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转录因子AtMYB11和AtMYB12在茄科作物上调控多酚类物质合成的研究

摘要第11-13页
ABSTRACT第13-15页
第一章 前言第16-34页
    1.1 多酚类物质的结构与功能第16-26页
        1.1.1 黄酮醇的结构与分类第17-18页
        1.1.2 黄酮醇的生物活性第18-21页
        1.1.3 黄酮醇在植物中的作用第21-22页
        1.1.4 黄酮醇代谢途径及其基因调控第22-23页
        1.1.5 咖啡酰奎尼酸的结构与功能分析第23-25页
        1.1.6 咖啡酰奎尼酸代谢途径及其基因调控第25-26页
    1.2 植物组织特异性启动子的研究进展第26-28页
        1.2.1 番茄果实特异性启动子E8的研究进展第27-28页
        1.2.2 马铃薯块茎特异性启动子Patatin的研究进展第28页
    1.3 转基因作物标记基因的剔除第28-29页
    1.4 MYB类转录因子的研究进展第29-33页
        1.4.1 拟南芥MYB类转录因子AtMYB12的研究进展第31-32页
        1.4.2 拟南芥MYB类转录因子AtMYB11的研究进展第32-33页
    1.5 本研究的目的与意义第33-34页
第二章 AtMYB11在两种茄科作物中的功能研究第34-55页
    1 材料与方法第34-43页
        1.1 烟草与番茄材料及培养第34页
        1.2 菌株和载体第34页
        1.3 常用酶与生化试剂第34页
        1.4 常用仪器第34页
        1.5 溶液及培养基的配制第34-35页
        1.6 核酸操作及载体构建第35-37页
        1.7 农杆菌介导的番茄遗传转化第37-39页
        1.8 转基因植株的阳性检测第39页
        1.9 黄酮醇及咖啡酰奎尼酸含量检测第39-40页
        1.10 转基因植株的基因表达检测(qRT-PCR)第40-42页
        1.11 转基因番茄果实抗氧化能力分析第42-43页
    2 结果与分析第43-53页
        2.1 AtMYB11基因番茄表达载体的构建第43页
        2.2 转基因植株阳性检测第43-44页
        2.3 AtMYB11基因在番茄中表达对其表型的影响第44-45页
        2.4 AtMYB11基因在番茄中表达对其多酚物质含量的影响第45-48页
        2.5 转AtMYB11基因番茄果实中多酚合成相关基因的表达量分析第48页
        2.6 AtMYB11基因对番茄果实抗氧化能力的影响第48-49页
        2.7 AtMYB11基因在烟草中的异源表达第49-51页
        2.8 转AtMYB11基因烟草中多酚合成相关基因的表达量分析第51-53页
    3 讨论第53-55页
        3.1 AtMYB11对咖啡酰奎尼酸的调控作用第53页
        3.2 AtMYB11对多酚合成相关基因的调控作用第53-54页
        3.3 转AtMYB11基因番茄果实的抗氧化能力第54-55页
第三章 AtMYB12在两种茄科作物中的功能研究第55-77页
    1 材料与方法第55-58页
        1.1 植物材料及培养第55页
        1.2 DNA及RNA抽取第55页
        1.3 RT-PCR和定量PCR分析第55页
        1.4 转基因植物中多酚类物质含量检测第55-56页
        1.5 转AtMYB12基因烟草对多种病害抗性检测第56-58页
            1.5.1 供试病原菌接种方法及其病害分析第56-57页
            1.5.2 细胞学染色第57页
            1.5.3 活性氧检测第57-58页
    2 结果与分析第58-75页
        2.1 AtMYB12基因在烟草中表达影响烟草叶片中多酚物质含量第58页
        2.2 转AtMYB12基因烟草对青枯病的抗性分析第58-59页
        2.3 转AtMYB12基因烟草对两种真菌性病害的抗性分析第59-63页
        2.4 AtMYB12在番茄中表达对其多酚合成的影响第63-64页
        2.5 转AtMYB12基因番茄的转录组分析第64-70页
        2.6 HCT与C3H基因在烟草中的功能验证第70-75页
    3 讨论第75-77页
        3.1 异源表达AtMYB12基因提高烟草对多种病害的抗性第75页
        3.2 AtMYB12基因功能的复杂性第75-77页
第四章 AtMYB12在马铃薯中的异源表达第77-89页
    1 材料与方法第77-80页
        1.1 植物材料及培养第77页
        1.2 转基因植株标记基因剔除第77页
        1.3 DNA及RNA抽取第77页
        1.4 转基因植株阳性检测第77-78页
        1.5 多酚类物质的鉴定第78页
        1.6 转基因植物中多酚类物质含量检测第78页
        1.7 RT-PCR与qRT-PCR第78页
        1.8 转基因马铃薯抗氧化能力分析第78-80页
    2 结果与分析第80-87页
        2.1 无选择标记基因AtMYB12表达的马铃薯的阳性检测第80页
        2.2 无选择标记基因AtMYB12表达的马铃薯块茎中多酚类物质的鉴定第80-83页
        2.3 无选择标记基因AtMYB12表达的马铃薯的块茎中咖啡酰奎尼酸含量检测第83页
        2.4 咖啡酰奎尼酸合成相关基因的表达分析第83-84页
        2.5 无选择标记基因AtMYB12表达的马铃薯块茎中黄酮醇含量检测第84-85页
        2.6 黄酮醇合成相关基因的表达分析第85-86页
        2.7 无选择标记基因AtMYB12表达的马铃薯块茎抗氧化能力分析第86-87页
    3 讨论第87-89页
        3.1 AtMYB12基因在马铃薯块茎中表达对其多酚类物质合成的影响第87-88页
        3.2 标记基因剔除的抗氧化能力提高马铃薯的市场价值第88-89页
结论第89-90页
参考文献第90-102页
致谢第102-104页
攻读博士期间发表论文情况第104-105页
附录Ⅰ第105-106页
附录Ⅱ第106-107页
附录Ⅲ第107页

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