摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第9-24页 |
1.1 非酒精性脂肪肝病 | 第9-12页 |
1.1.1 非酒精性脂肪肝病概述 | 第9-10页 |
1.1.2 非酒精性脂肪肝病的治疗 | 第10-12页 |
1.2 自噬 | 第12-18页 |
1.2.1 自噬的概述 | 第12-13页 |
1.2.2 自噬的调控 | 第13-17页 |
1.2.3 自噬的作用 | 第17-18页 |
1.3 热休克蛋白27(Hsp27) | 第18-22页 |
1.3.1 热休克蛋白概述 | 第18页 |
1.3.2 Hsp27的结构和功能 | 第18-21页 |
1.3.3 Hsp27与脂质变性 | 第21页 |
1.3.4 Hsp27与自噬 | 第21-22页 |
1.4 本课题的研究思路和内容 | 第22-24页 |
第2章 磷酸化Hsp27激活自噬抑制肝细胞脂质变性 | 第24-60页 |
2.1 实验材料与方法 | 第24-32页 |
2.1.1 抗体与试剂 | 第24-25页 |
2.1.2 动物实验 | 第25页 |
2.1.3 肝脏组织中甘油三酯(TG)含量测定 | 第25-26页 |
2.1.4 冰冻切片 | 第26页 |
2.1.5 肝脏组织免疫染色 | 第26页 |
2.1.6 肝脏组织总RNA提取及Real-time PCR | 第26-27页 |
2.1.7 表达质粒 | 第27-28页 |
2.1.8 细胞培养与转染 | 第28页 |
2.1.9 软脂酸储备液的配制 | 第28页 |
2.1.10 CCK8细胞活力检测 | 第28-29页 |
2.1.11 油红O(Oil red O,ORO)染色 | 第29-30页 |
2.1.12 蛋白提取 | 第30页 |
2.1.13 Western blot | 第30-31页 |
2.1.14 透射电镜检测 | 第31页 |
2.1.15 Lysotracker Red及LC3共定位 | 第31-32页 |
2.1.16 统计分析 | 第32页 |
2.2 实验结果 | 第32-57页 |
2.2.1 高脂喂养诱导C57BL/6小鼠肝脏脂质变性 | 第32-34页 |
2.2.2 高脂喂养对小鼠肝脏Hsp25表达及磷酸化的影响 | 第34-36页 |
2.2.3 高脂喂养提高小鼠肝脏自噬水平 | 第36-39页 |
2.2.4 软脂酸在L02细胞中诱导Hsp27磷酸化和促进自噬激活 | 第39-42页 |
2.2.5 Hsp27磷酸化促进自噬激活 | 第42-49页 |
2.2.6 磷酸化Hsp27通过激活自噬缓解脂质变性 | 第49-53页 |
2.2.7 Hsp25磷酸化对小鼠肝脏自噬和脂质变性的影响 | 第53-57页 |
2.3 讨论与分析 | 第57-60页 |
第3章 Hsp27磷酸化促进自噬的分子机制 | 第60-72页 |
3.1 材料与方法 | 第60-61页 |
3.1.1 抗体和试剂 | 第60页 |
3.1.2 表达质粒 | 第60页 |
3.1.3 细胞培养与转染 | 第60-61页 |
3.1.4 免疫共沉淀 | 第61页 |
3.1.5 统计分析 | 第61页 |
3.2 实验结果 | 第61-70页 |
3.2.1 Hsp27磷酸化促进eIF2α激活 | 第61-64页 |
3.2.2 磷酸化Hsp27与STAT3结合促进STAT3/PKR抑制复合体解离 | 第64-70页 |
3.3 讨论与分析 | 第70-72页 |
第4章 全文总结 | 第72-74页 |
附录 | 第74-80页 |
附录1 全文英文缩写词列表 | 第74-76页 |
附录2 实验相关试剂配制 | 第76-79页 |
附录3 实验相关仪器列表 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-98页 |
攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |