| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-12页 |
| ABSTRACT | 第12-18页 |
| 缩略词表 | 第19-24页 |
| 第一部分 细胞实验--重组慢病毒LV-ENDOSTATIN-GFP载体的建立及体外转染内皮祖细胞 | 第24-80页 |
| 1 前言 | 第24-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-46页 |
| 2.1 主要试剂 | 第26-29页 |
| 2.2 主要仪器 | 第29-31页 |
| 2.3 内皮祖细胞体外分离培养及鉴定 | 第31-33页 |
| 2.3.1 内皮祖细胞体外分离培养 | 第31页 |
| 2.3.2 内皮祖细胞鉴定 | 第31-33页 |
| 2.4 ENDOSTATIN高表达内皮祖细胞株和对照内皮祖细胞的构建 | 第33-43页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第33页 |
| 2.4.2 针对基因Endostatin的慢病毒过表达载体构建和慢病毒包装 | 第33-38页 |
| 2.4.3 病毒侵染效率检测 | 第38-39页 |
| 2.4.4 病毒侵染 | 第39-40页 |
| 2.4.5 嘌呤霉素致死浓度筛选 | 第40页 |
| 2.4.6 稳筛株构建 | 第40-41页 |
| 2.4.7 总RNA的提取 | 第41页 |
| 2.4.8 qRT-PCR分析 | 第41-42页 |
| 2.4.9 Western blot检测 | 第42-43页 |
| 2.5 ENDOSTATIN高表达对内皮祖细胞增殖、分化及迁移能力的影响 | 第43-46页 |
| 2.5.1 实验分组 | 第43页 |
| 2.5.2 qRT-PCR检测Endostatin、VEGF的转录水平 | 第43页 |
| 2.5.3 Western Blot检测 | 第43页 |
| 2.5.4 CCK-8检测 | 第43-44页 |
| 2.5.5 细胞周期 | 第44页 |
| 2.5.6 细胞凋亡 | 第44-45页 |
| 2.5.7 细胞迁移能力检测(Transwell) | 第45页 |
| 2.5.8 细胞分化能力检测 | 第45-46页 |
| 2.6 统计学分析 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-69页 |
| 3.1 内皮祖细胞体外诱导培养和鉴定 | 第46-50页 |
| 3.1.1 内皮祖细胞的培养形态观察 | 第46-47页 |
| 3.1.2 内皮祖细胞的鉴定 | 第47-50页 |
| 3.2 ENDOSTATIN高表达内皮祖细胞株和对照内皮祖细胞的构建 | 第50-61页 |
| 3.2.1 病毒侵染效率检测 | 第50-52页 |
| 3.2.2 病毒侵染 | 第52-55页 |
| 3.2.3 致死浓度筛选实验 | 第55-57页 |
| 3.2.4 稳筛株检测 | 第57-61页 |
| 3.3 ENDOSTATIN高表达对内皮祖细胞增殖、分化及迁移能力的影响 | 第61-69页 |
| 3.3.1 qRT-PCR检测Endostatin、VEGF的转录水平 | 第61-62页 |
| 3.3.2 Western blot检测Endostatin、VEGF的蛋白表达 | 第62-63页 |
| 3.3.3 CCK-8实验结果 | 第63-64页 |
| 3.3.4 细胞周期检测 | 第64-65页 |
| 3.3.5 细胞凋亡检测 | 第65-66页 |
| 3.3.6 Transwell实验结果 | 第66-67页 |
| 3.3.7 细胞分化能力检测 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 第二部分 动物实验—体内验证ENDOSTATIN转染的EPC对血管生成的抑制作用 | 第80-113页 |
| 1 前言 | 第80-82页 |
| 2 材料和方法 | 第82-89页 |
| 2.1 主要试剂 | 第82-83页 |
| 2.2 主要仪器 | 第83页 |
| 2.3 大鼠视网膜新生血管模型的建立 | 第83-84页 |
| 2.4 ENDOSTATIN对大鼠体内血管生成的抑制作用研究 | 第84-88页 |
| 2.4.1 实验分组 | 第84-85页 |
| 2.4.2 活体荧光素眼底血管造影(FFA)检测 | 第85页 |
| 2.4.3 HE染色 | 第85-86页 |
| 2.4.4 免疫组化检测 | 第86-88页 |
| 2.5 统计学分析 | 第88-89页 |
| 3 结果 | 第89-104页 |
| 3.1 动物模型成功建立 | 第89页 |
| 3.2 FFA检查结果 | 第89-96页 |
| 3.3 病理HE染色结果 | 第96-100页 |
| 3.4 ICC检测结果 | 第100-104页 |
| 4 讨论 | 第104-107页 |
| 5 结论 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-113页 |
| 综述 | 第113-134页 |
| 参考文献 | 第122-134页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第134页 |
