英文缩略词表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第14-20页 |
一、EML4蛋白的结构和功能 | 第14-15页 |
二、ALK蛋白的结构和功能 | 第15页 |
三、EML4-ALK融合基因的分类、结构和致癌机理 | 第15-16页 |
四、融合基因的检测现状 | 第16-17页 |
五、外泌体的形成和组成 | 第17-19页 |
六、外泌体在肿瘤诊断中的应用 | 第19页 |
七、拟解决的科学问题 | 第19-20页 |
第一部分 肿瘤细胞外泌体中融合基因mRNA的检测 | 第20-40页 |
1. 实验材料、试剂耗材和仪器设备 | 第20-23页 |
1.1 细胞株 | 第20页 |
1.2 试剂耗材 | 第20-21页 |
1.3 主要试剂配制 | 第21-22页 |
1.4 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2. 方法 | 第23-28页 |
2.1 外泌体的提取和鉴定 | 第23-24页 |
2.2 细胞中融合基因的检测 | 第24-27页 |
2.3 细胞外泌体中融合基因的检测 | 第27-28页 |
3. 结果 | 第28-38页 |
3.1 纯化外泌体的形态特征 | 第28-29页 |
3.2 H3122细胞及其培养上清外泌体中融合基因的特点 | 第29-32页 |
3.3 H2228细胞及其培养上清外泌体中融合基因的特点 | 第32-36页 |
3.4 K562细胞及其培养上清外泌体中融合基因的特点 | 第36-38页 |
4. 讨论 | 第38-40页 |
第二部分 非小细胞肺癌患者血清外泌体中融合基因的基因型分析 | 第40-53页 |
1. 实验材料、试剂和仪器设备 | 第40-41页 |
1.1 临床标本 | 第40页 |
1.2 试剂耗材 | 第40页 |
1.3 主要试剂配制 | 第40-41页 |
1.4 仪器设备 | 第41页 |
2. 方法 | 第41-43页 |
2.1 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肿瘤组织的融合基因 | 第41-42页 |
2.2 免疫印迹实验(Western Blot)检测肿瘤组织的融合基因 | 第42页 |
2.3 免疫组织化学(IHC)方法检测肿瘤组织的融合蛋白 | 第42-43页 |
2.4 RT-PCR方法检测血清外泌体EML4-ALK融合基因 | 第43页 |
3. 结果 | 第43-50页 |
4. 讨论 | 第50-53页 |
第三部分 荷瘤裸鼠血清外泌体中融合基因的检测 | 第53-59页 |
1. 实验动物、试剂耗材,仪器设备 | 第53页 |
1.1 实验动物 | 第53页 |
1.2 试剂耗材 | 第53页 |
1.3 仪器设备 | 第53页 |
2. 方法 | 第53-54页 |
2.1 肺癌细胞裸鼠荷瘤模型的建立 | 第53-54页 |
2.2 裸鼠肿瘤组织的免疫组化实验 | 第54页 |
2.3 荷瘤裸鼠血清外泌体中EML4-ALK融合基因的检测 | 第54页 |
3. 结果 | 第54-57页 |
3.1 建立肺癌细胞裸鼠荷瘤模型 | 第54-55页 |
3.2 荷瘤裸鼠血清外泌体中EML4-ALK融合基因的变化规律 | 第55-57页 |
4. 讨论 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
个人简历 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |