| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-13页 |
| 1.1 酸性环境对酵母生长的影响 | 第8页 |
| 1.2 酵母细胞耐酸机制 | 第8-9页 |
| 1.2.1 改变细胞膜通透性 | 第8页 |
| 1.2.2 转录调控 | 第8-9页 |
| 1.2.3 酸响应蛋白 | 第9页 |
| 1.3 产甘油假丝酵母研究进展 | 第9页 |
| 1.4 转录因子 | 第9-11页 |
| 1.4.1 转录因子结合位点和调控方式 | 第9-10页 |
| 1.4.2 酸应答转录因子HAA1和ASG1 | 第10-11页 |
| 1.5 研究意义及主要研究内容 | 第11-13页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第11页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第11-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-22页 |
| 2.1 材料 | 第13-16页 |
| 2.1.1 实验菌株与载体 | 第13-15页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第15页 |
| 2.1.3 培养基 | 第15-16页 |
| 2.2 方法 | 第16-22页 |
| 2.2.1 酵母染色体DNA的提取 | 第16页 |
| 2.2.2 目标基因的PCR扩增 | 第16-17页 |
| 2.2.3 PCR产物的回收 | 第17页 |
| 2.2.4 重组质粒的构建 | 第17页 |
| 2.2.5 酵母表达载体构建与转化 | 第17-18页 |
| 2.2.6 重组菌耐受性测定 | 第18页 |
| 2.2.7 酵母总RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.2.8 酵母总RNA的纯化及反转录 | 第19-20页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第20页 |
| 2.2.10 重组菌发酵的乙醇测定 | 第20页 |
| 2.2.11 酶活性测定 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-45页 |
| 3.1 产甘油假丝酵母酸应答转录因子的获得 | 第22-31页 |
| 3.1.1 产甘油假丝酵母与酿酒酵母酸耐受性比较 | 第22页 |
| 3.1.2 酸应答转录因子的克隆 | 第22-23页 |
| 3.1.3 酸应答转录因子生物信息学分析 | 第23-25页 |
| 3.1.4 酸应答转录因子的确认 | 第25-31页 |
| 3.2 酸应答转录因子的表达 | 第31-41页 |
| 3.2.1 过表达酸应答转录因子C. glycerinogenes菌株的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.2 过表达酸应答转录因子C. glycerinogenes耐受性测定 | 第32-34页 |
| 3.2.3 过表达酸应答转录因子S. cerevisiae菌株的构建 | 第34-38页 |
| 3.2.4 过表达酸应答转录因子S. cerevisiae耐受性测定 | 第38-41页 |
| 3.3 耐酸重组酵母发酵分析 | 第41-45页 |
| 3.3.1 耐酸重组S. cerevisiae发酵分析 | 第41-42页 |
| 3.3.2 耐酸重组C. glycerinogenes发酵分析 | 第42-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-47页 |
| 主要结论 | 第45页 |
| 展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
