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嗜水气单胞菌成膜相关基因鉴定及其功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 引言第11-18页
   ·嗜水气单胞菌研究概述第11-12页
     ·概述第11页
     ·嗜水气单胞菌研究现状第11-12页
   ·生物膜研究现状第12-15页
     ·生物膜形态观察第12-13页
     ·生物膜形成调控机制研究第13-14页
     ·耐药性机制研究第14-15页
   ·转座子和转座子标签技术第15-17页
     ·转座子第15页
     ·转座子标签诱变技术第15-16页
     ·Mini-Tn10的转座诱变机制第16-17页
   ·主要研究内容和本研究的意义第17-18页
第2章 致病性嗜水气单胞菌生物膜的形成特性第18-26页
   ·材料与方法第18-20页
     ·菌株及培养条件第18页
     ·生物膜的形成与测定第18-19页
     ·不同培养时间的生物膜测定第19页
     ·不同初始菌液浓度的生物膜测定第19页
     ·不同培养温度的生物膜测定第19页
     ·不同pH 值对嗜水气单胞菌生物膜形成的影响第19页
     ·Ca~(2+)、Mg~(2+)对于嗜水气单胞菌生物膜形成的影响第19页
     ·不同组织提取液包被对于嗜水气单胞菌生物膜形成的影响第19-20页
     ·数据处理第20页
   ·结果与分析第20-24页
     ·培养时间对嗜水气单胞菌成膜的影响第20页
     ·初始菌液浓度对嗜水气单胞菌成膜的影响第20-21页
     ·培养温度对嗜水气单胞菌成膜的影响第21-22页
     ·不同初始pH 值对嗜水气单胞菌生物膜形成的影响第22页
     ·不同Ca~(2+)、Mg~(2+)浓度对于嗜水气单胞菌生物膜形成的影响第22-23页
     ·鳗鲡不同组织提取液对嗜水气单胞菌成膜的影响第23-24页
   ·讨论第24-26页
第3章 嗜水气单胞菌成膜缺陷突变株构建、筛选与鉴定第26-40页
   ·材料第26-27页
     ·试验用菌第26页
     ·主要实验仪器第26-27页
     ·主要试剂第27页
   ·方法第27-33页
     ·细菌结合转化构建嗜水气单胞菌突变体库第27-29页
     ·嗜水气单胞菌的成膜缺陷菌株的筛选第29页
     ·转座突变菌株的PCR鉴定和Southern杂交鉴定第29-33页
   ·结果与分析第33-39页
     ·质粒pLOF/Km的提取及转化E.coli Sm10第33-34页
     ·成膜缺陷突变株的筛选结果第34-35页
     ·突变株的PCR 鉴定第35-36页
     ·突变株的Southern鉴定第36-39页
   ·讨论第39-40页
第4章 突变株中mini-Tn10插入位点侧翼序列分析第40-54页
   ·材料和方法第40-41页
     ·试验用菌和载体第40页
     ·主要实验仪器第40-41页
     ·主要试剂第41页
   ·方法第41-47页
     ·基因组DNA 的抽取第41页
     ·热不对称PCR 法克隆转座子插入位点侧翼序列第41-45页
     ·PCR 产物回收、连接、转化和测序第45-46页
     ·序列分析第46-47页
   ·结果第47-52页
     ·基因组DNA 提取的结果第47页
     ·Actail-PCR结果第47-48页
     ·Tail-PCR结果第48-49页
     ·基因序列分析结果第49-52页
   ·讨论第52-54页
第5章 嗜水气单胞菌成膜缺陷突变株生物学特性研究第54-60页
   ·材料第54-55页
     ·试验用菌第54页
     ·主要实验仪器第54页
     ·主要试剂第54-55页
   ·方法第55-56页
     ·生长曲线的测定第55页
     ·对鳗鲡肠粘液粘附实验第55页
     ·胞内存活能力测定第55-56页
   ·结果与分析第56-58页
     ·生长曲线第56-57页
     ·对鳗鲡肠粘液的粘附作用第57页
     ·在鳗鲡外周血巨噬细胞内存活能力第57-58页
   ·讨论第58-60页
第6章 总结与展望第60-61页
   ·总结第60页
   ·展望第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-69页
在学期间发表的学术论文第69页

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