枳根全长cDNA文库的构建及生物信息学研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·我国柑橘产业概况 | 第10页 |
| ·柑橘基因工程育种研究 | 第10-11页 |
| ·cDNA文库、表达序列标签与基因发掘 | 第11-18页 |
| ·cDNA文库 | 第11-13页 |
| ·表达序列标签 | 第13-15页 |
| ·柑橘cDNA文库和基因发掘 | 第15-18页 |
| 第二章 引言 | 第18-20页 |
| ·研究背景及意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 第三章 材料与方法 | 第20-28页 |
| ·试验材料 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·生化试剂 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·材料处理 | 第20页 |
| ·总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·合成单链cDNA | 第21页 |
| ·合成双链cDNA | 第21-22页 |
| ·蛋白酶消化及限制性酶酶切 | 第22-23页 |
| ·过柱纯化 | 第23-24页 |
| ·dscDNA与载体连接 | 第24页 |
| ·热激转化重组的质粒 | 第24-25页 |
| ·测定原始文库的滴度 | 第25页 |
| ·检测原始文库的重组率和插入片段长度 | 第25-26页 |
| ·文库扩增和保存 | 第26页 |
| ·EST测序及生物信息学分析 | 第26-28页 |
| 第四章 结果与分析 | 第28-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第28页 |
| ·单链cDNA合成及LD-PCR | 第28-29页 |
| ·双链cDNA的纯化 | 第29页 |
| ·cDNA文库的质量评价 | 第29-30页 |
| ·EST测序结果和生物信息学分析 | 第30-48页 |
| ·EST序列测定 | 第30-31页 |
| ·EST序列拼接 | 第31页 |
| ·EST的生物信息学分析 | 第31-34页 |
| ·部分全长基因的生物信息学分析 | 第34-48页 |
| 第五章 讨论 | 第48-50页 |
| 第六章 小结 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |