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2014-2015年间中国安徽省野鸟源禽流感病毒的流行病学监测和致病性评价

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 绪论第15-27页
    1.1 流感病毒简介第16-18页
        1.1.1 流感病毒组成第16页
        1.1.2 流感病毒的复制第16-17页
        1.1.3 流感病毒的重组、进化与生态第17-18页
    1.2 流感病毒的宿主种类第18-22页
        1.2.1 流感病毒在鸟类中的分布第19-20页
        1.2.2 流感病毒在蝙蝠体内的分布第20页
        1.2.3 流感病毒在猪体内的分布第20-21页
        1.2.4 流感病毒在人体内的分布第21页
        1.2.5 流感病毒在马体内的分布第21页
        1.2.6 流感病毒在犬和猫体内的分布第21-22页
        1.2.7 流感病毒在海洋哺乳动物体内的分布第22页
    1.3 禽类感染流感病毒的病理变化特点第22-24页
        1.3.1 鸡形目第22-23页
        1.3.2 雁行目第23-24页
        1.3.3 其他禽类第24页
    1.4 鸟类在流感病毒中的角色及流感病毒在鸟类中的传播方式第24-25页
    1.5 安徽省概况第25-26页
    1.6 本研究目的与意义第26-27页
2 2014-2015 年安徽省野鸟源禽流感病毒的遗传演化分析第27-89页
    2.1 材料第27-30页
        2.1.1 试验样品第27-28页
        2.1.2 鸡胚和血清第28页
        2.1.3 试剂第28-29页
        2.1.4 主要仪器与耗材第29-30页
    2.2 方法第30-33页
        2.2.1 野禽粪便样品采集第30页
        2.2.2 样品的处理,分离与鉴定第30-31页
        2.2.3 病毒的纯化第31-32页
        2.2.4 核酸提取及反转录(Trizol法)第32页
        2.2.5 PCR扩增第32页
        2.2.6 胶回收第32-33页
        2.2.7 测序第33页
        2.2.8 数据分析及处理第33页
    2.3 结果第33-85页
        2.3.1 病毒分离结果第33-36页
        2.3.2 流感病毒的电镜鉴定结果第36页
        2.3.3 遗传演化分析-表面基因第36-65页
        2.3.4 遗传演化分析-内部基因第65-81页
        2.3.5 病毒来源的初步推测第81-85页
    2.4 讨论第85-87页
    2.5 本章小结第87-89页
3 野鸟源禽流感病毒对哺乳动物及人危害的风险评估第89-100页
    3.1 实验材料第89-90页
        3.1.1 实验动物第89页
        3.1.2 实验器材第89页
        3.1.3 实验试剂第89页
        3.1.4 细胞第89页
        3.1.5 毒株第89-90页
    3.2 实验方法第90-91页
        3.2.1 细胞的复苏与培养第90页
        3.2.2 EID50的测定第90-91页
        3.2.3 小鼠感染实验第91页
        3.2.4 TCID50的测定第91页
        3.2.5 A549细胞的病毒复制动力学分析第91页
    3.3 实验结果第91-97页
        3.3.1 禽流感病毒的EID50的测定第91-92页
        3.3.2 H1亚型小鼠的感染性实验第92-93页
        3.3.3 H6亚型小鼠的感染性实验第93-94页
        3.3.4 H9亚型小鼠的感染性实验第94-95页
        3.3.5 各亚型病毒在小鼠鼻甲内的复制能力第95页
        3.3.6 各亚型病毒在小鼠肺脏内的复制能力第95-96页
        3.3.7 TCID_(50)的测定第96页
        3.3.8 A549细胞生长曲线第96-97页
    3.4 讨论第97-99页
    3.5 本章小结第99-100页
4 先天性免疫中风暴因子的初步评估第100-115页
    4.1 实验材料第100-101页
        4.1.1 实验试剂第100页
        4.1.2 细胞第100页
        4.1.3 实验仪器和耗材第100页
        4.1.4 引物的设计合成第100-101页
    4.2 实验方法第101-103页
        4.2.1 TCID50的测定第101页
        4.2.2 鸡胚和鸭胚成纤维细胞的制备第101页
        4.2.3 引物第101-102页
        4.2.4 样品的制备第102-103页
        4.2.5 数据分析第103页
    4.3 实验结果第103-110页
        4.3.1 TCID_(50)的测定第103-104页
        4.3.2 荧光定量RT-PCR方法鉴定引物的特异性第104-105页
        4.3.3 各细胞因子的检测第105-110页
    4.4 讨论第110-114页
    4.5 本章小结第114-115页
结论第115-116页
参考文献第116-131页
附录第131-132页
攻读学位期间发表的学术论文第132-133页
致谢第133-135页
附表第135-136页

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