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磷酸化Hsp27与STAT3结合促进自噬抑制肝细胞脂质变性的分子机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第1章 绪论第9-24页
    1.1 非酒精性脂肪肝病第9-12页
        1.1.1 非酒精性脂肪肝病概述第9-10页
        1.1.2 非酒精性脂肪肝病的治疗第10-12页
    1.2 自噬第12-18页
        1.2.1 自噬的概述第12-13页
        1.2.2 自噬的调控第13-17页
        1.2.3 自噬的作用第17-18页
    1.3 热休克蛋白27(Hsp27)第18-22页
        1.3.1 热休克蛋白概述第18页
        1.3.2 Hsp27的结构和功能第18-21页
        1.3.3 Hsp27与脂质变性第21页
        1.3.4 Hsp27与自噬第21-22页
    1.4 本课题的研究思路和内容第22-24页
第2章 磷酸化Hsp27激活自噬抑制肝细胞脂质变性第24-60页
    2.1 实验材料与方法第24-32页
        2.1.1 抗体与试剂第24-25页
        2.1.2 动物实验第25页
        2.1.3 肝脏组织中甘油三酯(TG)含量测定第25-26页
        2.1.4 冰冻切片第26页
        2.1.5 肝脏组织免疫染色第26页
        2.1.6 肝脏组织总RNA提取及Real-time PCR第26-27页
        2.1.7 表达质粒第27-28页
        2.1.8 细胞培养与转染第28页
        2.1.9 软脂酸储备液的配制第28页
        2.1.10 CCK8细胞活力检测第28-29页
        2.1.11 油红O(Oil red O,ORO)染色第29-30页
        2.1.12 蛋白提取第30页
        2.1.13 Western blot第30-31页
        2.1.14 透射电镜检测第31页
        2.1.15 Lysotracker Red及LC3共定位第31-32页
        2.1.16 统计分析第32页
    2.2 实验结果第32-57页
        2.2.1 高脂喂养诱导C57BL/6小鼠肝脏脂质变性第32-34页
        2.2.2 高脂喂养对小鼠肝脏Hsp25表达及磷酸化的影响第34-36页
        2.2.3 高脂喂养提高小鼠肝脏自噬水平第36-39页
        2.2.4 软脂酸在L02细胞中诱导Hsp27磷酸化和促进自噬激活第39-42页
        2.2.5 Hsp27磷酸化促进自噬激活第42-49页
        2.2.6 磷酸化Hsp27通过激活自噬缓解脂质变性第49-53页
        2.2.7 Hsp25磷酸化对小鼠肝脏自噬和脂质变性的影响第53-57页
    2.3 讨论与分析第57-60页
第3章 Hsp27磷酸化促进自噬的分子机制第60-72页
    3.1 材料与方法第60-61页
        3.1.1 抗体和试剂第60页
        3.1.2 表达质粒第60页
        3.1.3 细胞培养与转染第60-61页
        3.1.4 免疫共沉淀第61页
        3.1.5 统计分析第61页
    3.2 实验结果第61-70页
        3.2.1 Hsp27磷酸化促进eIF2α激活第61-64页
        3.2.2 磷酸化Hsp27与STAT3结合促进STAT3/PKR抑制复合体解离第64-70页
    3.3 讨论与分析第70-72页
第4章 全文总结第72-74页
附录第74-80页
    附录1 全文英文缩写词列表第74-76页
    附录2 实验相关试剂配制第76-79页
    附录3 实验相关仪器列表第79-80页
参考文献第80-98页
攻读博士学位期间取得的科研成果第98-99页
致谢第99-100页

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