2 实验器材 | 第89页 |
3.1.3 实验试剂 | 第89页 |
3.1.4 细胞 | 第89页 |
3.1.5 毒株 | 第89-90页 |
3.2 实验方法 | 第90-91页 |
3.2.1 细胞的复苏与培养 | 第90页 |
3.2.2 EID50的测定 | 第90-91页 |
3.2.3 小鼠感染实验 | 第91页 |
3.2.4 TCID50的测定 | 第91页 |
3.2.5 A549细胞的病毒复制动力学分析 | 第91页 |
3.3 实验结果 | 第91-97页 |
3.3.1 禽流感病毒的EID50的测定 | 第91-92页 |
3.3.2 H1亚型小鼠的感染性实验 | 第92-93页 |
3.3.3 H6亚型小鼠的感染性实验 | 第93-94页 |
3.3.4 H9亚型小鼠的感染性实验 | 第94-95页 |
3.3.5 各亚型病毒在小鼠鼻甲内的复制能力 | 第95页 |
3.3.6 各亚型病毒在小鼠肺脏内的复制能力 | 第95-96页 |
3.3.7 TCID_(50)的测定 | 第96页 |
3.3.8 A549细胞生长曲线 | 第96-97页 |
3.4 讨论 | 第97-99页 |
3.5 本章小结 | 第99-100页 |
4 先天性免疫中风暴因子的初步评估 | 第100-115页 |
4.1 实验材料 | 第100-101页 |
4.1.1 实验试剂 | 第100页 |
4.1.2 细胞 | 第100页 |
4.1.3 实验仪器和耗材 | 第100页 |
4.1.4 引物的设计合成 | 第100-101页 |
4.2 实验方法 | 第101-103页 |
4.2.1 TCID50的测定 | 第101页 |
4.2.2 鸡胚和鸭胚成纤维细胞的制备 | 第101页 |
4.2.3 引物 | 第101-102页 |
4.2.4 样品的制备 | 第102-103页 |
4.2.5 数据分析 | 第103页 |
4.3 实验结果 | 第103-110页 |
4.3.1 TCID_(50)的测定 | 第103-104页 |
4.3.2 荧光定量RT-PCR方法鉴定引物的特异性 | 第104-105页 |
4.3.3 各细胞因子的检测 | 第105-110页 |
4.4 讨论 | 第110-114页 |
4.5 本章小结 | 第114-115页 |
结论 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-131页 |
附录 | 第131-132页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第132-133页 |
致谢 | 第133-135页 |
附表 | 第135-136页 |